公共文化服务平台

共 4 条记录，以下是 1-4

全选清除导出

排序方式：

人趋化因子受体CCR5胞外片段的融合表达与纯化被引量：1: 2009年; 目的对人趋化因子受体CCR5的N端胞外部分与第二个胞外环(extracellular loop-2,ECL-2)进行融合表达与纯化。方法分别扩增人趋化因子受体CCR5的胞外N-端部分与ECL-2部分相应的编码序列,通过重叠延伸拼接(Splicing byoverlapping extension,SOE)PCR实现两片段DNA的拼接后(命名为CCR5-N-E2)克隆入质粒pBlueScript M13中,同时构建原核表达载体pET-21b(+)-CCR5-N-E2,转入表达菌株BL21(DE3),IPTG诱导表达重组蛋白CCR5-N-E2,表达产物通过蛋白免疫印迹进行鉴定,并采用金属螯合层析法对重组表达产物进行纯化。结果经测序,构建的重组原核表达载体与预期完全一致,相对分子质量为8 500的目的蛋白在BL21(DE3)菌株中得到高效表达,表达量约占总蛋白的50%,表达产物以包涵体形式存在。蛋白免疫印迹实验表明该重组蛋白与抗CCR5 N-端序列的单克隆抗体发生特异性结合。通过Ni2+亲和层析,目的蛋白的纯度可达95%以上。结论实现CCR5-N-E2编码序列的拼接、融合蛋白的表达以及纯化,为广泛筛选以CCR5为靶点的临床治疗药物奠定了基础。; 李海黎晓天彭宇吴文言; 关键词：原核表达纯化

凋亡抑制因子Survivin的克隆、高效表达与纯化被引量：1: 2007年; Survivin蛋白抑制细胞的凋亡并参与调控细胞的分裂,在绝大多数肿瘤细胞中均有过量表达。本实验以人肝癌细胞系MHCC-97L总RNA为模板,应用RT-PCR的方法得到survivinc DNA,并构建了重组原核表达载体pET-21b(+)-survivin,导入BL21(DE3)菌株进行表达,表达产物以包涵体形式存在,表达量超过总蛋白的60%。Western blot结果表明表达产物与抗人survivin抗体发生特异性反应,经凝胶过滤层析后纯度达到95%以上,为进一步研究靶向Survivin的诊断试剂与抑制剂奠定了基础。; 李海彭宇黎晓天吴文言; 关键词：SURVIVIN 克隆原核表达纯化

广州增城市正果畲族村风景区生态旅游规划研究: 本文较为系统地回顾了国内外关于生态旅游的理论及其规划设计实践，通过对生态旅游和一般旅游的对比分析，归纳了生态旅游的概念、特征和规划设计方法。在“广州增城正果畲族村风景区生态旅游总体规划”课题研究的基础上，进一步对生态旅游...; 彭宇; 关键词：生态旅游 SWOT分析; 文献传递

麝香活性肽sx15的串联子基因的表达及从噬菌体抗体库中筛选ccr5的抗体: 本文的研究对象sx15是经过本室前期工作确定下来具有开发成抗炎新药潜力的15肽，为了解决sx15的基因工程表达难题，我们根据sx15肽自身序列的特点，形成串联子的结构，各单体之间恰好是胰蛋白酶的酶切位点(lys—ser)...; 彭宇; 关键词：基因工程噬菌体抗体库麝香; 文献传递网络资源链接

全选清除导出

共1页<1>

彭宇