苏州大学生物医学研究院江苏省感染与免疫重点实验室
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
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- MDSCs诱导调节性T细胞改善CVB3诱导的病毒性心肌炎被引量：4
- 2012年
- 目的探讨骨髓来源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)在CVB3诱导的病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)中的保护作用。方法通过流式细胞术分选获得足量MDSCs,体外证实具有免疫抑制功能后行体内转输实验,观察疗效及免疫机制。结果与对照PBS组相比,MDSCs处理组体质量呈上升趋势,肌酸激酶(CK)活性明显降低(P<0.001),心脏局部炎症浸润及坏死病灶显著减少,7天生存率高达70%(P<0.01),而心肌病毒滴度无明显改变,却上调了CD4+FoxP3+调节性T细胞比例。结论 MDSCs可显著改善CVB3诱导的病毒性心肌炎,有望成为心肌炎防治的新型策略和手段。
- 苏楠岳艳胡静平董春升熊思东
- 关键词：MDSCS病毒性心肌炎CVB3TREG
- 新型结核DNA疫苗p846的构建及免疫保护实验研究
- 2015年
- 目的：评价新型结核DNA疫苗p846诱导细胞免疫应答和抵抗结核杆菌卡介苗（BCG）攻击的能力。方法：通过基因克隆技术构建结核三抗原Rv3615c、Mtb10.4和Rv2660c融合的真核表达质粒p846。选择6~8周龄BALB/c小鼠,随机分成4组：p846疫苗组、pc DNA3.1组、PBS组及BCG组,以肌肉注射的方式分别于0、2、4、6周进行免疫,BCG组在0周皮下免疫1次。末次免疫2周后,分别用Brd U、ELISPOT和FCM法检测细胞免疫效应,4周后用结核菌BCG滴鼻方式进行攻击,6周后取肺组织进行病理切片评估。结果：与PBS组和空载体pc DNA3.1组相比,p846疫苗可有效促进结核特异性淋巴细胞的增殖并显著增加脾脏IFN-γ＋T细胞的数量,且肺组织炎症反应较较轻,其保护效果与BCG相当。结论：新型结核DNA疫苗p846免疫小鼠能引起强烈的细胞免疫应答,有效抵抗结核杆菌BCG的感染。
- 苏楠孔红梅王佳佳黄建安熊思东
- 关键词：结核分枝杆菌DNA疫苗细胞免疫
- HMGB1促进外源DNA诱导细胞产生Ⅰ型干扰素被引量：2
- 2012年
- 目的探讨HMGB1在外源DNA-poly(dA-dT)刺激细胞Ⅰ型干扰素IFN-β中的作用。方法荧光素酶分析方法检测经poly(dA-dT)刺激后细胞IFN-β的表达差异,同时PCR法检测了胞内重要DNA结合蛋白—高迁移率族蛋白-1(HMGB1)的表达改变;构建携带HMGB1特异性shRNA的慢病毒载体,获得HMGB1稳定下调(HMGB1KD)细胞,经poly(dA-dT)刺激后检测IFN-β表达,分析HMGB1在外源DNA刺激IFN-β产生中的作用。结果 poly(dA-dT)刺激293T细胞后,IFN-β表达显著上调,同时,HMGB1的表达在不同细胞中也明显上升,当下调HMGB1后,poly(dA-dT)刺激IFN-β产生的能力大幅削弱,表达水平降至对照组的1/8(P<0.05)。结论 HMGB1在促进外源DNA诱导Ⅰ型干扰素产生中发挥了关键作用。
- 范兴娟岳艳董春升胡静平熊思东
- 关键词：HMGB1
- LC-MS法结合天然同位素校正和^(1)H NMR相对定量法2种方法测定氘代新药甲苯磺酸多纳非尼的氘代率
- 2023年
- 测定氘代抗肿瘤新药甲苯磺酸多纳非尼中氘同位素杂质(包括非氘代和不完全氘代杂质)的含量,并计算氘原子百分比,即氘代率。建立液相色谱-质谱(LC-MS)法通过选择离子扫描模式测定各氘同位素杂质及氘代药物峰面积,并根据ChemDraw软件给出的天然同位素分布对峰面积进行校正,消除^(13)C、^(37)Cl等天然同位素干扰,通过校正后的峰面积计算各氘同位素杂质的相对含量,继而计算药物氘代率;并采用非氘代杂质对照品对该方法下天然同位素分布、氘同位素杂质与氘代药物的摩尔相对响应因子、基质效应等进行验证。另采用^(1)H定量核磁共振波谱技术(^(1)H qNMR),以δ8.63的总芳香^(1)H峰和δ2.79的氘同位素杂质残留^(1)H峰为定量峰,采用氘代二甲基亚砜-重水(10∶1)混合溶剂,改变活泼氢对残留^(1)H的偶合裂分,使其以单峰的形式参与定量,提高方法灵敏度,并优化采集参数,测定^(1)H原子百分比,继而计算药物氘代率。结果表明,在建立的LC-MS方法下,天然同位素化合物相对丰度的实测值与理论值的相对偏差均小于15%;氘同位素杂质与氘代药物的摩尔响应因子基本一致;方法无基质效应。建立的^(1)H qNMR方法定量限低至0.1%。将建立的2种方法用于3批商业化样品的测定,测定结果基本一致。建立的LC-MS法结合天然同位素校正和^(1)H NMR相对定量法2种方法均准确、快速、灵敏,且无需准确称量,无需任何对照品,可用于甲苯磺酸多纳非尼氘代率的测定,也为其他氘代药物氘代率的测定提供了新思路。
- 黄逸文吴杨程侠菊许奇李艳梅钱叶飞
- 关键词：液相色谱-质谱法同位素分布
- HMGB1不同结构域对CVB3心肌炎疫苗免疫增强作用的比较研究被引量：3
- 2012年
- 目的本研究在已构建好的柯萨奇病毒B3型(CVB3)疫苗pVP1的基础上,分别引入编码HMGB1不同结构域的质粒DNA,通过检测共免疫诱导的免疫应答强度,比较其各结构域介导的免疫增强作用。方法首先构建了编码HMGB1的不同结构域的质粒pHMGB1-A、B、C-box,分别与pVP1疫苗混合后肌注免疫小鼠,于末次免疫后10 d检测其诱导的特异性抗体和细胞免疫应答。结果与pVP1单独免疫组相比,pHMGB1-B box共免疫组可显著提高特异性血清IgG水平,同时也显著增加了脾脏IFN-γ+T的细胞数量;C-box仅显示出促进T细胞免疫的效应且程度较B-box小,对抗体水平无明显增强作用;A-box对抗体水平和细胞免疫应答的促进作用都不明显。结论 HMGB1不同结构域对病毒性心肌炎DNA疫苗诱导的体液和细胞免疫应答具有不同程度的增强效应,其中B-box可综合增强CVB3特异性体液和细胞免疫应答,C-box仅有促进T细胞应答效应,而对抗体水平无促进作用,A-box对抗体水平增加和细胞免疫应答的促进作用不明显。该研究不仅有助于深入了解HMGB1不同结构域的免疫佐剂效果差异,更为科学合理应用HMGB1增强免疫应答提供了一定的基础数据。
- 王茂伟岳艳胡静平董春升熊思东
- 关键词：DNA疫苗免疫佐剂
