王亚新
- 作品数:19 被引量:94H指数:5
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- 中国胰岛素依赖性糖尿病病人(HLA-DR9)的HLA-DQB1基因顺序分析
- 1995年
- 用血清学方法研究显示中国人胰岛素依赖性糖尿病(IDDM)与HLA-DR9相关。鉴于白种人中的研究显示IDDM与HLA-DQβ链第57位氨基酸相关,Asp-57对IDDM呈抗性,non-Asp与IDDM易感性相关。我们用PCR技术扩增了中国人中血清学DR9纯合的IDDM患者和正常对照的HLA-DQB1基因第二外显子并测定了核苷酸顺序,结果未发现IDDM特异HLA-DQB1等位基因,但发现IDDM病人HLA-DQB157位均为天冬氨酸。表明中国IDDM患者中的HLA-DQB157位天冬氨酸不一定具有保护个体抵抗IDDM的足够能力。IDDM易感性可能涉及多个基因位点的变化,另外还可能与其它遗传因素及环境因素有关。
- 孙婕王亚新盛青孟诚卫于丽莉张来仪陈诗书
- 关键词:糖尿病HLA-DQ基因
- 中国人群MHC—Ⅱ类抗原DR4基因体外扩增定型分析及其与类风湿关节炎相关性的研究被引量:7
- 1992年
- 本工作拟建立一种 HLA 基因组 DNA 定型方法,采用聚合酶链反应技术对所要分析的 HLA—Ⅱ DR4基因进行体外扩增,并配合等位基因特异性寡核苷酸探针对扩增产物进行分析,以确定个体是否带有该型等位基因.我们用该方法对上海地区52例正常人及32例类风湿关节炎病人 DR4基因进行了分析,结果显示正常人 DR4基因携带者为17.3%,而类风湿关节炎病人高达43.8%(RR=3.7,P<0.01),DR4阳性的病人多为重症活动者(X^2=11.7,P<0.005).此外,我们将该方法与血清学定型方法进行了比较.
- 朱乃硕林性玉王亚新张来仪陈顺乐王元顾懿陈诗书
- 关键词:MHC聚合酶链反应类风湿关节炎
- 中国正常人及类风湿关节炎病人MHC-Ⅱ类DR_4亚型基因核苷酸序列初步分析被引量:2
- 1994年
- 对中国人群正常人及类风湿关节炎病人DR_4亚型基因决定型别特异性的第二个外显子进行体外扩增、克隆及序列分析显示,6例正常人及3例类风湿关节炎病人存在三种DR_4亚型(DRBl0402,DRBl0405,DRBl.0406),中国人这三种亚型第二个外显子核苷酸序列与白种人一致。序列分析结果为进一步应用常规PCR-SSO法及PCR-RFLP法进行中国人DR_4基因定型提供了依据。此外,还将序列分析结果与PCR-SSO杂交分析结果进行了比较,具备较全面的覆盖各亚型多态性区域的探针可以减少等位基因同源性干扰。
- 朱乃硕王亚新陈诗书
- 关键词:DR基因类风湿性关节炎
- 中国人群HLA-DR_4等位基因结构及其与类风湿关节炎相关性研究被引量:36
- 1994年
- 对130名正常人及95例类风湿关节炎(RA)病人HLA-DR4基因分析结果显示,该基因与RA易感性显著相关(P<0.005),中国人群中至少存在8种DR4亚型,其中Dw15(DRB10405)频率最高,占DR4阳性正常人的48%,也是与RA易感性相关的主要亚型(RR=3.1,P<0.005)。对DR4基因第二个外显子第三高变区分析结果显示,与RA易感性呈正相关的5种亚型均具有共同的R/KRAA序列特征,占病人DR4阳性群体的92%,而正常人为56%(X2=10.29,P<0.005)。而3种与RA易感性呈负相关的DR4亚型均不具有上述序列特征。
- 朱乃硕王亚新王福庆陈诗书
- 关键词:等位基因类风湿性关节炎
- 单纯性生长激素缺乏症的一个家系调查
- 1994年
- 单纯性生长激素缺乏症的一个家系调查王亚新,何友爱,张来仪,于丽莉,陈诗书人生长激素(humangrowthhormone,hGH)缺乏可有多种原因引起。hGH基因缺失是其中之一,命名为单纯性生长激素缺乏症I-A型(IGHD-IA)。我们在1988年用...
- 王亚新何友爱张来仪于丽莉陈诗书
- 关键词:遗传病单纯性生长激素缺乏症家系
- 家族性单纯生长激素缺乏症的分子生物学研究
- 1996年
- 家族性单纯生长激素缺乏症的分子生物学研究于丽莉,王亚新(上海第二医科大学生化教研室,上海200025)关键词生长激素缺乏症,发病机理人的生长、发育和代谢与垂体分泌的一种191个氨基酸组成的激素──人生长激素(hGH)有关,它的异常会导致人身体生长发育...
- 于丽莉王亚新
- 关键词:生长激素缺乏症病理学分子生物学
- 引起Huntington舞蹈病的新基因
- 1993年
- Huntington舞蹈病(HD)是一种典型的常染色体显性遗传性疾病。该病特征是进行性中枢神经系统退行性病变。一般在40岁左右发病,以后10~20年进行性加重。临床表现为慢性进行性舞蹈动作及智力障碍。由于患者往往在过了生育年龄才发病。
- 王亚新
- 关键词:舞蹈病基因动态突变
- 人血小板cDNA文库的建立被引量:4
- 1996年
- 为建立人血小板cDNA文库,作者用人新鲜血小板悬液纯化血小板,加入变性液作匀浆,经苯酚、氯仿、异丙醇等抽提RNA,以所得RNA为模板合成cDNA,并将其连接λgt11臂,用噬菌体包装蛋白“包装”,再进行连续稀释,然后将不同稀释度的噬菌体转染宿主菌Y1090。结果:从纯化血小板2.8×1012中获得约1.5mgRNA,其A(吸光度,曾称光密度OD)260nm/A280nm为1.721,RNA变性电泳可见18s和28s条带,且无RNA降解。由该RNA合成的第一条cDNA链产量为1.82μg,第二条cDNA链产量为3.79μg,放射自显影显示双链cDNA分子大小范围在0.5~5.0kb,大部分位于1.0~4.0kb之间。基因库效价为:总效价1.52×108,重组子效价1.38×108,重组百分比83.1%;克隆效率6.90×108。
- 王华梁龚兰生孔宪涛蔡伟箐于金德戚文航吴春芳王海英赵函芳陈诗书程枫王亚新卢健
- 关键词:血小板CDNA基因库
- 一种通用高效的聚合酶链反应产物克隆方法被引量:3
- 1993年
- 聚合酶链反应(PCR)自问世以来已在生物学界、医学界等领域中得到广泛的应用.其中一个重要方面是将其产物克隆,然后测定核苷酸序列.常用的 PCR产物克隆法是将 PCR 产物以粘性末端或平头连接于 M13噬菌体或 pUC 质粒中,然后转染大肠杆菌.粘性末端连接克隆法效率高,但需在 PCR 产物两端有特定的限制性内切酶切点.且在酶切时易受到多种因素影响而不能得到理想的产物,平头连接克隆法无须酶切,可适用于任何 PCR 产物,但缺点是效率低,笔者在国外工作期间,将平头连接法进行了改进,得到了令人满意的高效率克隆.
- 王亚新陆佩华周光炎
- 关键词:聚合酶链反应分子克隆
- 多等位基因PCR-SSO反相杂交法及其在HLA-DR_4亚型结构分析中的应用
- 1993年
- 本文介绍一种适合于多等位基因定型和结构分析的反相顺序特异性寡核苷酸探针杂交方法。将化学合成的多种探针分别经脱氧核苷末端转移酶(TdT)催化,于3′端加上100个以上碱基的Poly(dT)尾,然后将各探针分别以斑点固定于同一张尼龙膜上。用PCR法对该基因位点进行扩增,扩增的同时加入α-^(32)P-dCTP以直接参入放射标记,然后将PCR产物与膜固定探针杂交,以四甲基氯化铵根据探针长度统一洗涤温度。该方法克服了以往对同一份样品进行多个等位基因检测时需要进行多次探针标记和杂交的缺点。我们用该方法对中国人群MHC-Ⅱ类DR4多等位基因进行了研究。
- 失迺硕王亚新陈诗书