吴岚
- 作品数:5 被引量:11H指数:2
- 供职机构:中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国际科技合作与交流专项项目基础研究重大项目前期研究专项更多>>
- 相关领域:医药卫生化学工程更多>>
- 采用流式细胞仪检测艾滋病病毒1型膜蛋白小鼠免疫后IFN-γ的表达
- 2002年
- 目的通过流式细胞技术检测艾滋病病毒1型(HIV-1)Gp120膜蛋白免疫小鼠后的IFN-γ的表达。方法 构建表达HIV-1gp120基因的复制型重组痘苗病毒。与DNA疫苗联合免疫小鼠,用流式细胞仪检测小鼠脾淋巴细胞中IFN-γ的表达。结果 获得表达中国HIV-1流行株gp120基因的重组痘苗病毒rVVgp120、rVVM304,能正确表达Gp120蛋白。与DNA疫苗p120-VRC、pM304-VRC联合免疫小鼠后,用流式细胞仪检测到小鼠脾淋巴细胞能特异性的表达IFN-γ。结论 用流式细胞检测技术成功检测到免疫小鼠的脾淋巴细胞特异性的表达IFN-γ,用此方法可方便快捷地检测小鼠的细胞免疫效果。
- 吴岚冯毅张旭东刘颖唐海丽李红梅邵一鸣姚均冯鑫
- 关键词:流式细胞仪艾滋病IFN-Γ流式细胞仪
- HIV-1膜蛋白抗原优化改造研究进展
- 2007年
- HIV-1的外膜糖蛋白能与T细胞或单核/巨噬细胞表面的CD4受体分子结合,从而起始HIV感染靶细胞的生物学过程。由于HIV-1膜蛋白是中和抗体的主要作用靶位,因此成为HIV疫苗中不可缺少的组分。越来越多的研究表明:天然HIV-1膜蛋白不能激发有效的中和抗体,所以需要对膜蛋白进行优化改造,以提高中和表位的免疫原性。本文就近年来HIV-1膜蛋白抗原优化改造研究做一简要回顾以供参考。
- 万延民吴岚徐建青邵一鸣(审校)
- 关键词:疫苗中和抗体
- 表达HIV多价抗原的重组痘苗病毒的构建及免疫效果研究被引量:8
- 2003年
- 为了构建适用于中国的HIV候选疫苗,利用痘苗病毒天坛株表达中国HIV 1主要流行毒株CN54的gagpolΔ和gp140TM基因。实验结果显示,重组痘苗病毒能正确表达Gag和gp140TM蛋白。获得的重组痘苗病毒与DNA疫苗、重组腺病毒联合免疫Balb/c小鼠,并检测不同免疫程序在小鼠中诱导的细胞和体液免疫。免疫实验表明,DNA疫苗初始免疫,重组腺病毒与重组痘苗病毒依次加强所诱导的CTL应答、T淋巴细胞增殖以及中和抗体均高于其他免疫方案。DNA疫苗与两种活载体疫苗的联合运用,在小动物模型中取得了较好的免疫效果,这将为艾滋病疫苗的研究增加新的免疫策略。
- 刘颖吴岚陈建平周克明陆柔剑洪坤学阮力邵一鸣
- 关键词:HIV重组痘苗病毒免疫效果艾滋病
- HIV-1中国株CN54 Gag蛋白在毕赤酵母中的表达纯化和鉴定被引量:1
- 2005年
- 目的 利用毕赤酵母表达系统高效表达HIV 1中国株CN5 4的Gag蛋白,初步确立发酵和纯化工艺。方法 PCR扩增CN5 4Gag基因,插入毕赤酵母表达载体pPS1 0 ,电转化毕赤酵母菌株GS115 ,G4 18筛选高表达工程菌,利用5L发酵罐进行高密发酵,通过SPSepharoseFF和DEAESeparoseFF柱层析,用HIV 1阳性血清和p2 4抗原检测试剂盒对纯化后的Gag蛋白进行免疫学性质的鉴定。结果 构建了高效表达CN5 4Gag蛋白的毕赤酵母工程菌株,发酵罐培养的菌体密度吸光度(A6 0 0 值)超过30 0 ,Gag蛋白表达量达到12 0mg L。纯化后的Gag蛋白纯度高于90 % ,p2 4检测强阳性并能够与HIV 1阳性血清发生特异的抗原抗体结合反应。结论 本研究在毕赤酵母中高效表达了HIV 1中国株CN5 4的Gag蛋白,并进行了纯化和鉴定,为针对我国新一代HIV蛋白亚单位疫苗的研制奠定了基础。
- 郝彦玲马民强傅晶晶李海山王贻杰刘颖吴岚刘勇邵一鸣
- 关键词:GAG蛋白HIV-1中国株SEPHAROSEGAG基因免疫学性质
- 表达HIV-1 gag-polΔ和gp140TM蛋白复制缺陷型重组腺病毒的构建及免疫效果研究被引量:2
- 2004年
- 目的 构建表达人免疫缺陷病毒Ⅰ型gag polΔ和gp14 0TM基因的非复制型重组腺病毒。方法 首先将HIV 1的gag polΔ和gp14 0TM基因插入穿梭载体 ,再与腺病毒骨架质粒pAdEasy 1共转化E coliBJ5 183,获得重组子。转化 2 93细胞后获得重组病毒。重组腺病毒与DNA疫苗联合免疫小鼠 ,ELISA检测小鼠血清中的抗体。结果 获得两株重组腺病毒vAd gag polΔ和vAd gp14 0TM ,能正确表达Gp14 0TM、Gag蛋白以及经剪切加工的P2 4蛋白 ,与DNA疫苗联合免疫小鼠后能产生高滴度的HIV 1特异性的抗体。结论 成功构建了表达HIV 1结构基因的重组腺病毒 ,能有效诱导HIV 1特异性抗体。
- 刘颖吴岚周克明张旭东洪坤学邵一鸣
- 关键词:HIV-1重组腺病毒免疫效果艾滋病疫苗