刘伟鹏
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中山大学附属第三医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 前列腺癌CRMP4基因启动子甲基化研究被引量：2
- 2010年
- 目的分析前列腺癌CRMP4基因启动子区CpG岛甲基化状况及其与CRMP4表达下调的关系,设计较为理想的诊断前列腺癌早期转移的分子诊断探针。方法去甲基化药物5-aza-dC分别以0.5μM、5μM及12.5μM三种不同浓度处理前列腺癌细胞,WesternBlot检测药物处理前后CRMP4表达的变化。硫化测序PCR寻找前列腺癌CRMP4基因启动子区甲基化位点,根据测序结果设计并筛选用于诊断前列腺癌早期转移的甲基化特异性PCR引物。结果去甲基化药物处理后,CRMP4蛋白的表达可以重新上调,并且随着使用的5-aza-dC浓度增加,其表达量也逐渐增加。转移性前列腺癌CRMP4基因启动子区存在2个连续甲基化区域,共有10个CpG位点(-848,-841,-690,-680,-678,-674,-671,-665,-660,-658)其甲基化率极高,而局限性前列腺癌及非肿瘤组织这些CpG位点则未甲基化或有偶发的甲基化。筛选出较为理想的诊断前列腺癌早期转移的甲基化特异性PCR引物,多数转移性前列腺癌及局限性进展期前列腺癌均可扩增出M条带。结论转移性前列腺癌CRMP4表达下调与其基因启动子区CpG岛甲基化相关,筛选出较为理想的诊断前列腺癌早期转移的分子诊断探针,有望为临床早期诊断前列腺癌转移提供新的分子生物学诊断方法。
- 刘伟鹏庞俊李辽源方友强蒲小勇高新
- 关键词：前列腺癌甲基化
- 肿瘤RNA转染DCs与同源CIKs共培养调控Akt/NF-κB细胞生存信号通道的实验研究被引量：1
- 2010年
- 目的研究肿瘤RNA转染树突状细胞(DCs)与同源细胞因子诱导的杀伤细胞(CIKs)共培养对前列腺癌细胞PC3内Akt/NF-κB生存信号通道的影响,探讨这种免疫治疗引起肿瘤细胞凋亡的分子机制。方法体外培养CIKs、DC-CIKs和RNA转染的共培养的DC-CIKs作为效应细胞,以传代培养的PC3细胞作为靶细胞,分别加到TRANSWELL 6孔细胞培养板上、下室。收集靶细胞,分别提取细胞可溶性总蛋白和核蛋白,利用Western Blotting检测Akt,phospho-Akt,phospho-IKKα/β以及NF-κBp65的表达量,以未干预的PC3细胞总蛋白和核蛋白作为阴性对照,以PI3K抑制剂LY294002作为实验的阳性对照。以β-actin作为内参照,利用Quantity One软件定量分析。结果以未干预的PC3细胞作为阴性对照,CIKs、DC-CIKs和RNA-DC-CIKs各免疫效应细胞处理组均显著抑制细胞浆中磷酸化Akt和磷酸化IKKα/β的表达。转录因子NF-κBp65的核定位减少,表达量降低。但胞浆中总Akt表达在实验组和对照组之间无显著性差异。各实验组间表达量比较,结果显示在RNA-DC-CIKs组phospho-Akt和phospho-IKKα/β和转录因子NF-κBp65表达量比CIK组更低,但无显著性差异。结论肿瘤RNA负载DC-CIKs、DC-CIKs和CIKs均能显著抑制PC3细胞内Akt的活化,降低活化的IKKα/β的表达,导致转录因子NF-κBp65核内定位和表达降低,从而抑制细胞生存信号通道,诱导肿瘤细胞凋亡。
- 庞俊湛海伦刘伟鹏高新
- 关键词：树突状细胞信号通道
- 前列腺癌基础与临床系列研究
- 高新周祥福邱剑光温星桥庞俊方友强蒲小勇李辽源狄金明司徒杰刘小彭孙其鹏刘伟鹏周建华王可兵
- 项目所属科学技术领域、主要内容、特点及应用前景：该项目属前列腺肿瘤诊断与治疗领域。主要内容：课题组从1998年起在国内开展前列腺癌的发生机制、淋巴转移机制、分子水平早期诊断基础研究以及微创腹腔镜前列腺癌根治术的手术方法改...
- 关键词：
- 关键词：前列腺癌免疫治疗
