夏青娟
- 作品数：16 被引量：58H指数：4
- 供职机构：长春生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>
- 甲肝疫苗使用现状及研究进展被引量：2
- 2009年
- 王振远李树林夏青娟
- 关键词：甲肝病毒疫苗使用暴露后预防治疗药物甲肝疫苗急性传染病
- TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测甲型肝炎减毒活疫苗病毒含量的研究被引量：3
- 2013年
- 目的：建立一种快速定量检测甲型肝炎减毒活疫苗病毒含量的实时荧光定量RT-PCR方法。方法对Gen-Bank中登陆的甲型肝炎减毒活疫苗株（ L-A-1）和其他甲型肝炎病毒基因组全序列比较分析，根据其高度保守的5′端非编码区设计针对甲型肝炎减毒活疫苗株特异性引物与探针，对荧光定量RT-PCR反应条件进行优化，检测该方法的特异性和灵敏性，并对甲型肝炎减毒活疫苗病毒含量进行定量检测。结果该方法对甲型肝炎减毒活疫苗株高度特异，扩增片段为207 bp，不与其他肠道病毒发生非特异性反应。在104 CCID50/管～10-1 CCID50/管之间有良好的扩增曲线，检测的灵敏度可达0．1CCID50～0．01CCID50，比普通RT-PCR高100倍。结论该方法具有快速、灵敏、特异、重复性好等优点，可应用于甲型肝炎减毒活疫苗生产过程中病毒含量滴度测定及指导疫苗成品的配制。
- 夏青娟徐晓霞李树林岳立广龚士卿刘令九
- 关键词：甲肝病毒TAQMAN探针
- 甲型肝炎疫苗的使用现状及研究进展被引量：8
- 2017年
- 甲型肝炎（甲肝）是由甲肝病毒引起的以肝脏损害为主的急性、自限性肠道传染病，主要通过污染的水源和食物或人与人接触传播。甲肝疫苗是对抗甲型肝炎最有效的方法。甲肝疫苗的开发和应用对甲肝的预防和控制起到了重要的作用。此文就甲肝的流行病学、疫苗的使用现状及新型疫苗的研发等方面进行综述。
- 夏青娟侯丽娟徐艳玲
- 关键词：肝炎甲型甲型
- 猪生长激素抗独特型抗体的制备及免疫学鉴定被引量：4
- 2006年
- 应用猪生长激素(Ag)纯品,通过杂交瘤技术制备了猪生长激素单克隆抗体(Ab1)。Ab1经免疫亲和层析柱纯化后免疫新西兰白兔,其血清经饱和硫酸铵纯化后获得猪生长激素抗独特型抗体(Ab2)。再应用ELISA等方法进行鉴别。Ab2与Ab1呈阳性反应,与BALB/c小鼠r球蛋白呈阴性反应;Ab2与Ag竞争结合Ab1;Ab2抑制Ab1与Ag的结合。Ab1是针对猪生长激素纯品的单克隆抗体。Ab2是具有猪生长激素抗原内影像的抗独特型抗体。
- 郑鑫夏青娟朱世成郝林琳姜海龙宋海龙龙淼王哲
- 关键词：猪生长激素抗独特型抗体免疫
- 鹿茸多肽的生物学活性研究被引量：21
- 2006年
- 采用醇沉法从新鲜马鹿茸中提取出活性多肽。该多肽为一系列分子量低于17kD的多肽混合物，Western blotting检测到其含有胰岛素样生长因子-1（IGF-1）。Bradford法定量总多肽约为1～2mg／g鲜重，RIA法定量IGF-1为300～400pg／g鲜重。小鼠腹腔连续注射多肽6d后，对其促生长、免疫调节、抗氧化、抗疲劳等生物学活性进行了研究。结果表明：小鼠体重较对照组有增加趋势（P〉0．05）；腹腔注射1，4，8mg／kg鹿茸多肽组小鼠玫瑰花环成环率分别高于对照组（生理盐水）33．3％，34．2％，39．6％，差异显著（P〈0．05）。注射8mg／kg鹿茸多肽的小鼠血清溶血素OD值与对照组差异极显著（P〈0．01）。实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率分别比对照组高22．1％，25．8％，26．5％，差异显著或极显著（P〈0．05或P〈0．01），说明鹿茸多肽具有免疫调节作用，且呈剂量依赖性。注射4，8mg／kg鹿茸多肽组老年小鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）活性分别升高51．1％，59．2％，血清丙二醛（MDA）含量分别下降14．9％，16．7％，与对照组差异显著（P〈0．05），说明鹿茸多肽对老年小鼠有较强的抗氧化作用。小鼠负重游泳实验中，注射小鼠存活时间比对照组延长了21．67min（P〈0．05），说明鹿茸多肽具有抗疲劳作用。
- 郝林琳刘松财夏青娟章倩倩侯锋张永亮
- 关键词：鹿茸多肽生物学活性免疫调节超氧化物歧化酶丙二醛
- 抗甲型肝炎病毒卵黄免疫球蛋白的制备及应用
- 2013年
- 目的 制备抗甲型肝炎病毒（hepatitis A virus,HAV）卵黄免疫球蛋白（immunoglobulin of yolk,IgY）,并建立双抗体夹心ELISA法,用于测定甲肝疫苗中的HAV抗原含量。方法 用纯化的HAV免疫健康产蛋母鸡,制备抗HAVIgY,采用多步骤分离纯化IgY,紫外分光光度法测定纯化IgY的蛋白含量,还原型SDS-PAGE分析IgY的相对分子质量及纯度,间接ELISA法检测IgY的效价、特异性及其热稳定性和酸碱稳定性。以纯化的IgY作为包被抗体,HRP标记的抗HAV单克隆抗体作为二抗,建立双抗体夹心ELISA法,对疫苗生产过程中的HAV抗原含量进行测定,并与市售ELISA试剂盒的检测结果进行比较。结果 亲和层析纯化后的抗HAV IgY浓度为3.67 mg/ml;重链和轻链的相对分子质量分别为66 000和27 000,纯度为96.78豫;效价最高为1：16 000;纯化的抗HAV IgY只与HAV呈阳性反应,与脊髓灰质炎病毒和肠道病毒71（enterovirus 71,EV71）均不反应;纯化的抗HAV IgY在25～70℃条件下处理15 min及经pH 3.0～10.0的Tris-HCL缓冲液处理2 h,其抗体效价基本无影响。建立的双抗体夹心ELISA法HAV浓度在15.62～2 000.00 ng/ml范围内,HAV浓度的对数值与A450值之间呈线性相关,R2=0.935,最低检测量为7.81 ng/ml,与市售试剂盒检测结果具有良好的相关性,相关系数为0.952 7。结论 制备的抗HAV IgY浓度、纯度、效价均较高,特异性较强,稳定性良好,建立的双抗体夹心ELISA法可用于检测甲肝疫苗生产过程中HAV的抗原含量。
- 夏青娟李树林孟凡东赵淑杰徐晓霞惠琪刘令九
- 林蛙皮多肽制备及其理化性质被引量：5
- 2017年
- 从林蛙皮肤中提取的小分子多肽具有诸多生物活性。以鲜活林蛙为试验材料,剥离皮肤,采用酶解法提取小分子活性多肽,并研究其理化性质。结果表明:制备的林蛙皮多肽的紫外特征吸收峰位于220 nm处,280 nm附近吸收峰较小;分子量主要分布在190~1 000 u,并且在250~540 u的分布最多,占37.47%;该混合多肽具有多种生物活性因子,尤其是抗菌肽和凋亡调控蛋白;在不同p H值缓冲溶液中都具有良好的溶解性;抑菌试验表明其对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有不同程度的抑菌活性。证明制备的小分子混合多肽有望成为新的制剂原料。
- 聂林燕石洪宇程诚于浩郝林琳夏青娟
- 关键词：多肽理化性质抑菌活性
- 细胞培养结合实时荧光RT-PCR法快速检测甲肝病毒滴度的研究被引量：2
- 2014年
- 目的建立一种细胞培养与实时荧光RT-PCR相结合的快速检测甲肝病毒滴度的方法。方法根据甲肝病毒(HAV)L-A-1株5'端基因组序列,设计了2条基因特异性引物及一条探针,建立实时荧光RT-PCR法,结合细胞培养检测甲肝病毒滴度,并与ELISA检测法进行比较。结果实验中建立的方法能特异检测甲肝病毒,细胞培养8d检测病毒滴度为lg107.0CCID50/mL。同一样本重复检测3次,批内样本Ct值的变异系数最大为0.89%,批间样本Ct值变异系数最大为1.66%。建立的细胞培养结合实时荧光RT-PCR法(细胞培养8 d)与细胞培养ELISA法(细胞培养28 d)检测甲肝病毒滴度结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论该方法具有快速、灵敏、特异等优点,应用于疫苗常规检测有良好前景。
- 徐晓霞夏青娟徐艳玲岳立广惠琦褚东林曹玉婷刘令九
- 关键词：甲型肝炎病毒细胞培养实时荧光RT-PCRELISA
- 狂犬病病毒抗原ELISA检测方法的建立及其应用被引量：2
- 2009年
- 目的建立狂犬病病毒抗原ELISA检测方法,并进行初步应用。方法采用狂犬病病毒CTN-1V纯化抗原免疫家兔,制备多克隆抗体,作为酶标抗体,马抗狂犬血清纯化抗体作为包被抗体,建立双抗体夹心ELISA法。对该方法进行验证,检测狂犬病病毒原液毒力和疫苗效力,并与小鼠(NIH)法检测结果进行对比。结果双抗体夹心ELISA检测方法的最低检出限为0.17 IU/ml,最佳线性范围为0.17～2.00 IU/ml,相关系数R>0.97;批间及试验内变异系数均小于10%,特异性、稳定性均良好;检测20批病毒原液毒力及疫苗效力,结果与NIH法相比,差异无统计学意义。结论已建立狂犬病病毒抗原ELISA检测方法,可用于生产过程中狂犬病疫苗原液和半成品的检定。
- 王亚军戚凤春薛向光李晓波王丽娜谢琳王宇夏青娟隋波张梅魏涛郭立君
- 关键词：狂犬病疫苗病毒抗原ELISA效力
- 细胞培养/链特异性RT-PCR方法检测甲型肝炎减毒活疫苗病毒滴度被引量：2
- 2015年
- 目的建立检测甲型肝炎减毒活疫苗病毒滴度的细胞培养/链特异性逆转录聚合酶链式反应(strand-specific reverse transcriptase-polymerase chain reaction,strand-specific RT-PCR)方法。方法根据甲型肝炎病毒(HAV)L-A-1株基因组序列,设计5条特异性引物。将甲型肝炎减毒活疫苗原液感染2BS细胞,收获增殖高峰期的HAV,提取RNA,进行2轮链特异性PCR扩增,检测HAV复制过程中的负链RNA,通过Reed-Muench公式计算HAV病毒滴度,并对建立的细胞培养/链特异性RT-PCR法进行特异性及敏感性验证,同时用该方法检测4批冻干甲型肝炎减毒活疫苗病毒滴度,并与《中国药典》三部(2010版)中甲型肝炎减毒活疫苗病毒滴度检测方法(细胞培养时间为28 d/ELISA法)进行比较。结果 HAV负链RNA经2轮扩增获得阳性扩增条带,大小与预期相符。该方法检测HAV复制过程中的负链RNA,特异性、敏感度均较好。两种方法检测的病毒滴度接近,差异无统计学意义(P>0.05)。结论建立的细胞培养/链特异性RT-PCR方法检测周期短,灵敏度、特异性好,可用于疫苗的滴度检测。
- 夏青娟徐艳玲李树林禇东琳候丽娟翁滨肖想邱璐徐晓霞刘令九
- 关键词：甲肝减毒活疫苗病毒滴度
