徐从贞
- 作品数：22 被引量：84H指数：5
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- 发文基金：安徽省自然科学基金国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- A、B血型单克隆抗体临床应用的研究
- 1995年
- 为了探索人血型分型试剂工业化生产的可能性，应用人Ａ、Ｂ血型单克隆抗体，进行了抗体特性及临床血型分型的研究。经血凝特性试验，测得Ｄ２８６－Ｅ１２单克隆抗体仅对Ａ血型特异，６－１－Ｇ１１单克隆抗体仅对Ｂ血型特异。由盐水试管法测得它们的血凝滴度均为１：５１２。以血库常规人抗Ａ、抗Ｂ血清为标准对照，采用盐水试管法，对３７０４例血液样品进行了临床血型分型试验。结果显示，Ａ、Ｂ血型单克隆抗体分型试剂与标准人血清１００％相符。证明：Ｄ２８６－Ｅ１２和６－１－Ｇ１１两株杂交瘤分泌的Ａ、Ｂ血型单克隆抗体可作为非常优越的血型分型试剂。具有工业化生产血型单克隆抗体的潜力。
- 袁凌云徐从贞陈华堂王晓琴
- 关键词：单克隆抗体
- 初乳中酶活性及生物活性因子含量的动态变化及其意义被引量：15
- 2004年
- 目的 探讨人初乳中超氧化物歧化酶 (SOD)、淀粉酶 (AM)和碱性磷酸酶 (ALP)活性及表皮生长因子 (EGF)和胰岛素样生长因子 1(IGF 1)含量的变化规律及其临床意义。方法 分别采用改良邻苯三酚自氧化法、碘 淀粉比色法和磷酸苯二钠法 ,测定 2 0例产妇的 118份初乳 (泌乳第 1～ 7天 )中SOD、AM和ALP活性 ;采用放射免疫法测定EGF和IGF 1含量。结果 初乳中SOD活性在开始泌乳的前 1～ 4天由 (18 7± 2 2 )kU/L上升到 (2 2 5± 2 9)kU/L ,然后下降 ,第 7天为 (11 2± 2 1)kU/L ,前 4天活性显著高于第 7天 (P <0 0 5或P <0 0 1)。AM和ALP活性在开始泌乳的 1周内逐渐下降 ,分别由 (15 5± 12 )kU/L和 (10 5± 17)kU/L ,下降到 (17± 4 )kU/L和 (5 4± 9)kU/L ,前 4天的AM活性显著高于第 7天 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,第 1天的ALP活性显著高于第 7天 (P <0 0 5 )。初乳中EGF和IGF 1含量在开始泌乳的前 4天快速下降 ,分别由 (10 5± 11) μg/L和(2 5 9± 2 7) μg/L下降到 (40± 5 )μg/L和 (5 6± 1 3) μg/L ,在泌乳的第 4～ 7天变化较小。泌乳前 3天 ,EGF含量显著高于第 7天 (P<0 0 5或P <0 0 1) ,第 1天的IGF 1含量显著高于第 7天 (P <0 0 1)。结论初乳中具有高活性的SOD、AM和ALP 。
- 秦宜德罗欣黄登莲徐从贞
- 关键词：初乳超氧化物歧化酶淀粉酶类碱性磷酸酶
- 人白细胞介素21在真核细胞中表达及其体外促T细胞增殖作用被引量：1
- 2005年
- 目的 :构建人细胞因子IL 2 1表达载体并在Hela细胞中稳定表达 ,分析rhIL 2 1体外促T细胞增殖作用。方法 :以已构建的pMD IL2 1为模板 ,PCR扩增成熟IL 2 1cDNA的编码框序列并构建到真核表达载体pCDNA3 1/hismyc B中。挑出阳性克隆进行扩增 ,脂质体转染入Hela细胞中并以G4 18加压筛选。有限稀释法、RT PCR及Westernblot筛选出稳定表达的细胞株。培养上清液经金属离子螯合层析分离纯化后 ,SDS PAGE、Westernblot鉴定。MTT法测定其与抗CD3单克隆抗体共刺激T细胞增殖活性。结果 :SDS PAGE、Westernblot显示Mr为 180 0 0的带有myc重组人IL 2 1融合蛋白 (rhIL 2 1) ;并成功地获得hIL 2 1稳定表达细胞株。rhIL 2 1融合蛋白具有与抗CD3抗体共刺激T细胞增殖作用。结论 :获得具有生物学活性的rhIL 2 1细胞因子 ,为进一步研究其功能奠定基础。
- 张胜权陈兵罗欣徐从贞鲁云霞
- 关键词：白细胞介素21克隆表达T细胞增殖
- 生物技术专业分子生物学教学初探被引量：13
- 2005年
- 张胜权罗欣陈兵徐从贞鲁云霞
- 关键词：生物技术专业分子生物学教学方法互动式教学
- N-乙酰半胱氨酸体外下调IL-8、IL-6及TNFα在PBMC中的表达被引量：4
- 2005年
- 目的 研究N 乙酰半胱氨酸(NAC)体外对白细胞介素 8(IL 8)、白细胞介素 6(IL 6 )及肿瘤坏死因子α(TNFα)在外周血单核细胞 (PBMC)中表达的影响。方法 分离新鲜外周血PBMC,以PMA、A23187刺激PBMC,同时加入不同浓度的NAC,通过ELISA、RT PCR方法分别测定培养上清IL 8、IL 6及TNFα水平及细胞中相应mRNA水平。结果 通过PMA、A23187刺激的PBMC培养上清中的IL 8、IL 6及TNFα水平及细胞中的mRNA水平显著升高(P<0 01)。加入NAC(0、3、10、20mmol/L) 3h细胞中IL 8、IL 6及TNFα的mRNA水平显著降低(P<0 01)。24h后培养上清中IL 8、IL 6及TNFα水平明显低于PMA及A23187刺激的上清(P<0 01);且具有剂量依赖关系 (P<0 01 )。结论 NAC体外可以下调PMA、A23187刺激PBMC表达IL 8、IL 6及TNFα。
- 张胜权罗欣陈兵徐从贞鲁云霞张在和
- 关键词：乙酰半胱氨酸白细胞介素8
- pcDNA3.1/hVEGF165的构建及其在COS-7细胞中的表达被引量：1
- 2005年
- 目的 克隆人血管内皮生长因子基因VEGF165片段,构建pcDNA3·1 /hVEGF165,观察其在COS 7细胞中的表达,为基因治疗缺血性心脏病奠定基础。方法 从胎儿心肌组织中提取总RNA,应用RT PCR方法获得hVEGF165基因,将其重组入T载体,PCR法鉴定并测序,双酶切后克隆入真核表达载体pcDNA3 1 /myc his B中,构建pcDNA3 1 /hVEGF165重组体。用脂质体介导将其转染COS 7细胞,WesternBlotting方法检测rhVEGF165的表达蛋白。结果 RT PCR方法从胎儿心肌组织获得正确的hVEGF165基因序列,成功构建pcDNA3·1 /hVEGF165且实现转染COS 7细胞的瞬时表达。结论 该实验构建的pcDNA3· 1 /hVEGF165转染真核细胞COS 7能够表达rhVEGF蛋白。
- 周正春陈兵张胜权罗欣徐从贞汪思应葛建军
- 关键词：血管内皮生长因子类基因表达
- A血型单克隆抗体的抗原结合部位结构多样性研究
- 1996年
- 应用杂交瘤技术，以Ａ型红细胞，Ａ１血型物质ＭＳＭ（Ａ１）和Ａ－ＲＢＣ＋ＭＳＭ（Ａ１）为免疫原，制备了一组抗人Ａ血型单克隆抗体：Ａ１２１８，Ｂ５７，ＤＥ９２３－Ｇ８，Ｄ２８６－Ｅ１２经Ｔａｋａｔｓｙ微量血细胞凝集试验证明：这组单抗仅能凝集Ａ１，Ａ２及ＡＢ型红细胞，不能凝集Ｂ，Ｏ型红细胞．采用ＥＬＩＳＡ定量抑制试验法，精确测定了它们抗原结合部位的结构，互补于Ａ活性寡糖。Ａ１２１８互补于具有双岩藻糖结构的Ａ活性五糖（Ａ－Ｐｅｎｔａ）；Ｂ５７，ＤＥ９２３－Ｇ８互补于具有单岩藻糖结构的Ａ活性六糖（Ａ－Ｈｅｘａ）；而Ｄ２８６－Ｅ１２则互补于具有单岩藻糖的Ａ活性四糖（Ａ－Ｔｅｔｒａ）．结果表明：血凝特异性相同的抗Ａ单抗，其抗原结合部位的结构可呈现多样性。即Ａ活性寡糖的糖基组成数目和含有岩藻糖数目均可不相同，各种抑制剂对不同单抗的抑制作用强弱也不相同。
- 袁凌云徐从贞陈华堂王晓琴
- 关键词：单克隆抗体
- 医学院校生化教学面临的问题和改革的探讨被引量：1
- 2003年
- 生物化学是医学院校重要的基础课 ,也是当代医学和生物学中的前沿学科。然而医学院校的生化教学面临许多问题和挑战。本文论述了医学院校生物化学教学面临的五个问题 。
- 秦宜德徐从贞方敏张胜权陈兵
- 关键词：医学院校生化教学
- 抗B血型物质单克隆抗体的研制及其免疫学特性的研究被引量：15
- 1990年
- 应用杂交瘤技术,分别以人B血型红细胞,B血型红细胞加纯化的B血型物质和B血型物质为抗原,采用不同免疫程序免疫BALB/C小鼠,从6次细胞融合中筛选建立起3株分泌高滴度,高特异性抗人B血型物质单克隆抗体的杂交瘤细胞株:3—3—D_9(IgG_1),3—5—D_(12)(IgG_1)和6—1—G_(11)(IgA),用Takatsy微量血凝滴定法测得它们的96孔板组织培养上清液的血凝滴度分别为4096,4096和16384。经过凝血特异性试验,凝血抑制试验以及抗体稀释试验等广泛免疫化学研究证明这些单克隆抗体仅对人B型血特异。杂交瘤细胞在液氮中贮存数月,分泌抗体能力不变。抗体经56℃保温30minA-20℃和37℃反复冻融试验凝血活性保持稳定。这些单克隆抗体为进一步研究B血型抗体结合部位结构的多样性提供了条件,并且使在临床血液分型试验时用单克隆抗体替代人多克隆抗血清成为可能。
- 陈华堂王晓琴袁凌云徐从贞姚立人王维利
- 关键词：单克隆抗体免疫学
- 人白细胞介素-29cDNA克隆及其在大肠杆菌系统的表达
- 2005年
- 目的:克隆人细胞因子IL-29全长cDNA及其在大肠杆菌中表达,制备抗IL-29多克隆抗体。方法:分离外周血单核细胞;vsv感染后,提取总RNA,通过一步RT-PCR获得IL-29全长cDNA。DNA测序正确后,将IL-29cDNA的编码框序列构建到原核表达载体pET28a(+)中。卡那霉素平板筛选及PCR鉴定,挑出阳性克隆进行扩增、转化大肠杆菌进行IPTG诱导表达。SDS-PAGE、Westernblotting鉴定,亲和层析分离纯化得到Mr为23000组氨酸标签重组人IL-29融合蛋白。纯化的IL-29免疫家兔制备抗IL-29多克隆抗体。结果:成功获得人IL-29全长cDNA,并以包涵体形式表达于大肠杆菌中。免疫家兔后获得特异抗IL-29的多克隆抗体。结论:获得rhIL-29细胞因子及其多克隆抗体,为其进一步研究及应用奠定基础。
- 张胜权鲁云霞罗欣徐从贞陈兵
- 关键词：重组人IL-2感染后外周血单核细胞全长CDNA阳性克隆CDNA克隆
