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结核分枝杆菌pdhA基因的原核表达及其免疫原性分析被引量：6: 2011年; 以结核分枝杆菌H37Rv菌株的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出1 100bp的pdhA(pyruvate dehydrogenase E1component alpha subunit)基因,经限制性酶切后,与pET-28a载体连接,转化到大肠杆菌BL21中,重组菌经1mmol/L IPTG诱导表达了pdhA蛋白,并用Ni-His-resin纯化了目的蛋白,经Western-blot分析鉴定了目的蛋白的免疫原性。结果显示,重组质粒的双酶切鉴定和DNA测序均正确;SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,在44ku处获得一目的条带,且具有很好的免疫原性。本研究成功获得了高纯度的重组蛋白pdhA,为深入研究其功能奠定了基础。; 王华南亓英芳朱婷于申业刘慧芳司微杨盛王加明冯拥军李素兰于秀婷王春来刘思国; 关键词：结核分枝杆菌原核表达

鸡肠炎沙门氏菌转座突变体库的构建及减毒菌株的筛选: 2013年; 为筛选减毒肠炎沙门氏菌(S.enteritidis)菌株,本研究以含有Mini-Tn5转座子的重组自杀质粒pUT对S.enteritidis SM6株进行转座诱变,利用双亲本滤膜杂交方法与供体菌E.coliβ2155进行接合转移,构建并优化接合转移体系,利用卡那抗性和DAP营养缺陷培养平板筛选法构建了SM6的随机转座突变体库。其中包含5个子库,共计获得364株突变体,经PCR鉴定表明转座子均插入SM6株的基因组中。通过Caco-2细胞侵袭试验筛选S.enteritidis侵袭力减弱并在细胞内增殖受到抑制的减毒突变株,经初筛及验证最终获得3株稳定减毒菌株,为进一步研究减毒菌株突变毒力基因的定位及SM6株的侵袭及感染机制奠定了基础。; 吕爽朱婷王秀梅刘慧芳司微于申业陈利苹刘思国; 关键词：肠炎沙门氏菌转座子突变体库

抗结核分枝杆菌单克隆抗体及其识别的抗原表位和用途: 本发明公开了抗结核分枝杆菌单克隆抗体及其所识别的抗原表位和用途。本发明提供了一株稳定分泌抗结核分枝杆菌CsdA的单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其微生物保藏号是：CGMCCNo.5077。本发明进一步提供了由该杂交瘤细胞株分泌...; 刘思国王华南于申业朱婷于秀婷刘慧芳王秀梅司微; 文献传递

抗结核分枝杆菌单克隆抗体及其识别的抗原表位和用途: 本发明公开了抗结核分枝杆菌单克隆抗体及其所识别的抗原表位和用途。本发明提供了一株稳定分泌抗结核分枝杆菌CsdA的单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其微生物保藏号是：CGMCCNo.5077。本发明进一步提供了由该杂交瘤细胞株分泌...; 刘思国王华南于申业朱婷于秀婷刘慧芳王秀梅司微

牛分枝杆菌与鸟型分枝杆菌2型重组蛋白Ag85b的血清学交叉反应研究: 2012年; 牛分枝杆菌(M.bovis)是引起牛结核病的常见病原,而鸟分枝杆菌(M.avium)2型则通常交叉感染牛,但不会导致严重的病变。为鉴定M.bovis和M.avium的免疫交叉反应情况,本研究分别以M.bovis和M.avium2型的基因组为模板,扩增ag85b基因,分别构建了M.bovis和M.avium的原核和真核表达重组质粒进行表达。以原核表达纯化的两种重组蛋白Ag85b(rAg85b)分别作为包被抗原,交叉检测两种真核重组质粒免疫豚鼠制备的抗血清。结果表明,原核表达的M.bovis和M.avium rAg85b与真核重组质粒免疫豚鼠制备的两种抗血清之间存在较强的免疫交叉反应。研究结果揭示M.bovis和M.avium的Ag85b蛋白存在很强的血清学交叉反应,这将严重干扰M.bovis Ag85b作为候选疫苗的免疫监测。; 朱婷王华南刘慧芳于申业王秀梅陈莉苹司微赵海玲刘思国; 关键词：牛结核分枝杆菌

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朱婷