暨南大学基础医学院生理学系
- 作品数：8 被引量：18H指数：3
- 相关作者：邓志钦吕瑞玲更多>>
- 相关机构：青海民族大学药学院中山大学中山医学院生理学教研室中山大学中山医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 热量限制对能量代谢的影响及其机制被引量：4
- 2020年
- 热量限制(caloric restriction,CR)是在保证机体不产生营养不良的前提下限制机体的热量摄入。CR能够影响体内各种代谢产物水平,如脂类、游离脂肪酸、酮体、胆汁酸和氨基酸等,被认为可延长生物寿命,推迟和降低多种与老龄相关疾病(如2型糖尿病、肿瘤、心血管疾病)的发病。CR所产生的功效与其对机体能量代谢的调节效应密不可分,其作用机制与生物钟、激素、胃肠道菌群及炎症都密切相关。本文简要总结CR对能量代谢的影响及其作用机制。
- 樊晓娜陈琳茜许戈阳
- 关键词：热量限制能量代谢激素生物钟胃肠道菌群炎症
- 双氢青蒿素激活LNCaP细胞氯通道并抑制细胞增殖被引量：1
- 2020年
- 目的:探讨双氢青蒿素(DHA)通过氯离子通道抑制前列腺癌LNCaP细胞增殖的作用及其机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测DHA抑制LNCaP细胞增殖,并确定其半抑制浓度(IC 50值):分别配制的浓度梯度为0.625、1.250、2.500、5.000、10.000、20.000、40.000、80.000、160.000μmol/L DHA溶液,并按实验设计加入含有LNCaP细胞的96孔板中,在酶联免疫检测仪490 nm处测量各孔的吸光度(A)值;全细胞膜片钳:检测DHA激活LNCaP细胞氯电流以及氯通道抑制剂4,4’-二异硫氰酸基-2,2’-二苯乙烯磺酸二钠(DIDS)和5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸(NPPB)抑制LNCaP细胞氯离子电流。依次用0、±40 mV、±80 mV电脉冲刺激细胞,每个刺激间隔时间为200 ms,每个周期间隔为4 s。开始刺激后的10 ms收集和测量电流。通过将电流归一化到膜电容来确定电流密度。组间比较使用独立样本t检验。结果:DHA能够抑制LNCaP细胞增殖,其抑制效果具有时间依赖性,DHA抑制LNCaP细胞增殖的IC 50值随时间延长逐渐降低。在用DHA处理LNCaP细胞24、48、72 h后,其IC 50值分别为(51.34±1.49)、(24.98±2.07)、(22.79±1.38)μmol/L[n=3,t=17.901(24 h比48 h),t=24.349(24 h比72 h),P<0.01]。此外,DHA也能激活LNCaP细胞氯通道产生氯电流,在80 mV电压钳制下,LNCaP细胞的电流密度增加至(48.30±7.52)pA/pF,被激活的电流可被氯通道抑制剂抑制至(6.35±2.47)pA/pF(DIDS)和(9.25±2.09)pA/pF(NPPB)[n=3,t=9.180(DHA比DIDS),t=8.666(DHA比NPPB),P<0.01]。结论:DHA能够抑制前列腺癌LNCaP细胞增殖,其抑制效果具有时间依赖性;DHA也能够激活LNCaP细胞氯离子通道产生氯离子电流,且激活的氯电流能够被氯通道抑制剂所抑制。
- 雷炜陈业辉朱林燕侯秀颖堐益垚张进祥翟启良查泽玉袁红卓扬佳韩兆冬杨海峰
- 关键词：前列腺癌双氢青蒿素氯离子通道
- 氯通道在三氧化二砷诱导鼻咽癌细胞凋亡中的作用被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨氯通道在三氧化二砷(arsenic trioxide,As_2O_3)诱导人鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡中的作用。方法:采用流式细胞术检测CNE-2Z细胞经As_2O_3作用24及48 h的凋亡率;应用膜片钳技术记录As_2O_3激活的细胞膜电流,并分析其电流特性;采用流式细胞术检测氯通道阻断剂DIDS对As_2O_3诱导的CNE-2Z细胞凋亡的抑制作用。结果:(1)5μmol/L As_2O_3能够时间依赖性地诱导的CNE-2Z细胞凋亡;(2)CNE-2Z细胞外灌流含5μmol/L As_2O_3的等渗溶液能够激活一个具有外向整流特征的电流,激活的电流无明显的时间及电压依赖性失活,翻转电位接近氯平衡电位;(3)As_2O_3激活的电流能够被氯通道阻断剂DIDS和NPPB完全抑制,细胞外灌流47%的高渗溶液能够完全抑制As_2O_3激活的电流;(4)氯通道阻断剂DIDS能够抑制As_2O_3诱导的CNE-2Z细胞凋亡。结论:As_2O_3可以激活CNE-2Z细胞的容积敏感性氯通道。氯通道在As_2O_3诱导的CNE-2Z凋亡中发挥重要作用。
- 吕瑞玲高宏邓志钦王海波梁协稠谭秋蝉朱林燕王立伟陈丽新
- 关键词：氯通道三氧化二砷鼻咽癌细胞凋亡
- 大鼠DRG内ClC-3敲减导致的TNF-α/IL-10失衡对电压门控性钠通道表达和机械痛敏的影响被引量：4
- 2020年
- 目的:研究敲减大鼠背根神经节(DRG)内ClC-3氯通道/反向转运体对神经元电压门控性钠通道表达和大鼠机械痛敏的影响及机制。方法:成年SD大鼠鞘内注射ClC-3 shRNA腺相关病毒(AAV-ClC-3 shRNA)以敲减DRG内ClC-3的表达,RT-qPCR、免疫荧光染色和Western blot从mRNA和蛋白水平检测ClC-3、细胞因子和电压门控性钠通道表达的变化,用up-down方法检测机械痛敏。结果:鞘内注射AAV-ClC-3 shRNA后DRG组织ClC-3的表达下调,大鼠出现机械触诱发痛。敲减DRG组织ClC-3的表达可致电压门控性钠通道Nav1.3、Nav1.7、Nav1.8和Nav1.9的表达增加。敲减DRG组织ClC-3的表达可提高肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,降低白细胞介素10(IL-10)水平。结论:大鼠DRG内ClC-3下调导致TNF-α/IL-10失衡,进而增加电压门控性钠通道Nav1.3、Nav1.7、Nav1.8和Nav1.9表达,增强神经组织兴奋性,最终导致机械痛敏。
- 汪小芳何苏月马卓琳杨杰庞瑞萍
- 关键词：背根神经节白细胞介素10电压门控性钠通道机械痛敏
- 5-脂氧合酶在大鼠外科脑损伤模型脑组织中的表达及作用被引量：2
- 2017年
- 目的研究大鼠外科脑损伤(SBI)模型脑组织中5-脂氧合酶(5-LOX)表达的空间分布、细胞定位和随时间变化的规律,并探讨其在SBI发病中的可能作用机制。方法将72只健康成年雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组及SBI术后1d(SBI-1d)组、3d(SBI-3d)组、7d(SBI-7d)组,每组18只。对SBI-1d、SBI-3d和SBI-7d组大鼠采用右侧额叶切除法建立SBI模型,Sham组大鼠只移除相应部位的颅骨,不伤及硬脑膜。采用干湿质量法测量损伤同侧、对侧脑组织的含水量;Garcia评分和杠杆平衡评分评估各组大鼠的神经行为学功能;免疫荧光化学染色确定5-LOX的空间分布及细胞定位;蛋白质印迹法检测5-LOX和核转录因子(NF)-κB的蛋白表达;生物化学法测定损伤区周围脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果 (1)与Sham组相比,SBI-1d和SBI-3d组大鼠损伤侧脑组织含水量增加(P<0.05);SBI-1d、SBI-3d和SBI-7d组大鼠出现神经功能障碍(P<0.01),SBI-7d组大鼠的Garcia评分较SBI-1d、SBI-3d组改善(P<0.05)。(2)5-LOX主要分布在损伤区周围的脑组织中,其中以神经元表达为主,星形胶质细胞和小胶质细胞也有表达。(3)与Sham组相比,SBI-1d和SBI-3d组大鼠损伤区周围脑组织中5-LOX、NF-κB表达增加(P<0.05),而SBI-7d组两者表达低于SBI-1d和SBI-3d组(P<0.05),其中5-LOX表达增加在SBI术后第1天最明显。(4)与Sham组相比,SBI-1d、SBI-3d和SBI-7d组大鼠损伤区周围脑组织中SOD活性降低(P<0.05),SBI-1d和SBI-3d组MDA含量增加(P<0.05)。结论 SBI后,5-LOX主要表达于损伤区周围神经元,星形胶质细胞和小胶质细胞也有表达;且在SBI术后1d表达最多。5-LOX加重脑损伤可能与NF-κB表达增多以及氧化应激增加有关。
- 黄茂葵汪根树王跃春
- 关键词：5-脂氧合酶脂质过氧化作用
- 原子力显微镜观察细胞膜水通道AQP-3分布
- 2022年
- 目的构建水通道3(AQP-3)/血凝素(HA)融合标签载体,使用原子力显微镜(AFM)观察AQP-3在细胞膜的分布。方法采用重叠聚合酶链反应(PCR)法将AQP-3/HA标签基因克隆到AQP-3的DNA序列中,构建真核表达载体,挑取单克隆菌落PCR初步鉴定后进行测序鉴定;质粒转染细胞后,采用免疫荧光标记HA标签蛋白,激光共聚焦显微镜下观察荧光标记并拍照;胶体金标记转染成功的细胞上HA标签,AFM观察胶体金颗粒从而分析AQP-3蛋白分布。结果将HA标签蛋白插入AQP-3第二个胞外段,即T149-Y150之间,成功构建了融合表达载体pIRES2-AQP3/HA-EGF;共聚焦显微镜观察到转染成功的细胞发绿色荧光,AQP-3/HA融合蛋白呈蓝色荧光,其主要分布于细胞膜;AFM观察到细胞表面凹凸不平并伸出片状伪足和丝状伪足,AQP-3/HA在细胞膜表面分布有差异性,其在突起部位分布较多。结论将HA标签插入AQP-3第二个胞外段,可减小对其功能影响,联合胶体金和AFM识别HA标签蛋白,能够实现AQP-3在细胞膜的示踪标记。
- 樊珍樊珍王丽芳陈丽新张海峰
- 关键词：原子力显微镜水通道胶体金
- ClC-3氯通道过表达对小鼠甲状腺结构及功能的影响被引量：1
- 2018年
- 目的:研究过表达Cl C-3基因对小鼠甲状腺结构及功能的影响。方法:以3月龄FVB小鼠为实验对象,研究野生型(WT)小鼠和Cl C-3转基因小鼠甲状腺结构及功能的差异。用q PCR、Westren blot和免疫荧光技术观察小鼠甲状腺Cl C-3的表达与分布;对小鼠日常活动进行行为学监测;ELISA检测小鼠血清总三碘甲状腺原氨酸(TT3)、总甲状腺素(TT4)和促甲状腺激素(TSH)的浓度。结果:与WT组小鼠相比:Cl C-3转基因组小鼠甲状腺Cl C-3表达明显增多(P<0.05);甲状腺表现为明显的增生,滤泡明显增大;体重减轻但摄食量增加(P<0.05),毛发无光泽,行为活跃,易激惹;TT3、TT4明显增高(P<0.05),但TSH变化不明显。结论:Cl C-3过表达可导致甲状腺组织增生,甲状腺激素分泌增多。本研究提示Cl C-3很可能参与了甲状腺激素的合成。
- 谭秋婵陈湛如俞美声梁协稠赵婵高宏郑衍芳伍嘉宝朱林燕王立伟陈丽新
- 关键词：CLC-3甲状腺转基因小鼠
- 印楝种子中柠檬苦素类成分及其抗菌活性研究被引量：5
- 2019年
- 采用硅胶柱色谱、Pharmadex LH-20凝胶柱色谱、ODS柱色谱以及HPLC色谱对印楝干燥种子95%乙醇提取物中的柠檬苦素类化合物进行分离纯化,并运用波谱方法对所分离的化合物进行结构鉴定,得到15个该类化合物:nimbocinol(1),17β-hydroxynimbocinol(2),1α,3α,7α-triacetylvilasinin(3),7α-benzoyltrichilinin(4),1,3-diacetyl-7-tigloyL^-12-hydroxyvilasinin(5),3-deacetylsalannin(6),1-O-acetyL^-1-detigloylsalannin (7),2’(R),3’-dihydrosalannin (8),2’(S),3’-dihydrosalannin (9),2,3-dihydronimbolide (10),6-homodesacetylnimbin (11),gedunin (12),7-deacetyl-7-epi-dihydrogedunin (13),7-deacetoxy-7α-hydroxygedunin(14)和nimbinene(15)。化合物7为新天然产物,化合物4,8,9,13和14为首次从印楝属中分离得到。在体外抗菌活性筛选中,化合物2对大肠杆菌和表皮葡萄球菌具有一定抑制活性,MIC分别为32,128 mg·L^-1。化合物10对表皮葡萄球菌有中等抑制活性,MIC为64 mg·L^-1。化合物11对大肠杆菌和绿脓杆菌有一定抗菌活性,MIC为128 mg·L^-1。化合物15对绿脓杆菌有一定抑菌活性,MIC为128 mg·L^-1。
- 卢小锋林鹏程訾佳辰樊晓娜
- 关键词：印楝柠檬苦素抗菌活性
