孙春莉
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：南华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- FXR2酵母双杂交饵载体的构建及酵母菌转化被引量：1
- 2005年
- 目的构建FXR2酵母双杂交系统的“饵”质粒,并转化酵母菌,为筛选FXR2P互作蛋白作基础。方法提取pMD18-T-FXR2,酶切后将FXR2基因连接到MATCHMAKERLexATwo-HybridSystem中的plexA质粒上,得到“诱饵”(Bait)-plexA-FXR2,导入大肠杆菌扩增,筛选阳性克隆并提取重组Bait质粒,再转入酵母菌EGY48(p8op-lacZ)。结果通过遗传学方法筛选得到构建成功的plexA-FXR2;通过营养缺陷筛选,证明Bait重组质粒转入酵母菌中。结论成功构建Bait质粒并使酵母菌转化。
- 李斌元何淑雅王桂良马云孙春莉肖卫纯李洁闵凌峰彭丹妮Nanbert Zhong
- 关键词：脆性X综合征酵母双杂交
- 应用酵母双杂交体系筛选FXR1P相互作用蛋白
- 目的:应用酵母双杂交体系筛选人胎脑cDNA文库中与脆性X智力低下相关蛋白1(FXR1P)相互作用的蛋白质,进而了解FXR1P的功能,推测FXR1P与脆性X综合征发病机制的关系。 方法:(1)将FXR1基因亚克隆进酵母双...
- 孙春莉
- 关键词：酵母双杂交体系脆性X综合征
- 文献传递
- Battenin相互作用蛋白的筛选与初步鉴定被引量：3
- 2005年
- 目的寻找Battenin相互作用蛋白的筛选方法,并对筛选出的Battenin相互作用蛋白进行初步鉴定。方法将编码Battenin相互作用蛋白肽段的cDNA序列与plexA质粒的DNA结合结构域基因重组作为诱饵,应用MATCHMAKERLexA酵母双杂交系统从人胎脑cDNA文库中筛选与Battenin相互作用蛋白再发生相互作用的蛋白质的cDNA,并进行生物信息学分析。结果从胎脑cDNA文库中筛选得到7个阳性克隆,其中一个基因与人TEGT基因有99%的同源性,TEGT编码蛋白为Bax抑制子1。结论Battenin相互作用蛋白与Bax抑制子1或类似物相互作用,Bax抑制子1具有反式调控因子特性,二者都可能参与基因表达调控。
- 李斌元王桂良马云肖卫纯李洁孙春莉闵凌峰虞佳Nanbert Zhong何淑雅
- 关键词：分子生物学蛋白质相互作用酵母双杂交
- 酵母双杂交系统筛选CLN8P相互作用蛋白被引量：5
- 2006年
- 目的应用酵母双杂交系统筛选CLN8P相互作用蛋白质,通过对相互作用蛋白质的筛选及研究,探讨CLN8的功能,为CLN8和NCLs疾病群的发病机制研究提供线索,并为疾病的蛋白质相互作用网络提供资料。方法应用酵母双杂交技术,以pLexA-CLN8为诱饵质粒筛选人胎脑cDNA文库,得到Leu+LacZ+阳性克隆,进一步进行验证,并对验证后的阳性克隆的外源性片段进行测序及同源性分析。结果从人胎脑cDNA文库中筛选得到60个Leu+LacZ+阳性克隆;将获得的具有外源性片段的文库质粒与诱饵质粒一对一重新转入酵母体内对相互作用进行验证,共获得阳性克隆22个;对验证后阳性克隆测序并进行同源性分析,共获得不同的候选基因序列5个。结论应用酵母双杂交系统,共筛选得到5个不同的基因,其编码蛋白与CLN8P有相互作用,可能与NCLs发病机制相关。
- 何淑雅肖卫纯李洁李斌元孙春莉闵凌峰ZHONG Nanbert
- 关键词：酵母双杂交技术蛋白质相互作用
