侯玉慧
- 作品数：28 被引量：84H指数：5
- 供职机构：中华人民共和国农业部更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家质检总局科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鸡柔嫩艾美耳球虫ZJ株TA4基因的克隆及原核表达
- 本试验对E．tenella ZJ株的TA4基因进行了克隆和表达。根据已报道的柔嫩艾美尔球虫TA4基因序列设计引物,以孢子化卵囊总RNA为模板,用RT-PCR的方法扩增得到一特异片段,将扩增产物克隆至 pMD18-T转化D...
- 杜爱芳高翔徐慧侯玉慧庞林海孔得翔
- 关键词：柔嫩艾美尔球虫RT-PCR原核表达
- 文献传递
- 捻转血矛线虫(H.contortus)ZJ株H11蛋白基因的克隆及序列分析
- 参照已发表的捻转血矛线虫H11蛋白基因序列设计引物,以H.contortus ZJ株的总RNA为模板,进行RT-PCR扩增,成功扩增出H11基因.将PCR产物与pUCm-T载体连接后,转化DH5-α感受态细胞,筛选阳性克...
- 杜爱芳李孝军侯玉慧王素华
- 关键词：捻转血矛线虫基因克隆
- 文献传递
- 捻转血矛线虫(H.contortus)ZJ株15kDa分泌排泄(ES)蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
- 根据国外报道的捻转血矛线虫成虫15kDa 分泌排泄蛋白基因序列设计—对引物,用RT-PCR 方法扩增得到—特异性片段,将扩增产物连接到pUCm-T 载体上,转化入大肠杆菌DH5-a 中进行克隆。随后将重组质粒pUCm-T...
- 杜爱芳李孝军侯玉慧
- 关键词：捻转血矛线虫克隆
- 文献传递
- 猪附红细胞体PCR检测及体外培养方法的建立
- 附红细胞体病(Eperythrozoonosis)是广泛存在于人和动物体内的一种人畜共患病，己对养殖业和人类健康造成巨大威胁。猪附红细胞体病是由猪附红细胞体附着在红细胞上或者寄生于血浆中而引起。主要表现为急性型高热、黄疸...
- 侯玉慧
- 关键词：附红细胞体病原形态体外培养PCR检测
- 文献传递
- 秀丽隐杆线虫培养特性与保存方法研究被引量：34
- 2007年
- 秀丽隐杆线虫作为一种模式线虫,已广泛应用于寄生性线虫基因功能的研究以及寄生性线虫疫苗候选抗原基因的表达。通过对秀丽隐杆线虫形态、培养条件以及保存方面的研究,发现秀丽隐杆线虫在16℃NGM培养基中生长良好,将其放入30%甘油溶液中,在-80℃冰箱中可以保存较长的时间。
- 庞林海杜爱芳李孝军侯玉慧高翔
- 关键词：秀丽隐杆线虫
- 鸡柔嫩艾美耳球虫ZJ株TA4基因的克隆及原核表达被引量：2
- 2008年
- 本试验对E. tenella ZJ株的TA4基因进行了克隆和表达。根据已报道的柔嫩艾美尔球虫TA4基因序列设计引物,以孢子化卵囊总RNA为模板,用RT-PCR的方法扩增得到一特异片段,将扩增产物克隆至pMD18-T,转化DH5-α感受态,经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序。测序结果与参考序列比较,核苷酸同源性为99.1%。然后将重组质粒和表达载体pGEX-4T2分别以EcoRⅠ、XhoⅠ酶切后构建重组表达载体pGEX-TA4,并将其转化入大肠杆菌BL21中,提取质粒经酶切和PCR鉴定正确后,用IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Westernblot检测显示,TA4基因在大肠杆菌中获得表达;融合蛋白的分子量约为43ku,以包涵体形式存在;诱导6h的蛋白表达量可达到35.9%,采用抗GST抗体进行Westernblot,成功检测到了该特异性条带。
- 高翔杜爱芳张娟敏侯玉慧庞林海
- 关键词：柔嫩艾美尔球虫原核表达
- 猪附红细胞体病PCR诊断及其防治技术研究
- 杜爱芳赵现锋侯玉慧项玉燕张娟敏鲍伟华叶秀娟方维焕马有智季常青
- （1）课题来源与背景猪附红细胞体病世界各地都有发生，严重影响养猪业的发展，特别是近三年来报道更多，但主要集中在病例诊治方面。目前临床上该病的诊断方法主要以直接镜检为主，其中包括鲜血压片和涂片染色，但是假阳性率高。动物实验...
- 关键词：
- 关键词：附红细胞体病
- 牛附红细胞体病PCR诊断方法的建立被引量：2
- 2009年
- 根据已报道的牛附红细胞体16S rRNA的序列设计1对特异性引物,进行PCR。将PCR产物克隆并测序,结果显示所得基因片段为667 bp,与GenBank上Mycoplasma wenyonii序列同源性达到98.83%。试验建立的PCR诊断方法特异性强,与健康牛血液、牛无乳链球菌、金黄葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、大肠杆菌的DNA无交叉反应,能检测的牛附红细胞体最低DNA质量浓度是13.6 ng/L。应用该方法对130个奶牛血样进行牛附红细胞体病检测,结果表明总阳性感染率为24.62%。该方法具有快速、准确、敏感等特点,为牛附红细胞体病的诊断及分子流行病学的调查提供新的手段。
- 侯玉慧邬生力蔡渭明赵现锋杜爱芳
- 关键词：克隆
- 捻转血矛线虫(H.contortus)ZJ株H11蛋白基因的克隆及序列分析被引量：6
- 2005年
- 参照已发表的捻转血矛线虫H11蛋白基因序列设计引物,以H.contortusZJ株的总RNA为模板,进行RT2PCR扩增,成功扩增出H11基因。将PCR产物与pUCm2T载体连接后,转化DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆并测序。序列分析表明,其核苷酸序列与国外报道的H11基因的同源性为99.5%。编码氨基酸序列具有氨基肽酶的保守序列,推测可使虫体不能获得所必需的氨基酸而导致死亡。
- 杜爱芳李孝军侯玉慧王素华
- 关键词：捻转血矛线虫PCR产物阳性克隆保守序列氨基肽酶T载体
- 捻转血矛线虫(H.contortus)ZJ株H11蛋白基因的克隆及序列分析
- 参照已发表的捻转血矛线虫H11蛋白基因序列设计引物,以H.contortus zJ 株的总RNA为模板,进行RT-PCR 扩增,成功扩增出H11基因.将PCR 产物与pUCm-T 载体连接后,转化DH5-a 感受态细胞,...
- 杜爱芳李孝军侯玉慧王素华
- 关键词：捻转血矛线虫基因克隆
- 文献传递
