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N-乙酰半胱氨酸体外抗乙肝病毒作用被引量：2: 2004年; 目的 :探讨NAC体外抗乙肝病毒活性及其机制。方法 :体外以转染了乙肝病毒的HepG2 2 2 15细胞株作为实验对象 ,培养细胞中加入不同浓度的NAC( 0 ,3 ,10 ,3 0mmol/L)。用酶联免疫吸附法 (ELISA )测定培养上清液中的乙肝表面抗原 (HBsAg)、e抗原 (HBeAg)。半定量PCR测定细胞内及培养上清液中的HBVDNA的变化 ,RT PCR分析细胞内HBV表面抗原mRNA的变化。结果 :NAC对HBsAg、HBeAg均有抑制作用 ,但NAC对HBsAg的抑制较HBeAg强 ,抑制率达 90 %左右。且抑制作用具有剂量和时间依赖性。半定量PCR结果显示细胞内的HBVDNA含量随着NAC浓度的增加而升高 ,而培养上清中的HBVDNA的含量降低。RT PCR结果表明细胞内HBsAgmRNA没有显著变化。结论 :NAC体外具有抗HBV活性 ,其抑制作用发生在转录后水平。; 张胜权罗欣陈兵徐从贞李宗寅张在和; 关键词：体外抗乙肝病毒 N-乙酰半胱氨酸毒作用 RT-PCR分析

RBP4分子RNAi载体的制备及对人肝细胞系LO2中ERK信号通路的影响: 2012年; 目的制备人视黄醇结合蛋白4(RBP4)分子RNAi载体,检测其干涉人肝细胞系LO2中RBP4的表达后对ERK1/2表达及磷酸化和葡萄糖摄取的影响。方法分别构建针对RBP4基因表达框5'端和3'端的干涉载体及真核表达载体,经测序和酶切鉴定后将载体转染LO2,RT-PCR和Western blot法确定其干涉RBP4表达的效率,选择干涉较高的载体用于后续实验;Western blot检测ERK1/2的表达及磷酸化水平的改变,葡萄糖氧化酶法检测上清液中葡萄糖的残留量。结果构建的真核表达载体和干涉载体经酶切、测序鉴定结果正确,并有明显的高表达或干涉效果。Western blot结果表明ERK1/2的表达量无明显变化,RBP4高表达组其磷酸化显著下降,RBP4干涉组其磷酸化显著上升。胰岛素刺激后RBP4高表达组的葡萄糖摄取明显下降,RBP4干涉组的葡萄糖摄取明显增加。结论成功制备RBP4基因的干涉载体并应用于LO2细胞中ERK1/2通路的研究,为后续RBP4的进一步功能研究奠定基础。; 陈冠军陈利春钱磊陈莉陈兵鲁云霞; 关键词：视黄醇结合蛋白4 RNA干涉葡萄糖摄取

卡维地洛对人外周血单个核细胞CD25表达的影响: 2005年; 目的　研究新型β受体阻滞剂卡维地洛(Car)对单个核细胞表达CD25的影响。方法　分离外周血单个核细胞(PBMC),以PMA+A23187作为刺激剂,分组体外培养。用MTT方法检测PBMC的活性;用流式细胞仪检测单个核细胞的凋亡率和CD25的表达水平。结果　(1) 20μmol以内的Car对PBMC没有毒性; (2)Car能显著抑制PBMC表达CD25, 24h时,浓度3组为(8. 23±267)%,与对照组(30. 73±4. 10)%比较,差异有显著性(P<0. 01)。结论　Car可以抑制PBMC表达CD25。这可能是卡维地洛治疗慢性心衰的机制之一。; 王昌会徐岩张胜权陈兵翟志敏; 关键词：卡维地洛外周血单个核细胞 CD25 慢性心力衰竭

人白细胞介素-21cDNA克隆及其在大肠杆菌系统的表达被引量：4: 2004年; 目的 :克隆人细胞因子IL 2 1全长cDNA及其在大肠杆菌中表达 ,并进一步检测其表达产物的功能。方法 :抽取外周血 ,分离淋巴细胞 ;抗CD3抗体刺激后 ,提取总RNA ,通过RT PCR获得两个部分重叠的IL 2 1cDNA片段 (分别为 5′端 2 4 2bp ,3′端 4 2 5bp) ,重组PCR扩增出IL 2 1全长cDNA。DNA测序正确后 ,将成熟IL 2 1cDNA的编码框序列构建到原核表达载体pET2 8a(+)中。卡那霉素平板筛选及PCR鉴定 ,挑出阳性克隆进行扩增、转化大肠杆菌进行IPTG诱导表达。SDS PAGE、Westernblotting鉴定 ,亲和层析分离纯化得到Mr 为 186 0 0的带有组氨酸标签重组人IL 2 1融合蛋白。透析法重折叠复性 ,MTT法测定其对T细胞增殖活性。结果 :成功获得人IL 2 1全长cDNA ,并以包涵体形式表达于大肠杆菌中。重折叠后的rhIL 2 1融合蛋白具有与抗CD3抗体共刺激T细胞增殖作用。结论 :获得具有生物学活性的rhIL 2 1细胞因子 ,为进一步研究其功能奠定基础。; 张胜权陈兵罗欣徐从贞; 关键词：克隆包涵体重折叠 T细胞增殖

CD44v6在胃癌、癌前病变及癌旁组织中的表达及其临床意义: 研究目的：　　胃癌在我国各种恶性肿瘤中居首位,其发病率呈逐年上升趋势,如何能够提高胃癌的早期诊断及改善预后仍是胃癌诊断治疗中非常棘手的问题。本研究旨在探讨细胞黏附分子CD44v6在不同胃组织中的表达及其临床意义,为胃癌的...; 陈兵; 关键词：CD44V6蛋白胃癌癌前病变癌旁组织; 文献传递

扬子鳄肌肉组织蛋白水解液的制备: 2002年; 摸索得到酶法水解扬子鳄肌肉组织的最佳条件,即以扬子鳄肌肉为原料,充分匀浆后高压蒸煮,调pH至8.5,胰蛋白酶和木瓜蛋白酶2:1一次性加入,37℃10～12h后活性碳脱色得到淡黄色蛋白水解液,其蛋白质利用率为52%。; 鲁云霞陈兵杨敏张在和; 关键词：扬子鳄肌肉组织胰蛋白酶木瓜蛋白酶蛋白水解液营养价值

重组人乙酰胆碱受体a亚基1-210诱导实验性重症肌无力模型: 目的:重症肌无力(MG)是一种主要累及神经肌肉接头突触后膜乙酰胆碱受体,由乙酰胆碱受体抗体(AchR- ab)介导的自身免疫性疾病,致残率高,严重危害人类健康,寻找有效手段治疗一直是研究者努力的方向。实验性重症肌无力(E...; 许文华许功林陈兵鲁云霞任明山; 文献传递

人白细胞介素21在真核细胞中表达及其体外促T细胞增殖作用被引量：1: 2005年; 目的 :构建人细胞因子IL 2 1表达载体并在Hela细胞中稳定表达 ,分析rhIL 2 1体外促T细胞增殖作用。方法 :以已构建的pMD IL2 1为模板 ,PCR扩增成熟IL 2 1cDNA的编码框序列并构建到真核表达载体pCDNA3 1/hismyc B中。挑出阳性克隆进行扩增 ,脂质体转染入Hela细胞中并以G4 18加压筛选。有限稀释法、RT PCR及Westernblot筛选出稳定表达的细胞株。培养上清液经金属离子螯合层析分离纯化后 ,SDS PAGE、Westernblot鉴定。MTT法测定其与抗CD3单克隆抗体共刺激T细胞增殖活性。结果 :SDS PAGE、Westernblot显示Mr为 180 0 0的带有myc重组人IL 2 1融合蛋白 (rhIL 2 1) ;并成功地获得hIL 2 1稳定表达细胞株。rhIL 2 1融合蛋白具有与抗CD3抗体共刺激T细胞增殖作用。结论 :获得具有生物学活性的rhIL 2 1细胞因子 ,为进一步研究其功能奠定基础。; 张胜权陈兵罗欣徐从贞鲁云霞; 关键词：白细胞介素21 克隆表达 T细胞增殖

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陈兵