张建峰
- 作品数：10 被引量：29H指数：3
- 供职机构：南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- rcIGF-Ⅰ对鸡胚额骨成骨细胞骨相关基因mRNA表达的影响被引量：3
- 2006年
- 目的在成功培养、纯化体外鸡胚额骨成骨细胞的基础上,探讨不同剂量重组鸡IGFⅠ(rcIGFⅠ)对成骨细胞骨相关基因(COLⅠ、OPG、IGFⅠR)表达的影响。方法应用酶消化法(0.1%Ⅱ型胶原酶)获取鸡胚额骨成骨细胞群并鉴定。取培养2d的2代成骨细胞,在rcIGFⅠ为0ngml、50ngml、100ngml的浓度中进行培养,采用RTPCR方法检测基因COLⅠ、OPG、IGFⅠR的相对表达情况,并用βactin作为内参照予以矫正。结果rcIGFⅠ可以在转录水平上增加鸡胚额骨成骨细胞骨相关基因的表达,并呈明显的剂量依赖关系。结论IGFⅠ促进成骨细胞的增殖、分化的作用可能是通过增加骨相关基因的表达水平来实现的。
- 张建峰侯加法张皎姚静
- 关键词：成骨细胞基因表达
- 鸡IGF-Ⅰ对成骨细胞功能的影响及其基因多态性与蛋鸡骨代谢相关性的研究
- 笼养蛋鸡骨质疏松症是以全身渐进性结构骨丢失及骨脆性增加和易于发生骨折为特征的一种严重骨骼性疾病。笼养、营养、遗传、内分泌等对本病的发生均有一定的作用，但其确切作用机制仍不明了。鉴于IGF-Ⅰ是骨骼中最丰富的生长因子、并对...
- 张建峰
- 关键词：成骨细胞限制性片段长度多态性原核表达
- 鸡类胰岛素生长因子Ⅰ的克隆、表达及其表达产物的生物学活性研究
- 本文根据GenBank上发表的鸡(Gallus)类胰岛素生长因子-Ⅰ(Insulin like growth factor Ⅰ,IGF-Ⅰ)基因序列(M32791),设计二对引物,采用RT-PCR及亚克隆方法从雏鸡肝脏总...
- 张建峰张皎姚静侯加法
- 关键词：生物学活性基因克隆
- 文献传递
- 鸡胚破骨细胞的分离培养与鉴定
- ＜正＞目的:从18日龄鸡胚长骨（股骨和胫骨）中机械分离破骨细胞于盖玻片和骨片上进行培养,以建立鸡胚破骨细胞体外培养方法。方法:结合倒置相差显微镜、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色、甲苯胺蓝染色及透射电镜（TEM）和扫描...
- 姚静钱存忠张皎张建峰侯加法
- 关键词：鸡胚破骨细胞
- 文献传递
- 白来航笼养蛋鸡胰岛素样生长因子Ⅰ限制性片断多态性与骨质疏松症
- 2007年
- 目的:了解白来航笼养蛋鸡胰岛素样生长因子Ⅰ限制性片断多态性与骨质疏松症的关系。方法:实验于2006-01/04在南京农业大学畜禽骨骼研究实验室完成。随机选取83周龄白来航蛋鸡180羽,应用PCR扩增鸡胰岛素样生长因子Ⅰ启动子上游7kb处基因片断,用PstⅠ限制性内切酶消化产生限制性片断长度多态性,分析胰岛素样生长因子Ⅰ多态性与胫骨、股骨、肱骨骨放射密度及其皮质骨厚度、髓质骨和小梁骨体积、体质量、骨代谢标志物(钙、磷、骨钙素及碱性磷酸酶)、雌二醇等的关系。结果:180羽蛋鸡PP、Pp、pp基因型频率分别为0.0389、0.35、0.611,P、p等位基因频率分别为0.214、0.786。方差分析(ANOVA)显示,pp基因型肱骨骨放射密度及皮质骨厚度显著大于Pp、PP基因型(P<0.05)、pp基因型的胫骨皮质骨厚度极显著大于PP基因型(P<0.01),pp基因型胫骨骨骺骨小梁体积极显著大于Pp、PP基因型(P<0.01)。结论:白来航笼养蛋鸡胰岛素样生长因子Ⅰp等位基因具有一定的骨质指针作用,pp基因型蛋鸡呈现骨质强的优势,提示从分子水平探讨骨质丢失以及对骨质疏松症的基因诊断和抗性基因选育具有一定的意义。
- 王艳张建峰金星芳侯加法
- 关键词：白来航鸡骨质
- 鸡类胰岛素生长因子Ⅰ的克隆、表达及其表达产物的生物学活性研究被引量：11
- 2005年
- 应用RT-PCR方法对雏鸡肝脏总RNA中鸡类胰岛素生长因子Ⅰ基因cDNA进行扩增,然后将特异性片段连接到pMD18-T载体,测序结果表明,与已知序列同源性为100%。然后将特异性片段连在pRLC载体上进行表达,经Tricine-SDS-PAGE分析,原核表达产物为7.6kD的重组蛋白,占菌体总蛋白的23%,Western印迹表明重组蛋白具有IGF-Ⅰ抗原活性。表达产物以包涵体形式存在,经7mol·L-1盐酸胍的变性液溶解及0.5mol·L-1精氨酸复性液处理,表达产物随后进行脱盐、凝胶层析纯化、MTT法分析其对NIH3T3和鸡胚成骨细胞的增殖效应,结果表明重组鸡IGF-Ⅰ具有较高的生物学活性。
- 张建峰侯加法张皎姚静
- 关键词：MTT法活性研究中鸡SDS-PAGE分析
- GH、IGF-1对骨代谢调节的研究进展被引量：3
- 2004年
- 骨最主要的功能是构成机体的支架,起保护、支持、运动以及维持动物基本形态等作用.体内绝大部分的钙是以骨盐形式沉积在骨组织内,故骨组织是动物体最大的"钙库".骨是一种活器官,不断进行着生长和再生,最充分地完成其支持和保护功能,维护骨代谢平衡和机体内环境的稳定.骨代谢的调节是个复杂严密的过程,受多种因素制约和调节.人体内调节血钙和钙离子水平的三大器官是肠、骨和肾.许多调节骨代谢的调节激素也是通过这三大器官发挥作用.激素对骨代谢的调节作用十分重要.其中生长激素(GH)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)作用十分关键.
- 周振雷张建峰姚静侯加法
- 关键词：骨代谢骨组织GH机体内环境
- 鸡类胰岛素生长因子Ⅰ的克隆、表达及其表达产物的生物学活性研究
- 根据GenBank上发表的鸡(Gallus)类胰岛素生长因子-Ⅰ(Insulin like growth factor Ⅰ,IGF-Ⅰ)基因序列(M32791),设计二对引物,采用RT-PCR及亚克隆方法从雏鸡肝脏总RN...
- 张建峰张皎姚静侯加法
- 文献传递
- 淮阴农村沼气综合利用模式与技术及策略研究
- 淮阴地处北亚热带和暖温带交界区,属暖温带半温润季风气候,土地肥沃,养分充足,同时是农业大区,现有耕地面积97万亩,蔬菜种植面积23万亩,生猪,肉牛、奶牛、羊、肉鸽等养殖日趋规模化发展,沼气原料丰富;本文采用试验和沼气户调...
- 张建峰
- 关键词：农村沼气新农村建设地理环境
- 文献传递
- 鸡胚破骨细胞的分离培养与鉴定被引量：8
- 2005年
- 从18日龄鸡胚长骨(股骨和胫骨)中机械分离破骨细胞于盖玻片和骨片上培养,以建立鸡胚破骨细胞体外培养方法。结合倒置相差显微镜、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、甲苯胺蓝染色及透射电镜(TEM)和扫描电镜(SEM)对其形态和功能进行观察鉴定。结果表明,直接分离的细胞具有典型的破骨细胞的形态特点:属多核大细胞,TRAP染色阳性,能在骨片表面形成吸收陷窝。结论:鸡胚长骨机械分离法可获得一定数量并具有骨吸收活性的破骨细胞。
- 姚静钱存忠张皎张建峰侯加法
- 关键词：鸡胚破骨细胞
