宴耀明
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
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- 小鼠SIK2重组腺病毒载体在3T3-L1脂肪细胞中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的利用小鼠盐诱导基因(Salt induced kinase2,SIK2)的重组腺病毒载体,研究脂肪细胞中SIK2的表达。方法重组小鼠SIK2基因腺病毒载体经脂质体转染293A细胞,在细胞内包装获得腺病毒颗粒AdV-SIK2,并进行大量扩增和纯化。纯化的腺病毒感染成熟的3T3-L1脂肪细胞,通过real-time PCR及免疫印迹法检测鼠SIK2在3T3-L1脂肪细胞中的表达。结果纯化后的病毒滴度达0.5×1012病毒颗粒/ml。重组腺病毒载体能在成熟3T3-L1脂肪细胞中高表达鼠SIK2 mRNA和SIK2蛋白。结论重组腺病毒载体可介导外源小鼠SIK2基因在脂肪细胞的表达,建立了小鼠SIK2高表达脂肪细胞模型,为进一步研究SIK2的脂代谢功能奠定了基础。
- 杜静周钧周薇陆红宴耀明邹德学
- 关键词：腺病毒载体基因表达3T3-L1脂肪细胞
- SIK2 shRNA重组腺病毒载体构建及其在3T3-L1脂肪细胞的表达被引量：1
- 2011年
- 目的构建特异性小鼠盐诱导基因(Salt induced kinase2,SIK2)的shRNA腺病毒载体,干扰脂肪细胞中SIK2的表达。方法设计3对靶向SIK2的shRNA,插入穿梭质粒pENTR/U6载体,转染3T3-L1脂肪细胞,通过Real-timePCR方法筛选最佳沉默SIK2效果的穿梭质粒,经腺病毒同源重组后,重组小鼠SIK2shRNA腺病毒载体经脂质体转染HEK293A细胞,在细胞内包装获得腺病毒颗粒AdV-SIK2-shRNA,并进行大量扩增和纯化。纯化的腺病毒感染成熟的3T3-L1脂肪细胞,通过Real-time PCR及免疫印迹法检测鼠SIK2在3T3-L1脂肪细胞中的表达水平。结果纯化后的Ad-shRNA-SIK2重组腺病毒载体可特异下调成熟3T3-L1脂肪细胞SIK2 mRNA和SIK2蛋白的表达。结论干扰3T3-L1脂肪细胞SIK2表达的短发夹RNA重组腺病毒载体构建成功。
- 杜静杜玲宴耀明周薇陆红邹德学
- 关键词：腺病毒载体短发夹RNA3T3-L1脂肪细胞
- 阿托伐他汀对糖尿病大鼠炎性反应抑制作用被引量：5
- 2009年
- 目的研究阿托伐他汀对链脲佐菌素(STZ)诱导的I型糖尿病大鼠炎性反应的影响。方法8周龄SD雄性大鼠2次腹腔注射STZ诱发实验性I型糖尿病,以不足以产生降血脂作用的小剂量阿托伐他汀对糖尿病大鼠进行干预,检测空腹血糖、血清甘油三酯、总胆固醇、低密度和高密度脂蛋白、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C-反应蛋白(CRP)及白细胞介素1β(IL-1β)的水平,并观察主动脉壁组织中TNF-α、IL-1β、血管粘附分子-1(VCAM-1)、胞间粘附分子-1(ICAM-1)mRNA的表达。结果实验性I型糖尿病大鼠血中TNF-α、CRP、IL-1β水平分别为(2.118±0.153)μg/L、(2.857±1.032)mg/L和(0.2347±0.1264)μg/L,均高于无糖尿病大鼠对照组(P<0.05)。主动脉壁组织中的TNF-α、IL-1β、VCAM-1、ICAM-1mRNA的表达上调(P<0.05)。糖尿病大鼠阿托伐他汀干预组血中TNF-α、CRP、IL-1β水平分别为(1.602±0.145)μg/L,(2.263±0.691)mg/L和(0.1565±0.037)μg/L,均低于糖尿病大鼠对照组(P<0.05)。主动脉壁组织中的TNF-α、IL-1β、VCAM-1、ICAM-1mRNA的表达下调(P<0.05)。结论低剂量阿托伐他汀能抑制链脲佐菌素诱导的I型糖尿病大鼠炎性反应,其机制与阿托伐他汀降血脂作用无关。
- 杜静杨超陆红周薇宴耀明周钧邹德学
- 关键词：阿托伐他汀糖尿病炎性反应
