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本科生化综合性实验与设计性试验开设的初探: 由于生物化学是一门实验性很强的学科,因此生化实验课在生化教学中占据突出地位.随着生命科学迅猛发展,新理论、新技术不断问世,并且现代社会对医务工作者的专业与技能要求的提高,兼之教学设备的改善,生化实验课教学改革已成当务之急...; 赵涵芳张惠民于丽莉王克敏沈文红; 文献传递

绿色荧光蛋白GFP在转化细胞和肿瘤细胞中的表达被引量：10: 2000年; 目的在肿瘤基因治疗研究中建立一个用绿色荧光蛋白 (greenfluorescentprotein ,GFP)为标记基因的合适条件。　方法用带有GFP突变体的质粒转染到表达细胞 ,观察GFP瞬时表达的情况 :1 直接测定GFP在COS- 7细胞中的表达并观察表达的稳定性 ;2 比较不同启动子驱动的 pcDNA3 - EGFP和 pSVK3 -S6 5T两种质粒在不同肿瘤细胞中的转染效率 ;3 用LacZ基因与GFP基因共转染 48h后 ,通过FACS分选测定两种基因在同一细胞中的表达情况。　结果在不同条件下的活细胞中有GFP基因表达 ,且表达具有稳定性 ,表达持续约 2周左右 ;CMV启动子和SV4 0 启动子调控的GFP对不同肿瘤细胞株的转染效率有差异。当两种基因共转染后用FACS分选 ,选出GFP细胞带有LacZ基因细胞在 1∶4时可达 85 %以上。　结论通过GFP表达可连续而直接地观察活细胞中的基因表达 ,利用GFP可快速地挑选带有靶基因的细胞。; 于丽莉陈诗书; 关键词：标记基因肿瘤基因治疗绿色荧光蛋白

人胃癌组织RNA的抽提及其c-H-ras原癌基因的表达被引量：1: 1990年; 用自制平板式不锈钢组织粉碎器。直接从手术切除的新鲜人原发性胃癌组织中用异硫氰酸胍-氯化铯超离心法抽提组织总RNA,再用Oligo(dT)纤维素柱分离得到mRNA,以经典的Northern印迹及分子杂交、放射自显影法观察到人原发性胃癌组织中c-H-ras原癌基因的表达强于或等于自身对照的相应正常胃粘膜组织。; 章有章钱关祥钱晓岚王璐于丽莉陈诗书王瑞年; 关键词：胃癌 RNA 原癌基因

细胞内RNA的原位杂交: 1989年; 本文介绍用原位杂交方法测定细胞内的RNA。该方法特异性较高,能保持细胞曲完整性。我们测定了不同细胞的rRNA基因的转录和原癌基因c-myc,c-H-rgs的转录,取得了较满意的结果。RNase处理细胞或质粒pBR322作探针,细胞中显影颗粒很少。本文对原位杂交方法学进行了初步的讨论。; 王敦瑞陈季汪肖钢于丽莉陈诗书; 关键词：RNA; 全文增补中

人SATB1基因5′上游序列的转录激活功能分析被引量：2: 2005年; 在对人SATB1基因进行生物信息学分析的基础上 ,采用PCR技术 ,扩增人基因组DNA中SATB1基因 5′上游序列的 - 2 95 5～ - 9片段 ,构建了 3个分别由SATB1基因 5′上游 - 2 95 5～ - 9,- 172 7～ - 9和 - 76 0～ - 9序列片段驱动的报告载体 -pGL3 SP2 94 6 luc ,pGL3 SP1718 luc和pGL3 SP75 1 luc ,分别瞬时转染JurkatT ,K5 6 2 ,U937和HeLa细胞 ,通过测定荧光素酶的表达活性 ,观察SATB1基因 5′上游序列片段 3个删除突变体在不同细胞内活性的差异 .结果显示 ,SATB1上游序列- 2 95 5 - 9在 4种细胞中的转录激活能力为U937>JurkatT >K5 6 2 ,在HeLa细胞中基本无激活 ,提示SATB1的转录激活可能具有一定的细胞类型特异性 .3种 5′删除突变体转录激活性由大至小顺序为 - 76 0 - 9>- 2 95 5 - 9>- 172 7 - 9,提示SATB1的核心启动子可能存在于其 5′上游序列的- 76 0至 - 9bp区域中 .; 李颖戴冰冰蔡蓉仇全于丽莉卢健; 关键词：启动子转录调控

基因修饰人肝癌和胃癌“瘤苗”及实验性肿瘤联合基因治疗被引量：1: 2004年; 恶性肿瘤基因治疗的临床研究已有10余年,但疗效尚未确定.治疗策略也不下十余种,但何种策略为佳尚无定论.目前采用的策略多数为单一基因治疗,而肿瘤的发生可能涉及多种基因及多种因素,发病过程也是多步骤的.本研究建立一种细胞因子基因工程人肝癌和胃癌细胞"瘤苗",用于经手术切除的肝癌或胃癌患者,消灭微小残存癌细胞,并预防复发转移;或用于无手术指征的患者或手术后复发患者的辅助性治疗措施.探索多种基因及因素的配合进行实验性肿瘤的联合基因治疗研究.首先克隆一系列的治疗基因,构建不同载体及调控元件;然后进行不同基因的联合治疗作用,并与放射治疗相结合;最后还筛选新的肿瘤治疗候选基因,旨在为临床提供更有效的肿瘤基因治疗策略和方案.; 陈诗书钱关祥夏爱娣张腾飞钱书兵魏道严徐荣婷胡亮王克敏程枫于丽莉杨红英许伟榕唐展云朱敏; 关键词：瘤苗人肝癌实验性肿瘤联合基因基因修饰

探索加强学生生化实验中独立思考与动手能力的培养被引量：8: 2002年; 改革实验教学方法,让学生根据实验的要求,通过自学实验原理和实验方法,独立完成实验,以实验报告形式对自己实验进行分析和讨论,最后由实验老师对实验结果进行分析和总结.希望通过这种方法,培养学生自学能力、独立思考和操作能力.; 于丽莉徐悦沈文红张怡平赵涵芳; 关键词：实验教学独立思考能力生物化学实验课医学教育

人转化生长因子基因重组克隆及高效表达被引量：1: 2000年; 目的　克隆人转化生长因子（ＴＧＦβ１）基因并且在大肠杆菌中表达。方法　从人的血小板中抽提总ＲＮＡ，经逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）得到全长ＴＧＦβ１ｃＤＮＡ，将其克隆于表达质粒ｐＢＬＭＶＬ２中，构建了在ＰＬ启动子控制的含有ＴＧＦβ１ｃＤＮＡ重组子，转化到大肠杆菌ＲＲ１菌株中，进行温敏诱导表达。结果　表达产物经ＳＤＳＰＡＧＥ电泳染色后，显示其相对分子质量为１２．５ ×１０３，计算机灰度扫描分析，表达产物约占全菌蛋白的２０％左右，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析证实，表达产物为ＴＧＦβ１，细胞实验显示其具有一定的生物活性。结论　在大肠杆菌中表达出具有活性的人ＴＧＦβ１。这为我们下一步研究其功能和临床应用打下了基础。; 于丽莉赵涵芳刘军章有章; 关键词：TGFΒ1 基因工程基因表达克隆烧伤

单纯性生长激素缺乏症的一个家系调查: 1994年; 单纯性生长激素缺乏症的一个家系调查王亚新，何友爱，张来仪，于丽莉，陈诗书人生长激素（ｈｕｍａｎｇｒｏｗｔｈｈｏｒｍｏｎｅ，ｈＧＨ）缺乏可有多种原因引起。ｈＧＨ基因缺失是其中之一，命名为单纯性生长激素缺乏症Ｉ－Ａ型（ＩＧＨＤ－ＩＡ）。我们在１９８８年用...; 王亚新何友爱张来仪于丽莉陈诗书; 关键词：遗传病单纯性生长激素缺乏症家系

家族性单纯生长激素缺乏症的分子生物学研究: 1996年; 家族性单纯生长激素缺乏症的分子生物学研究于丽莉，王亚新（上海第二医科大学生化教研室，上海２０００２５）关键词生长激素缺乏症，发病机理人的生长、发育和代谢与垂体分泌的一种１９１个氨基酸组成的激素──人生长激素（ｈＧＨ）有关，它的异常会导致人身体生长发育...; 于丽莉王亚新; 关键词：生长激素缺乏症病理学分子生物学

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于丽莉