亢健
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：江苏省人民医院更多>>
- 发文基金：江苏省卫生厅社会发展基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- B7-1基因转染抑制胃癌生长和转移的实验研究
- 2009年
- 目的:研究B7-1基因转染胃癌细胞对人胃癌生长和转移的影响。方法:将重组质粒B7-1pcDNA3.1(+)和空载体pcDNA3.1(+)分别转染SGC-7901细胞(简称S),用G418筛选分别建立稳定转染细胞株SGC-7901/B7-1pcDNA3.1(+)(简称S-B)和SGC-7901/pcDNA3.1(+)(简称S-P)。RT-PCR和流式细胞术分别从mRNA和蛋白水平检测B7-1基因表达,检测细胞周期分布,计算细胞增殖指数。分离人外周血单个核细胞(PBMC),分别与S-B、S-P、S共培养,检测PBMC黏附力和杀伤力,检测胃癌细胞凋亡情况。将S-B、S-P、S分别接种于BALB/c裸鼠胃大弯侧,观察B7-1基因转染对胃癌生长及淋巴转移的影响。结果:S-B高表达B7-1基因,S-P和S不表达B7-1基因。S-B、S-P、S增殖指数无显著差异。S-B与PBMC黏附力和杀伤力均明显高于S-P和S,而S-P与S无显著差异。种植S-B小鼠成瘤率和转移率均低于S-P和S,HE染色见淋巴细胞广泛浸润于S-B种植形成肿瘤组织及转移淋巴结。结论:B7-1基因提高胃癌细胞免疫原性抑制胃癌生长和淋巴转移。
- 亢健夏建国姜红李俊芳
- 关键词：B7-1SGC-7901淋巴转移免疫基因治疗
- 靶向β-catenin的shRNA真核表达质粒的构建及鉴定
- 2009年
- 目的:针对β-连环蛋白(β-catenin)基因的不同部位,构建靶向β-catenin的shRNA真核表达质粒,鉴定并筛选出最佳抑制效率的表达质粒。方法:针对β-catenin基因的不同部位设计3对短发卡RNA(shRNA)的寡核苷酸片段,克隆到真核表达载体pGPU6中,构建靶向β-catenin的shRNA真核表达质粒pGPU6-β-catenin-shRNA-1、2、3。利用脂质体转染人胃癌细胞株AGS,Western blot法检测并筛选最佳抑制效率的shRNA表达质粒。结果:3个靶向β-catenin的shRNA真核表达质粒pGPU6-β-catenin-shRNA-1、2、3经限制性酶切和测序确实基因插入正确,Westernblot法证实pGPU6-β-catenin-shRNA-3明显降低细胞内β-catenin蛋白的表达。结论:成功构建了靶向β-catenin的shRNA真核表达质粒pGPU6-β-catenin-shRNA-1、2、3,并筛选出最佳抑制效率的表达质粒,为进一步研究Wnt/β-catenin信号通路在胃癌中的作用奠定了基础。
- 姜红亢健丁永斌夏建国
- 关键词：Β-CATENIN
