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四川部分地区猪流行性腹泻的分子流行病学调查被引量：10: 2015年; 本研究对四川猪流行性腹泻病毒(PEDV)开展了分子流行病学调查。参照毒株CV777的M基因序列,设计1对特异性引物(预期扩增大小为392bp),建立了快速检测PEDV的RT-PCR技术,对四川9个地区规模化猪场的75份仔猪腹泻病料进行检测与分析。再根据S基因的变异区域设计1对引物(扩增大小为947bp),选择扩增了四川9个地区的代表样品的S基因序列,并进行了进化与变异分析。结果显示,建立了检测PEDV的M基因的RT-PCR技术,并确定了最佳反应条件和反应体系,用该方法检测了四川75份腹泻病料,检出64份PEDV阳性,PEDV阳性检出率为86.67%,结果显示PEDV在四川地区发病季节除冬春季外,近年夏季也呈高发趋势。四川9株PEDV的S基因的核苷酸同源性为95.9%~100%,氨基酸同源性为95.1%~100%,四川毒株与14个国内外参考毒株的核苷酸同源性和氨基酸同源性分别为84.6%~99.5%和84.2%~99.5%;四川流行毒株的S基因(S蛋白)存在碱基(氨基酸)缺失和插入现象。结果表明,本研究从分子流行病学角度证实了四川部分地区PEDV的流行与变异情况,为指导该地区PEDV科学防控提供了依据。; 阳酉萍黄小波曹三杰文心田梁恩涛张丹张小会段素芬朱书全文翼平伍锐; 关键词：猪流行性腹泻 M基因 RT-PCR M基因分子流行病学

壳寡糖对环磷酰胺应激仔猪生产性能和免疫功能的影响被引量：7: 2013年; 本试验旨在探讨饲粮添加壳寡糖（COS）对环磷酰胺（CY）所致仔猪免疫抑制是否具有缓解作用。试验采用2×2因子设计，主效应分别为COS水平（0或30mg／kg），应激处理（注射CY或生理盐水）及二者互作。20头34日龄DLY仔猪随机分为4个处理，试验期18d。第15～17天，应激组仔猪腹腔注射CY50mg／kgBW，其余注射等量生理盐水。结果表明：CY显著降低应激后仔猪日增重和日采食量（P〈0．05），日粮添加COS显著提高仔猪全期日增重，使料肉比显著降低（P〈0．05）；注射CY显著降低了仔猪的脾脏指数（P〈0．05），应激3h和48h后中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞及白细胞数目（P〈0．05），应激3h后血清IL-1β、IL-10及应激48h后TNF-α、IFN-γ的含量（P〈0．05），显著提高了应激后48h皮质醇的含量（P〈0．05）；日粮添加COS显著缓解CY对应激3h后单核细胞数目及应激48h后TNF-α含量的抑制。结果表明，连续3dCY注射导致仔猪出现免疫抑制，饲粮添加COS在-定程度上可以缓解CY引起的免疫抑制。; 张玲陈代文杨继文张丹高亿清毛湘冰郑萍田刚余冰; 关键词：壳寡糖环磷酰胺免疫抑制仔猪

干酪乳杆菌与银杏叶提取物对肥胖小鼠血脂及抗氧化功能的影响被引量：25: 2014年; 【目的】研究干酪乳杆菌与银杏叶提取物协同的降血脂及抗氧化作用。【方法】将体质量为(20±1.0)g/只的60只健康雌性小鼠随机分成5组,即空白对照组、高脂对照组、干酪乳杆菌组、银杏叶提取物组及干酪乳杆菌与银杏叶提取物混合组,除空白对照组外,其余4组均给予高脂饲料,建立肥胖模型,试验期为30d。试验结束后测定各组小鼠体质量,血清中的总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙二醛(MDA)浓度及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)等的活性。【结果】干酪乳杆菌与银杏叶提取物协同作用,能明显降低肥胖小鼠体质量、TC、TG和MDA,与高脂对照组相比,小鼠体质量降低13.22%,TC和TG降解率分别达到24.48%和20.93%,差异极显著(P<0.01);小鼠血清中HDL-C增加167.85%,差异极显著(P<0.01);小鼠血清中GSH-Px活性提高了13.14%(P<0.05),CAT活性降低了49.01%(P<0.01)。【结论】干酪乳杆菌与银杏叶提取物协同使用,具有控制小鼠体质量、降血脂、促进胆固醇代谢的作用,可用于预防和治疗高脂血症。; 温啸贺大方倪学勤张丹丁艳东辛金鸽李利杰曾东; 关键词：干酪乳杆菌银杏叶提取物降血脂抗氧化

携带猪流行性腹泻病毒S基因的减毒鼠伤寒沙门菌的构建与鉴定被引量：5: 2014年; 为构建可有效抵抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)入侵的诱导黏膜免疫反应的核酸疫苗,采用RTPCR方法扩增了PEDV SC-L株的S基因主要抗原编码区域(简称S1),插入pMD19-T载体,构建载体pMD19-T-S1,再将S1基因片段插入双启动子真核表达载体pVAXD中,构建了pVAXD-S1表达载体。经免疫荧光法鉴定S1基因可在COS-7细胞中正常表达后,将pVAXD-S1电转入减毒鼠伤寒沙门菌SL7207中,构建了携带S1基因的重组减毒沙门菌SL7207(pVAXD-S1),并对该重组菌株的生长曲线、携带质粒的稳定性、口服小鼠的安全性及目的基因在体内转录等特性进行了鉴定。结果显示,SL7207(pVAXD-S1)在含卡那霉素(100μg/mL)的培养环境中稳定性良好,以每只1×109 CFU口服免疫BALB/c小鼠具有良好的安全性,携带的S1基因能在小鼠回肠末端组织内正常转录及表达。本研究为深入开展减毒沙门菌疫苗菌株SL7207(pVAXD-S1)的免疫评价及构建PEDV与其他抗原基因联合免疫DNA疫苗奠定了基础。; 梁恩涛廖晓丹黄小波文心田曹三杰阳酉萍段素芬张丹张小会; 关键词：猪流行性腹泻病毒 S基因

减毒沙门氏菌投递的TGEVS基因疫苗口服免疫猪的动态规律被引量：2: 2016年; 目的研究TGEV S基因疫苗SL7207(PVAXD-TS)口服免疫仔猪后的动态免疫诱导规律。方法将口服疫苗SL7207(PVAXD-TS)、空载体菌株SL7207(PVAXD)以1.6×1011 CFU/头的剂量口服接种20日龄仔猪,以PBS为空白对照,2周后以2.0×1011 CFU的剂量加强免疫。分别测定0、2、4、6和8周的血清IgG、IgA、TGEV中和抗体、细胞免疫反应IL-4、IFN-γ、外周血淋巴细胞增殖情况。结果仔猪口服免疫后第4周即可检测抗TGEV的特异性IgG和粪黏液IgA抗体;在免疫后第6周IgA、IgG、IL-4、IFN-γ抗体和外周血T淋巴细胞增殖与SL7207(PVAXD)、PBS间均存在统计学差异(P<0.01),并在第6周达到最高值;中和实验显示该疫苗诱导的血清IgG具有中和活性。结论证实以减毒沙门菌为载体的TGEV S基因疫苗口服免疫仔猪有较好的免疫原性。; 张小会张丹梁恩涛余敏黄小波曹三杰文心田文翼平伍锐; 关键词：猪传染性胃肠炎减毒沙门氏菌 S基因

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张丹