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不同固定方法对初级纤毛蛋白免疫荧光的影响: 2023年; 目的:比较不同固定方法对动物细胞初级纤毛组分免疫荧光染色的影响,探究初级纤毛免疫荧光成像的优化策略。方法:选择4%多聚甲醛(paraformaldehyde,PFA)、甲醇(MeOH)、10%三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)固定细胞,后续使用相同的透化、封闭、抗体孵育条件,最后比较相同拍摄参数下初级纤毛的成像效果。结果:PFA固定法可使纤毛轴丝蛋白和部分纤毛膜蛋白有更好的染色效果,MeOH固定法可以更清晰地展现纤毛底部定位的蛋白。相比前两种方法,TCA固定的细胞虽然纤毛轴丝的染色效果很差,但适用于部分纤毛膜蛋白和轴丝结合蛋白。除荧光强弱不同外,使用不同方法固定后染色得到的蛋白定位也有微小差异。结论:3种固定方法在初级纤毛免疫荧光实验中各有优劣,需要综合考虑实验目的以及目标蛋白的特点进行选择。; 李田元王悦艾紫荷刘晨俞婷婷程雁乐珅

“双一流”背景下医学遗传学课程建设探索: 2023年; 课程是人才培养的核心要素,课程质量直接决定人才培养的质量。医学遗传学是一门实践性较强的学科,是临床医学专业本科生的专业基础课。文章在南京医科大学“双一流”建设背景下,剖析了南京医科大学医学遗传学教学中存在的问题,并从师资队伍建设、课程体系、课程内容方法以及考核评价体系等方面对医学遗传学课程建设提出了改革思路和具体措施。; 李凌云马长艳乐珅姚俊金玉翠; 关键词：医学遗传学教学模式课程建设教学改革

反义人DNMT1基因对乳腺癌细胞MDA-MB-435s增殖和细胞周期的影响: 2010年; 目的构建表达人DNMT1基因(DNA methyltransferase 1,DNMT1)反义RNA的真核表达质粒,观察其对乳腺癌细胞MDA-MB-435s增殖的影响。方法应用DNA重组技术,将人DNMT1基因的cDNA片段克隆至pcDNA3.1(-)载体中,构建DNMT1反义RNA真核表达质粒,测序验证,将其转染入人乳腺癌细胞系中,利用荧光定量PCR法检测转染前后细胞DN-MT1基因mRNA表达水平的变化;Western blot检测转染后DNMT1蛋白表达变化;应用MTT法检测细胞生长状况,绘制细胞生长曲线;流式细胞术分析细胞周期的变化。结果成功构建出能够表达DNMT1反义RNA的真核表达质粒。转染该质粒后,与未转染组和转染正义质粒组相比,MDA-MB-435s细胞中DNMT1基因mRNA和DNMT1蛋白表达量均显著下降;细胞生长变慢;细胞周期分析可见S期明显减少,而G1/G0期细胞显著增加。结论反义DNMT1能够特异性下调该基因的表达,并抑制乳腺癌细胞的增殖,为乳腺癌基因治疗提供了新的靶标。; 孙荣斌鲁雅洁魏钦俊; 关键词：DNMT1基因反义RNA MDA-MB-435S

CRISPR基因编辑的脱靶效应应对策略综述被引量：5: 2020年; CRISPR/Cas9基因编辑系统是第三代基因编辑技术,在生物医学领域有着广泛的应用。该系统由sgRNA和Cas9蛋白组成,sgRNA与Cas9结合并引导Cas9到达DNA靶点,Cas9作为核酸内切酶对靶序列进行切割,形成DNA双链断裂(double strand break, DSB)。DSB通过两种机制——非同源末端连接(nonhomologous end joining, NHEJ)和同源重组介导的修复(homology-directed repair, HDR)——进行修复,实现特定基因的敲除或插入。与锌指核酸酶(ZFNs)和转录激活因子样效应物核酸酶(TALENs)等基因编辑工具相比,CRISPR/Cas9在简便性、专一性等方面有很大优势,但脱靶效应一直是它在实际应用中面临的一个难题。目前已有许多针对脱靶效应的研究,科学家们已发现一些影响靶点专一性的因素,如sgRNA种子序列、PAM序列、Cas9蛋白、DSB修复通路等,并据此研发出降低脱靶效应的可行性策略。本综述就CRISPR/Cas9系统的作用原理、潜在的脱靶危害和降低脱靶效应的策略研究进行阐述。; 许元金玉翠乐珅; 关键词：CRISPR CAS

生物医学前沿进展在高等医学教育中的作用与实施策略被引量：7: 2020年; 近年来生物医学研究发展迅速,生命组学、系统生物学、元基因组学、组织工程与干细胞技术、动物克隆技术等前沿领域的研究成果越来越多地应用于临床实践,使得人类疾病的诊断、治疗和预防方法和方式发生革命性的变化。这种发展必将对高等医学教育产生深刻影响,主要体现在医学人才培养目标的制定、医学课程体系与教学内容的更新、师资提升和教育资源配置等方面。生物医学的快速发展将促使医学教育的课程体系更加开放,基础医学教学内容更前沿,临床医学教学纳入更多新技术、人工智能和信息化等学科内容,同对教师素质和教学资源提出更高要求。; 魏钦俊姚俊鲁雅洁曹新; 关键词：生物医学教学改革课程设置

长链非编码RNA AC008通过miR-328-3p–AQP1/ANKH轴促进骨关节炎的发生: 骨关节炎（Osteoarthritis, OA）是一种慢性关节疾病,目前很难治愈。长链非编码RNA（lncRNA）参与多种疾病的发生发展过程,包括骨关节炎。AC008是我们通过基因芯片技术筛选到的在骨关节炎患者软骨组织中...; 杨家书马长艳; 关键词：骨关节炎 AQP1 软骨细胞; 文献传递

Gprasp2基因缺陷耳聋小鼠模型的构建及表型鉴定: X连锁遗传性耳聋家系极为罕见,相比于其他孟德尔遗传方式,其相关的耳聋致病基因报道也数目极少。G蛋白偶联受体相关分选蛋白2（G protein-coupled receptor associated sorting pro...; 鲁雅洁魏钦俊姚俊陈智斌邢光前曹新; 关键词：X连锁遗传耳蜗动物模型; 文献传递

本科生医学遗传学的遗传咨询教学改革思考被引量：5: 2019年; 随着人类基因组计划的完成和精准医学时代的到来,我们迫切需要遗传咨询服务。医学遗传学是遗传咨询的基础,应顺应当今的遗传服务需求,进行相应的改革。本文就本科医学遗传学教学的师资队伍培养、临床遗传咨询理论学习和模拟咨询的改革进行探讨。; 乐珅刘晨俞婷婷; 关键词：医学遗传学教学改革

成骨细胞特异的转录因子Osterix通过上调MMP-9的表达而促进乳腺癌侵袭转移: 近年来,乳腺癌的发病率在全球范围内逐年上升,在我国部分大中城市已占女性恶性肿瘤的第一位。尽管治疗手段不断提高,但仍有70%以上的乳腺癌晚期病人会发生骨转移。骨转移常导致病理性骨折、剧烈而持续的骨痛、脊髓压迫、贫血以及高血...; 姚兵徐月新渠爽于晓静马长艳; 文献传递

miR-664-3p通过抑制Smad4和Osterix的表达而促进骨质疏松发生: 骨质疏松症是以骨量减少和骨的微观结构退化为特征,导致骨的脆性增加以致易于发生骨折的一种全身性代谢性骨病。目前全世界约有2亿多骨质疏松症患者,我国50岁以上的骨质疏松人数约6940万;预计到2020年,我国骨质疏松人数将达...; 徐月新姚兵于晓静渠爽马长艳; 文献传递

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南京医科大学基础医学院医学遗传学系