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羊流产衣原体的分离鉴定及间接免疫荧光法检测被引量：3: 2015年; 对收集的疑似衣原体感染的羊流产胎儿样本接种鸡胚卵黄囊进行分离培养,通过PCR-RFLP(限制性片段长度多态性分析)方法鉴定为流产衣原体。将收集到的流产衣原体阳性样本接种Hela229细胞,应用基于流产衣原体MOMP单克隆抗体的间接免疫荧光法,在Hela229细胞浆内可见呈绿色荧光的衣原体包涵体,进一步在病原学水平上确定发生在甘肃省肃南县羊流产的病原为流产衣原体。; 赵荣李兆才曹小安周继章; 关键词：流产衣原体 PCR-RFLP 间接免疫荧光法

猪瘟间接血凝检测试剂盒及制备方法: 本发明涉及一种重组蛋白制备方法及用这种蛋白制备猪瘟间接血凝检测试剂盒及方法。其蛋白制备方法是从猪瘟病毒(CSFV)基因的保守区中选取一段与牛病毒性腹泻－粘膜病病毒(BVDV)基因同源性低于35％对应氨基酸为A1的核苷酸序...; 郑福英邱昌庆蔺国珍周继章曹小安宫晓炜; 文献传递

布鲁氏菌L7/L12、Omp31、Rsα、sodC免疫蛋白共表达载体构建和表达方法: 本发明公开了布鲁氏菌L7/L12、Omp31、Rsα、sodC免疫蛋白共表达载体及其构建和表达方法，所公开的共表达载体分别为在同一宿主菌中表达的双表达载体pETDuet-1、pRSFDuet-1，两个双表达载体上分别连接...; 周继章曹小安李兆才陈启伟宫晓炜; 文献传递

奶牛布病与衣原体病混合感染的PCR诊断被引量：1: 2006年; 本文采用PCR技术对发生在甘肃某奶源基地一奶牛场的群发性怀孕母牛流产进行病原检测,证明是此次流产由布鲁氏菌和衣原体混合感染所致。; 邱昌庆周继章曹小安程淑敏; 关键词：奶牛流产布鲁氏菌衣原体

一种基于双峰驼抗山羊痘病毒VHH-4-2及用途: 本发明公开了一种基于双峰驼抗山羊痘病毒VHH‑4‑2及用途，属于生物技术领域。包含抗山羊痘病毒VHH‑4‑2，VHH‑4‑2的筛选、表达、纯化、功能化标记以及活性验证，山羊痘病毒的浓缩、纯化，试剂盒各项指标的优化等。本发...; 吴锦艳尚佑军田宏尹双辉曹小安王耀杰惠小婷关玉华刘湘涛刘永生

布鲁氏菌核糖体L7/L12蛋白的原核表达及对鼠源树突状细胞的作用: 2022年; 为了研究和探讨布鲁氏菌核糖体L7/L12蛋白对鼠源树突状细胞(BM-DCs)分化和成熟的影响,用布鲁氏菌S2疫苗株为模板扩增L7/L12基因,构建重组质粒pET30a-L7/L12,用大肠埃希菌原核表达系统进行诱导表达,并用Ni柱对表达的蛋白进行纯化。用IL-4和GM-CSF诱导培养鼠源DCs,用脂多糖(LPS)和L7/L12蛋白刺激DCs后检测其表面共刺激分子和炎症因子的变化。结果表明,重组蛋白在1 mmol·L^(-1)的IPTG、16℃过夜的条件下以可溶性形式高效表达,其大小为18 ku,纯度达到93%以上并有一定的反应原性。流式细胞仪检测被刺激的BM-DCs细胞表面CD40、CD80等抗原分子的表达显著(P<0.05)高于空白对照组。qPCR结果显示,炎性细胞因子TNF-β、IL-1β、IL-12极显著(P<0.01)高于空白对照组。重组L7/L12蛋白具有刺激DCs细胞分化、成熟和促进炎症因子释放的功能。; 张广林徐龙高云艳李玲霞尚佑军尚佑军张勇曹小安; 关键词：布鲁氏菌树突状细胞

人兽共患羊传染性脓疱病疑似疫情的病原鉴定及其致病性分析: 2023年; 为确定呼和浩特市某规模化羊场发生的一起人兽共患羊口疮(orf)疑似疫情的病原,本研究从采自病羊和疑似感染人员的皮肤病损组织中成功分离到病毒,通过电镜观察、PCR和间接免疫荧光试验确诊为羊口疮病毒(ORFV)。对该分离株的B2L、ORFV121基因进行克隆测序,并与其他ORFV毒株进行遗传相关性分析,同时对采自1例病羊的样品进行病理组织学观察,最后采用兔体感染模型对此次人源分离株和羊源分离株的致病性进行分析。结果显示,本研究所涉规模羊场发生的人兽共患羊口疮疑似疫情确为orf田间野毒株引发,且感染致病力较强。患病羊除了嘴唇、口鼻部等处皮肤组织表现结痂、脓疱和花椰菜样等常见病症外,部分患病羊的外阴、乳房、蹄甲边缘皮肤组织出现增生、皲裂和结痂病变,且有些患病羊的消化道(如瘤胃、网胃)黏膜组织也出现溃疡和丘疹样病灶。测序分析显示,本研究中羊源、人源2个分离株的B2L和ORFV121基因不存在差异,表明它们来自于同一ORFV毒株的感染,且与疫苗株ORFV D1701的亲缘关系较近。兔体感染试验证实该毒株毒力较强(TCID_(50)为10^(5.0)/m L)。; 裴旺胜杜国玉张成吴锦艳王光祥曹小安张克山张强尚佑军; 关键词：羊口疮病毒病理剖检病理组织学检查

一种布鲁氏杆菌重组酶聚合酶扩增检测试剂盒及其应用: 本发明属于基因工程技术和诊断试剂技术领域，具体涉及一种布鲁氏杆菌重组酶聚合酶扩增(RPA)检测试剂盒及应用，所述检测试剂盒包括特异性引物组和探针。本发明以试纸条检测RPA扩增产物，只需10min左右扩增后，滴加至试纸条内...; 曹小安周建华刘永生尚佑军李学瑞兰喜葛志毅; 文献传递

家畜布鲁氏菌外膜蛋白OMP25基因的原核表达及其应用被引量：4: 2016年; 为了获得活性良好的布鲁氏菌基因工程抗原,对Brucella OMP25蛋白进行原核表达及初步应用,试验采用PCR方法从布鲁氏菌病S2疫苗株中扩增获得OMP25基因,构建了原核表达质粒p GEX-6P-1-OMP25,转化入大肠杆菌BL21中,经过IPTG诱导表达,应用Western-blot方法鉴定表达产物,并以纯化的OMP25重组蛋白为诊断用抗原,通过反应条件优化,初步建立Brucella抗体ELISA检测方法。又以羊布鲁氏菌普查检测血清120份为样本,采用试管凝集试验进行了比较分析。结果表明:成功构建了pGEX-6P-1-OMP25原核表达载体,并在BL21中得以诱导表达,经SDSPAGE和Western-blot分析,重组蛋白分子质量约为49 ku,优化试验确定抗原的最佳包被浓度为3.5μg/m L,血清最佳稀释度为1∶20。试管凝集试验血清样本的阳性率为83%,采用OMP25作为包被抗原的阳性检出率为68%,二者的符合率为85%。说明OMP25作为间接ELISA包被抗原用于羊布鲁氏菌血清学检测具有良好的反应性和特异性。; 臧金凤陈妍吴锦艳王光祥尹双辉栾志舫曹小安尚佑军张志东刘湘涛张超; 关键词：布鲁氏菌克隆原核表达间接ELISA

一种羔绵羊睾丸支持细胞及其分离方法和应用: 本发明公开了一种羔绵羊睾丸支持细胞及其分离方法和应用，其中，所述羔绵羊睾丸支持细胞SCST的保藏编号为CCTCC No.C2019203。本发明的SCST细胞可直接用于羊口疮病毒的规模化繁殖；也可转染端粒酶基因使其永生化...; 吴锦艳田宏尚佑军杜国玉候俊玲兰喜曹小安何继军; 文献传递

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曹小安