孙建宏
- 作品数：66 被引量：255H指数：10
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学交通运输工程医药卫生更多>>
- 禽流感的快速诊断方法
- 2004年
- 李维义孙建宏刘景利辛晓光
- 关键词：禽流感快速诊断方法血凝抑制试验琼脂扩散试验禽流感病毒
- 猪鼻支原体荧光PCR检测方法的建立和应用
- 2023年
- 为了建立猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)快速荧光PCR检测方法,本研究合成了该病原特异性基因P37的重组质粒,根据该基因设计荧光PCR引物和探针,并对设计的引物和探针的特异性、敏感性和重复性进行了检测。结果显示,该方法具有高度的特异性,除了识别猪鼻支原体基因组外,对猪的基因组和猪常见病原的基因组均不发生交叉反应。在敏感性和重复性试验中,该方法对猪鼻支原体的检测限为1 000copies/m L,变异系数小于3%,因此具有优良的敏感性和稳定性。用该方法检测临床样本,阳性检出率为76%(38/50),远高于普通PCR的阳性检出率(40%,20/50)。上述结果表明,本研究建立的荧光PCR方法在特异性、敏感性和稳定性方面均满足猪鼻支原体的临床检测要求,可以用于猪鼻支原体临床样品的检测。
- 孙岩闫丽辉史林林关野刘恒贵孙建宏
- 关键词：荧光PCR
- 新城疫病毒F48E9株L基因的克隆及鉴定被引量：1
- 2000年
- 闫丽辉曹殿军刘培欣孙建宏
- 关键词：新城疫病毒F48E9病毒基因组全基因序列结构蛋白基因片段
- 禽流感病毒的分离与鉴定技术被引量：1
- 2005年
- 禽流感病毒的诊断一般是通过鸡胚分离病毒,检测其血凝活性,并应用琼脂扩散试验或其他试验确定其是否为禽流感病毒,再进一步进行亚型鉴定、致病力测定。如果是H5或H7亚型,还应采用PCR等方法对血凝素裂解位点的氨基酸序列进行测定。
- 孙建宏刘景利张从禄
- 关键词：禽流感病毒
- 禽腺病毒Ⅰ型琼脂扩散抗原的研制及应用被引量：15
- 2009年
- 研制了禽腺病毒Ⅰ型琼脂扩散抗原,检测了该抗原的效价和特异性,并用该抗原对人工感染鸡沉淀抗体的变化以及现地血清样本进行了检测。结果显示,该抗原不与其他主要禽类病原体阳性血清反应,可与1∶8稀释的禽腺病毒Ⅰ型阳性血清反应。对3月龄SPF鸡进行人工感染后,第7 d可检测到沉淀抗体,血清中的沉淀抗体可持续3个月以上。抗原在-20℃条件下可保存2年。经对现地38个鸡场进行检测,其中阳性场14个,阳性率为36.84%,表明我国的禽腺病毒感染率很高。结果证实,研制的禽腺病毒Ⅰ型琼脂扩散抗原敏感、特异,可用于禽腺病毒感染的血清学检测。
- 智海东解生亮杨志王云峰张宇辉王牟平孙建宏陈洪岩
- 关键词：禽腺病毒感染率
- 禽流感病毒H9亚型血凝抑制抗原标准物质及制备方法
- 本发明涉及禽流感病毒H9亚型血凝抑制抗原标准物质及制备方法。本标准物质是由禽流感病毒H9亚型CKSH01株病毒经过病毒液的制备与检验；病毒液灭活、浓缩、半成品检验；冻干、成品检验、均一性检验及稳定性检验及标准物质的标定、...
- 孙建宏刘景利胡井雷杨帆王在时韩正博张从禄田国彬
- NDV活疫苗免疫及免疫攻毒后组织中病毒分布动态研究被引量：2
- 2000年
- 新城疫病毒虽然只有一种血清型，但不同毒株之间毒力和生物学特性差异悬殊，这必然导致它们在致病机理上的差异，在ＮＤ流行中起着重要作用。为了从根本上阐明新城疫的致病和免疫机理，本研究利用我们所建立的能区分ＮＤＶ强弱毒株的ＲＴ－ＰＣＲ方法，对弱毒疫苗免疫鸡及免疫攻毒鸡体内病毒动态分布规律进行了检测和研究。 实验共分为五组：第一组为空白对照组；第二，三组分别为以 ＮＤＶ弱毒株 Ｌａ Ｓｏｔａ、Ｖ４经滴鼻、点眼免疫雏鸡；第四、五组分别为在免疫后２１天，以强毒株Ｆ４８Ｅ９攻毒的实验鸡。在免疫后第１、３、５、８、１２、１６、２１及３０天；攻毒后第１、３、５、８、１２、１５天采集病料（肝脏、十二指肠、肺、食管、法氏囊、气管），检测病毒在各组织中的分布。结果表明，接种Ｌａ Ｓｏｔａ的实验组ＳＰＦ鸡从免疫后第５天开始，可以在肝脏组织中检测出病毒的存在，而Ｖ４组则从第３天开始即可在肝脏组织中检测出病毒的存在；气管组织中从第８天开始可检出病毒；其余几种组织病毒含量极低或不存在病毒分布。用Ｆ４８Ｅ９强毒攻毒后第一天开始就能在肝、肺中能检测出强弱两种病毒，攻毒后第７天开始在食道组织中检出病毒。由上述结果可以看出，自然途径感染（鼻、眼）似乎偏?
- 刘培欣曹殿军闫丽辉孙建宏陈杰曲鲁江
- 关键词：NDV强毒株活疫苗弱毒株弱毒疫苗
- 鸡免疫球蛋白检测技术的发展被引量：14
- 2000年
- 孙建宏曹殿军符芳刘宝全
- 关键词：免疫球蛋白ELISAIPMA
- 禽类IFN-γmRNA表达量检测方法的初步建立被引量：1
- 2004年
- 为了建立检测IFNγmRNA表达量的方法 ,设计 2对用于IFNγ和 1对用于 β actin基因扩增的引物 ,建立可用于IFNγmRNA表达量检测的技术。结果表明 :用RTPCR技术检测 5组免疫鸡和 1组对照鸡外周血单个核细胞发现 ,全病毒和含有全病毒的疫苗比单一肽段进行免疫IFNγmRNA表达量要大的多 。
- 李景荣孙建宏张海峰刘培欣闫丽辉曹殿军冯新畅
- 关键词：禽类表达量RT-PCR疫苗
- 新城疫La Sota与V4疫苗株免疫鸡特异性抗体动态变化规律比较
- 2000年
- 鸡新城疫自１９３６年暴发以来，一直是禽病预防的第一类传染病。虽然我国每年在新城疫疫苗方面的投入远远超过其它疫苗，但仍不能有效的预防鸡新城疫的发生，严重制约着养禽业的发展，归根结缔是对新城疫免疫机理研究的不够透彻。新城疫 Ｌａ Ｓｏｔａ和 Ｖ４疫苗是目前世界范围内应用最广泛的疫苗。现在应用中出现了两种现象，一是在高抗体水平（ＨＩ）鸡中仍有ＮＤ发生，一是Ｖ４免疫鸡群的抗体水平（ＨＩ）不是很高却仍能有效的保护鸡体抵抗ＮＤＶ感染。以我们目前对ＮＤ免疫的认识尚无法解释该现象，说明抗ＮＤＶ免疫的机理是系统的、复杂的、多方面的，仍有许多问题有待我们去探索。为了全面系统阐明ＮＤ免疫机理，我们首先对两种疫苗鸡体液免疫、粘膜免疫激活规律的异同进行比较，以期能较全面地揭示两种疫苗的抗体变化规律及异同，为从根本上控制ＮＤ提供试验和理论依据。 本试验应用ＨＩ试验和所建立的检测ＮＤＶ特异性的ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ间接ＥＬＩＳＡ方法分别对ＮＤＶ Ｌａ Ｓｏｔａ、Ｖ４免疫雏鸡（滴鼻、点眼）和免疫攻毒鸡（接种新城疫Ｆ４８Ｅ９）血清中的ＨＩ抗体价、ＩｇＧ、ＩｇＭ抗体及泪液、哈德氏腺（ＨＧ）中ｓＩｇＡ的动态变化进行了监测和比较，首次全面系统的研究了新?
- 孙建宏曹殿军刘培欣闫丽辉陈杰刘宝全
- 关键词：SOTAV4IGMIGA
