闫丽辉
- 作品数：75 被引量：408H指数：11
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划黑龙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学交通运输工程医药卫生更多>>
- 对仔猪腹泻防控几点想法
- 2016年
- 近年来,许多猪场不断出现以仔猪腹泻为主要临床表现的疫病,造成大量仔猪死亡,常规的预防控制措施效果不明显,给养猪业造成严重的经济损失。成年猪呈现一过性腹泻,症状轻微。仔猪群表现为严重腹泻,且发病急,一旦出现病例可迅速蔓延开来。且不同发病猪场综合防控手段也不尽相同,究其原因,说法不一。笔者通过查阅资料及对部分案例分析认为,对仔猪腹泻防控应从多方面入手考虑,并积极采取综合的防控手段来预防和控制。
- 朱子健闫丽辉王静朱庆虎
- 关键词：非传染性因素疫病控制TGEV腹泻病猪传染性胃肠炎
- 新城疫病毒鹌鹑分离株融合蛋白基因的克隆与序列分析被引量：9
- 1999年
- 本研究以一株从自然发生新城疫病死的鹌鹑中所分离到的新城疫病毒（QNDV／89）为研究对象，用反转录一聚合酶链式反应（RT-PCR）对QNDV／89株的F全基因进行分段扩增、定向克隆到pUC119载体后，采用Sanger’s双脱氧末端终止法测定其核苷酸序列，并推导出相应氨基酸序列。QNDV／89株F基因全长1662bp，单一的开放阅读框编码553个氨基酸的多肽，其裂解位点的氨基酸序列为112R-R-Q-R-R-F117，是NDV强毒株所特有的序列结构，这与其生物学特性及致病性实验结果是相一致的。序列分析结果表明，QNDV／89株与F48E9株的核苷酸同源率高达99.22％，氨基酸的同源率为98.37％;而与弱毒株LaSota的核苷酸同源率为88.93％，氨基酸的同源率为90.42％。本研究首次报道了流行于我国鹌鹑中的新城疫强毒融合蛋白基因序列，并与其它新城疫病毒进行了同源性比较，证明QNDV／89株核苷酸的变异引起了其蛋白质二级结构的部分改变。
- 郭鑫曹殿军闵平闫丽辉刘培欣房海卢景良
- 关键词：新城疫病毒鹌鹑分离株融合蛋白基因克隆
- 新城疫病毒F_(48)E_9株M NP F和HN基因的真核表达被引量：15
- 2006年
- 将新城疫病毒(NDV)F48E9株的M、NP、F和HN基因克隆到真核细胞表达载体 pCAGG上,经酶切、PCR鉴定和序列分析,分别筛选出了含有M、NP、F和HN基因的重组质粒, 命名为pCAGG-M、pCAGG-NP、pCAGG-F和pCAGG-HN。纯化后的重组质粒通过脂质体单独转染HeLa细胞,经间接免疫荧光试验检测到了M、NP、F和HN蛋白的表达。pCAGG-M、 pCAGG-NP、pCAGG-F和pCAGG-HN重组质粒组合共转染HeLa细胞48 h后,可以观察到明显的细胞融合现象。试验结果表明,NDV F48E9株的M、NP、F和HN蛋白均在HeLa细胞内得到了成功表达,同时证明在该表达系统中F蛋白不足以诱导细胞融合。
- 闻晓波闫丽辉曹殿军刘培欣刘春国步志高
- 关键词：新城疫病毒M基因NP基因HN基因真核细胞表达
- NDV活疫苗免疫及免疫攻毒后组织中病毒分布动态研究被引量：2
- 2000年
- 新城疫病毒虽然只有一种血清型，但不同毒株之间毒力和生物学特性差异悬殊，这必然导致它们在致病机理上的差异，在ＮＤ流行中起着重要作用。为了从根本上阐明新城疫的致病和免疫机理，本研究利用我们所建立的能区分ＮＤＶ强弱毒株的ＲＴ－ＰＣＲ方法，对弱毒疫苗免疫鸡及免疫攻毒鸡体内病毒动态分布规律进行了检测和研究。 实验共分为五组：第一组为空白对照组；第二，三组分别为以 ＮＤＶ弱毒株 Ｌａ Ｓｏｔａ、Ｖ４经滴鼻、点眼免疫雏鸡；第四、五组分别为在免疫后２１天，以强毒株Ｆ４８Ｅ９攻毒的实验鸡。在免疫后第１、３、５、８、１２、１６、２１及３０天；攻毒后第１、３、５、８、１２、１５天采集病料（肝脏、十二指肠、肺、食管、法氏囊、气管），检测病毒在各组织中的分布。结果表明，接种Ｌａ Ｓｏｔａ的实验组ＳＰＦ鸡从免疫后第５天开始，可以在肝脏组织中检测出病毒的存在，而Ｖ４组则从第３天开始即可在肝脏组织中检测出病毒的存在；气管组织中从第８天开始可检出病毒；其余几种组织病毒含量极低或不存在病毒分布。用Ｆ４８Ｅ９强毒攻毒后第一天开始就能在肝、肺中能检测出强弱两种病毒，攻毒后第７天开始在食道组织中检出病毒。由上述结果可以看出，自然途径感染（鼻、眼）似乎偏?
- 刘培欣曹殿军闫丽辉孙建宏陈杰曲鲁江
- 关键词：NDV强毒株活疫苗弱毒株弱毒疫苗
- 鸡减蛋综合征人工接种抗体消长规律的研究
- 2011年
- 用鸡减蛋综合征京911株油乳剂灭活疫苗以0.3mL/只,0.5mL/只和1mL/只三种剂量分接种120日龄SPF鸡各10只,5d后开始采血分离血清,检测EDS76-HI抗体,以后每隔一定时间进行抗体监测。结果表明:免疫后7d即能检测出抗体,在免疫后10d即全部出现抗体,至28d达到高峰,至180dEDS76-HI抗体水平仍保持在10.4log2。
- 鞠妍闫丽辉朱庆虎王牟平
- 关键词：鸡减蛋综合征灭活疫苗抗体
- 禽类IFN-γmRNA表达量检测方法的初步建立被引量：1
- 2004年
- 为了建立检测IFNγmRNA表达量的方法 ,设计 2对用于IFNγ和 1对用于 β actin基因扩增的引物 ,建立可用于IFNγmRNA表达量检测的技术。结果表明 :用RTPCR技术检测 5组免疫鸡和 1组对照鸡外周血单个核细胞发现 ,全病毒和含有全病毒的疫苗比单一肽段进行免疫IFNγmRNA表达量要大的多 。
- 李景荣孙建宏张海峰刘培欣闫丽辉曹殿军冯新畅
- 关键词：禽类表达量RT-PCR疫苗
- 内蒙古二连浩特市猪病毒性腹泻的流行病学调查被引量：2
- 2018年
- 引起猪病毒性腹泻病的病原有很多,如猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪轮状病毒（PoRV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪伪狂犬病毒（PRV）、猪细小病毒（PPV）和猪蓝耳病病毒（PRRSV）等,但以腹泻为主症的病原主要是TGEV、PEDV和PoRV 3种。
- 张虎闫丽辉鞠妍王青竹哈斯巴特尔阿木嘎楞朱庆虎
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒病毒性腹泻病流行病学调查猪伪狂犬病毒猪轮状病毒
- 新城疫La Sota与V4疫苗株免疫鸡特异性抗体动态变化规律比较
- 2000年
- 鸡新城疫自１９３６年暴发以来，一直是禽病预防的第一类传染病。虽然我国每年在新城疫疫苗方面的投入远远超过其它疫苗，但仍不能有效的预防鸡新城疫的发生，严重制约着养禽业的发展，归根结缔是对新城疫免疫机理研究的不够透彻。新城疫 Ｌａ Ｓｏｔａ和 Ｖ４疫苗是目前世界范围内应用最广泛的疫苗。现在应用中出现了两种现象，一是在高抗体水平（ＨＩ）鸡中仍有ＮＤ发生，一是Ｖ４免疫鸡群的抗体水平（ＨＩ）不是很高却仍能有效的保护鸡体抵抗ＮＤＶ感染。以我们目前对ＮＤ免疫的认识尚无法解释该现象，说明抗ＮＤＶ免疫的机理是系统的、复杂的、多方面的，仍有许多问题有待我们去探索。为了全面系统阐明ＮＤ免疫机理，我们首先对两种疫苗鸡体液免疫、粘膜免疫激活规律的异同进行比较，以期能较全面地揭示两种疫苗的抗体变化规律及异同，为从根本上控制ＮＤ提供试验和理论依据。 本试验应用ＨＩ试验和所建立的检测ＮＤＶ特异性的ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ间接ＥＬＩＳＡ方法分别对ＮＤＶ Ｌａ Ｓｏｔａ、Ｖ４免疫雏鸡（滴鼻、点眼）和免疫攻毒鸡（接种新城疫Ｆ４８Ｅ９）血清中的ＨＩ抗体价、ＩｇＧ、ＩｇＭ抗体及泪液、哈德氏腺（ＨＧ）中ｓＩｇＡ的动态变化进行了监测和比较，首次全面系统的研究了新?
- 孙建宏曹殿军刘培欣闫丽辉陈杰刘宝全
- 关键词：SOTAV4IGMIGA
- 我国部分地区NDV的分子流行病学研究被引量：12
- 2000年
- 新城疫（Ｎｅｗｃａｓｔｌｅ ｄｉｓｅａｓｅ，ＮＤ）是由新城疫病毒（ＮＤＶ）引起的禽类的一种以呼吸道、消化道粘膜出血为典型症状的急性传染病，其病原——ＮＤＶ是副粘病毒科、副粘病毒亚科、腮腺炎病毒属的成员，为有囊膜的负链ＲＮＡ病毒。ＮＤＶ基因组为单股不分节ＲＮＡ，编码六种病毒结构蛋白，其中融合蛋白（Ｆ）和血凝素－神经氨酸酶蛋白（ＨＮ）构成囊膜外表面的纤突，是ＮＤＶ的功能性糖蛋白，在致病和免疫应答过程中起重要作用［１］。由于ＮＤＶ只有一种血清型，对ＮＤＶ不同毒株的差异性分析只能采用毒力、蚀斑形成能力测定等功能性试验来进行，但分型要么太细，无规律可循；要么过于粗放，无流行病学意义，使得ＮＤＶ流行病学研究一直难以突破。 近年来，随着分子生物学技术的广泛应用，使得人们在分子水平上对病毒遗传变异机制的研究取得了长足进展，发现病毒的遗传变异与疾病的流行有着密不可分的联系，并形成了病毒分子流行病学这样一门崭新学科，也为ＮＤ的流行病学研究提供了一种先进技术。已有研究表明，ＮＤＶＦ基因的遗传变异与ＮＤＶ的变异和流行密切相关，是ＮＤＶ分子流行病学研究的首选基因。
- 曹殿军郭鑫梁荣闫丽辉刘培欣闵平陈杰
- 关键词：新城疫病毒F基因系统发育进化树分子流行病学
- 新城疫病毒F_(48)E_9株和La Sota株F基因在Bac-to-Bac昆虫杆状病毒系统中的表达被引量：2
- 2006年
- 将新城疫病毒(F48E9株和La Sota株)F基因插入至杆状病毒转移载体pFastBacTMHT A中,分别构建重组质粒pFastBacHT-F48F,pFastBacHT-LaF,然后转化E.coliDH5α,以LB/AMP±平板筛选阳性重组子并测序。测序正确后转化至E.coliDH10Bac感受态细胞中,经抗性培养和蓝白斑筛选,筛选出白色菌落后,提取重组Bacmids(分别命名为rBacmid-F48F和rBacmid-LaF),经PCR鉴定正确后,将阳性重组Bacmids转染Sf9昆虫细胞。在昆虫细胞内,重组Bacmid经复制,表达,装配,形成重组杆状病毒,经SDS-PAGE和Western-blot分析,证实NDV F48E9株和La Sota株的F蛋白均获得正确表达,所表达的重组F蛋白分子量约56 kD,证明在昆虫细胞内表达并部分糖基化,具有良好的免疫原性,为表达F基因并建立适合国内应用的ELISA诊断方法奠定了基础。
- 袁萍闫丽辉冉多良刘培欣闻晓波曹殿军
- 关键词：新城疫病毒F基因重组杆状病毒
