哈尔滨医科大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室
- 作品数：34 被引量：43H指数：4
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- 抗坏血酸对镍染毒NIH／3T3细胞P53及Bcl-2蛋白表达的影响被引量：1
- 2018年
- 目的研究抗坏血酸（Ascorbic acid，AA）对镍染毒小鼠胚胎成纤维细胞（NIH／3T3）P53、Bcl-2蛋白表达的影响。方法研究采用染毒浓度为50μg／mL镍精炼尘诱导建立损伤模型，通过测定细胞相对存活率、超氧化物歧化酶（SOD）、乳酸脱氢酶（LDH）和谷胱甘肽过氧化物酶（GsH-Px）活力、过氧化氢（H2O2）和丙二醛（MDA）含量以及p53（野生型）、Bcl-2蛋白表达情况，探讨不同剂量抗坏血酸（25、50、100mmol／L）对镍精炼尘诱导NIH／3T3细胞损伤的保护作用。结果抗坏血酸Ⅲ组可以使NIH／3T3细胞存活率显著提高；细胞凋亡率降低；SOD和GSH—Px的活力明显增加，差异有统计学意义（P〈0．05）；同时可以使MDA和H202水平，以及细胞外LDH酶活力明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。抗坏血酸Ⅱ、Ⅲ组Bcl-2蛋白表达水平均高于镍精炼尘组，差异有统计学意义（P〈0．05）；抗坏血酸各剂量组p53蛋白表达水平均低于镍精炼尘组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论随着抗坏血酸浓度的增加，氧化损伤水平降低，抗氧化酶水平上升，细胞凋亡减少，p53表达降低，Bcl-2表达增加，表明抗坏血酸对镍精炼尘染毒NIH／3T3细胞损伤具有一定的保护作用。
- 田超王玥李吉平王声远夏冰杨越李昶王琪吴永会
- 关键词：镍抗坏血酸蛋白质P53
- 硫酸镍(NiSO_(4))致人支气管上皮细胞凋亡的机制研究
- 2024年
- 目的 研究硫酸镍(NiSO_(4))对人支气管上皮细胞(Beas-2B)的毒作用及损伤机制,并探讨Wnt/β-catenin通路在损伤中的作用。方法 选择不同浓度硫酸镍(0、50、100、200μmol/L)处理Beas-2B细胞24 h,CCK-8法检测硫酸镍的细胞毒性;使用丙二醛和总铁离子检测试剂盒检测细胞内丙二醛、总铁离子含量;使用免疫印迹法(Western blot)检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白Wnt3a、β-catenin和铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、胱氨酸/谷氨酸反转运蛋白(xCT)以及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)表达水平;通路抑制剂XAV-939处理Beas-2B细胞后100μmol/L硫酸镍染毒24 h,检测GPX4、xCT表达水平。结果 Beas-2B细胞存活率随着硫酸镍浓度的升高而降低(F=12.530,P<0.05);丙二醛和总铁离子含量下降,Wnt3a、β-catenin表达逐渐增加(F=9.209、3.936、7.639、23.350,P<0.05), GPX4、xCT表达增加,Bax表达逐渐增加和Bcl-2表达逐渐降低(F=6.903、17.76、52.930、14.460,P<0.05);与100μmol/L染毒组比较,XAV-939处理组Beas-2B细胞中Wnt3a、β-catenin、GPX4和xCT表达均降低(t=8.055、8.049、9.659、11.700,P<0.05)。结论 体外实验硫酸镍可诱导Beas-2B细胞凋亡的同时可能通过激活Wnt/β-catenin通路抑制细胞铁死亡。
- 杨士宽李丽娜张童高影张丹吴永会
- 关键词：硫酸镍WNT/Β-CATENIN通路凋亡
- 镍冶炼烟尘染毒致NIH／3T3细胞线粒体损伤及L-抗坏血酸的干预作用
- 2016年
- 目的研究镍冶炼烟尘对小鼠胚胎成纤维细胞（NIH／3T3）线粒体损伤的影响及L-抗坏血酸的保护作用。方法将NIH／3T3细胞分为染毒组和L-抗坏血酸干预组。染毒组加入镍冶炼烟尘配制浓度分别为0.00、25．00、50.00、100．00g/ml的混悬液，干预组在染毒前额外加入L-抗坏血酸（100mmol／L）。利用MTT法检测细胞生长抑制率，钙黄绿素-AM荧光探针检测细胞线粒体膜通道孔（MPTP）变化，JC-1荧光染色观察并检测细胞线粒体膜电位（MMP）变化，比色法定量检测细胞线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性变化。结果随着染毒浓度升高，染毒组和干预组细胞生长抑制率均明显增加。在25．00、50．00、100．00μg/ml浓度时干预组抑制率均低于染毒组，差异有统计学意义（P〈0．05）。在50．00、100．00μg/ml浓度时，染毒组MPTP荧光强度为564．940±14．015、436．613±31．275；干预组MPTP荧光强度为611．203±20．053、498．840±21．308，干预组的荧光强度均高于染毒组，差异有统计学意义（P〈0．05）；荧光显微镜下干预组绿色荧光强度低于染毒组，干预组红色荧光强度高于染毒组。在25．00、50．00、100．00±g／ml浓度时，染毒组MMP绿色与红色荧光比值分别为16．579±0．220、14．453±0．280、11．133±1.007；干预组MMP绿色与红色荧光比值分别为18．697±0．163、16．260±0．520、13．703±0．715，干预组绿色与红色荧光比值均高于染毒组，差异有统计学意义（P〈0．05）。在25．00、50．00、100．00μg／ml浓度时，干预组的复合物Ⅰ、Ⅳ活性均高于染毒组，在100μg／ml浓度时，复合物Ⅱ染毒组活性为0．754±0．013，干预组活性为0．827±0．032，干预组的复合物Ⅱ活性高于染毒组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论随着镍冶炼烟尘浓度升高，NIH/3T3细胞线粒体损伤程度上升，L-抗坏血酸对镍冶炼烟尘�
- 潘昱霖王玥付瑶王声远谭文乔陈嘉述吴永会
- 关键词：冶炼烟尘线粒体L-抗坏血酸
- 镍冶炼烟尘致哺乳动物细胞氧化损伤作用的研究
- 目的 研究镍冶炼烟尘对NIH/3T3细胞的毒性作用和氧化损伤作用.方法 使用采自我国某镍冶炼厂的镍冶炼烟尘,将NIH/3T3细胞暴露于浓度为0、6.25、12.50、25.00、50.00和100.00μg/ml的镍冶炼...
- 吴永会巴婧翀王玥王声远焦冬
- 关键词：镍细胞毒性
- 高尔基体磷蛋白3在镍精炼烟尘致人支气管上皮细胞炎性损伤中的作用
- 2023年
- 目的探讨高尔基体磷蛋白3(golgiosomal phosphoprotein 3,GOLPH3)调控JAK2/STAT3信号通路在镍精炼烟尘致人支气管上皮细胞(Beas-2B)炎性损伤中的作用。方法采用不同浓度镍精炼烟尘(0.00、12.50、25.00、50.00μg/ml)处理Beas-2B细胞24 h,使用CCK8法检测细胞存活率;采用蛋白免疫印迹(Western blot,WB)法检测GOLPH3及JAK2/STAT3信号通路蛋白JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3和炎性效应蛋白NLRP3、白细胞介素-18(IL-18)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。使用siRNA转染沉默GOLPH3,采用WB法检测GOLPH3、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、NLRP3、IL-18、TNF-α蛋白表达水平;使用JAK2/STAT3通路抑制剂AG490抑制该信号通路,采用WB法检测JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3及NLRP3、IL-18、TNF-α蛋白表达水平。结果随着镍精炼烟尘染毒浓度增加,Beas-2B细胞存活率显著降低(P<0.05);GOLPH3、p-JAK2、p-STAT3、NLRP3、IL-18、TNF-α蛋白表达水平呈逐渐升高趋势(P<0.05);与si-对照组相比,si-GOLPH3组Beas-2B细胞中GOLPH3、p-JAK2、p-STAT3和NLRP3、IL-18、TNF-α表达均降低(P<0.05);与二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)组相比较,AG490组Beas-2B细胞中p-JAK2、p-STAT3和NLRP3、IL-18、TNF-α表达均降低(P<0.05)。结论镍精炼烟尘可通过激活GOLPH3调控JAK2/STAT3信号通路,诱导Beas-2B细胞发生炎性损伤。
- 张丹高影句立言张童陈阳阳姚文学杨士宽李丽娜吴永会
- 关键词：JAK2/STAT3
- 镍精炼烟尘激活Wnt/β-catenin通路诱导人支气管上皮细胞Warburg效应的研究被引量：1
- 2022年
- 目的 探讨Wnt/β-catenin通路在镍精炼烟尘诱导人支气管上皮(Beas-2B)细胞产生Warburg效应过程中的作用。方法 采用不同浓度镍精炼烟尘(0、12.5、25.0、50.0μg/ml)处理Beas-2B细胞24 h,通过CCK-8法检测镍精炼烟尘的细胞毒性,使用乳酸试剂盒检测乳酸分泌量,使用免疫印迹法(Western blot)检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin和Warburg效应相关蛋白丙酮酸脱氢酶激酶1(pyruvate dehydrogenase kinase 1,PDK1)、单羧酸乳酸转运体1(monocarborxylat transporter 1,MCT1)和乳酸脱氢酶激酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)的表达水平。采用通路抑制剂XAV-939处理Beas-2B后以25.0μg/ml镍精炼烟尘染毒24 h,检测Warburg效应相关蛋白PDK1、MCT1和LDHA的表达水平。结果 与对照组相比,镍精炼烟尘染毒组Beas-2B细胞的相对存活率明显降低,乳酸生成量随着镍精炼烟尘暴露浓度增加而升高(P<0.05),β-catenin及Warburg效应相关蛋白PDK1、MCT1和LDHA的表达水平均见增高且呈剂量依赖关系;Wnt/β-catenin通路抑制剂XAV-939可以抑制Warburg效应相关蛋白的表达(P<0.05)。结论 镍精炼烟尘可能是通过激活Wnt/β-catenin信号通路诱导Beas-2B细胞产生Warburg效应,从而将正常的线粒体氧化磷酸化转变为有氧糖酵解的能量代谢方式,并可能诱导癌症的发生。
- 高影张童张丹陈阳阳姚文学杨世宽李丽娜吴永会
- 关键词：WNT/Β-CATENIN通路
- 镍精炼烟尘对NIH/3T3细胞凋亡及TNF-α、VEGF表达的影响
- 2019年
- 以镍精炼烟尘染毒,测定细胞的增殖率和凋亡率,检测细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达水平。与对照组比较,各染毒剂量组细胞生长增殖率明显降低,细胞凋亡率、TNF-α、VEGF蛋白表达水平明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。提示镍精炼烟尘可以引发细胞炎症反应,并诱导细胞凋亡。
- 李吉平夏冰秦汝男王玥吴永会
- 关键词：细胞凋亡
- 镍冶炼烟尘对大鼠肺细胞凋亡相关蛋白表达水平的影响被引量：2
- 2016年
- 目的探讨镍冶炼烟尘对大鼠肺组织细胞凋亡相关蛋白p-JNK、Bax、Caspase-9和Caspase-3表达水平的影响。方法健康Wistar雄性大鼠40只,随机分为5组:对照组及镍冶炼烟尘0.50、1.00、2.00、4.00 mg/kg组,第1天及第16天非暴露式气管内滴注受试尘,30 d处死。Hoechst33258法观察肺内细胞形态学改变;分光光度法测定肺组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的含量;免疫印迹(Western blot)法检测肺细胞p-JNK、Bax、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达水平。结果与对照组比较,各染毒组大鼠肺组织细胞凋亡率均增高,差异有统计学意义(P<0.05);4.00 mg/kg染毒组细胞出现胞核固缩碎裂等凋亡早期形态学特征;各染毒组大鼠肺组织中SOD、GSH-Px活力较对照组显著降低,MDA含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);染毒组大鼠肺组织Bax蛋白表达均高于对照组(P<0.05),肺组织p-JNK、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05)。结论镍冶炼烟尘引起大鼠肺组织氧化损伤,同时促进p-JNK、Bax、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达,最终产生凋亡。
- 杨越王玥安学军张琳谭文乔韩丹吴永会
- 关键词：镍冶炼烟尘氧化应激蛋白表达
- 苯胺生产企业职业危害因素分析被引量：1
- 2020年
- 采用职业卫生现场调查、职业病危害因素检测等方法对某苯胺生产企业进行职业病危害因素检测。结果显示,该企业可能存在的职业病危害因素有煤尘、矽尘、苯胺、一氧化氮、二氧化氮、硫化氢、氨、苯及噪声。除空压机巡检工接触噪声声级超过国家卫生标准,其他工种接触职业病危害因素均符合国家卫生标准。该企业采取的各种职业病危害防护措施总体有效,职业病危害因素可以预防和控制。
- 邹之雄于静杨颖陈丽丽金硕王玥
- 关键词：苯胺噪声职业病危害
- 金属研磨尘染毒大鼠支气管肺泡灌洗液的变化被引量：8
- 2002年
- 目的 观察金属研磨的混合粉尘对大鼠呼吸系统的损伤作用。方法 大鼠经支气管注入磨工粉尘染尘后饲养 2周 ,采用大鼠支气管肺灌洗技术 ,分析灌洗液中细胞含量、分类、存活率及乳酸脱氢酶 (LDH)、碱性磷酸酶 (ALP)活力的变化。结果 染尘大鼠肺泡灌洗液中细胞含量随磨工粉尘染尘剂量的加大而增大 ,且均高于SiO2 尘组。大鼠支气管肺泡灌洗液中性粒细胞比例 [SiO2 粉尘组为 (33 .83± 4 .54) % ,1 0、2 5、50mg/ml磨工粉尘组分别为 (2 6 .50± 3 .99) %、(36 .0 0± 3 .58) %和 (38.0 0±2 .1 0 ) % ]均较对照组 [(2 .83± 0 .75) % ]明显增加 ;巨噬细胞比例 [SiO2 粉尘组为 (62 .1 7± 4 .54) % ,1 0、2 5、50mg/ml磨工粉尘组分别为 (70 .83± 3 .66) %、(60 .83± 2 .1 4 ) %和 (58.1 7± 2 .48) % ]比对照组[(95 .67± 1 .2 1 ) % ]相应降低 ,差异均有显著性 (P <0 .0 1 )。对照组大鼠肺泡灌洗液细胞存活率达80 %以上 ,与磨工粉尘组、TiO2 组的差异有显著性 (P <0 .0 1 )。各染尘组大鼠肺灌洗上清液中LDH、ALP活力明显增加 ,与对照组的差异有显著性 (P <0 .0 1或P <0 .0 5) ,随磨工粉尘染尘剂量加大 ,LDH、ALP活力逐渐升高。结论 磨工粉尘对大鼠肺细胞有损害作用 。
- 吴永会张忠义王连明孙惠明E.J.Love
- 关键词：支气管粉尘肺纤维化支气管肺泡灌洗液职业卫生
