- 白花蛇舌草对高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞增殖、凋亡、活性氧水平的影响研究
- 2023年
- 目的探讨白花蛇舌草注射液(HDI)对高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞(HRCECs)增殖、凋亡、氧化应激的影响及机制。方法2019年10月至2020年6月,体外培养HRCECs。将HRCECs分为对照组(5.5 mmol/L葡萄糖处理细胞)、高渗对照组(19.5 mmol/L甘露醇及5.5 mmol/L葡萄糖处理细胞)、高糖对照组(25 mmol/L葡萄糖处理细胞)、白花蛇舌草组(HDI组)(6.25 mL/L、12.5 mL/L、25 mL/L、50 mL/L HDI和25 mmol/L的葡萄糖处理细胞)。处理细胞48 h,通过CCK8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞周期及凋亡率;激光扫描共聚焦显微镜检测活性氧水平。蛋白质印迹法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白A1(CyclinA1)和活化胱天蛋白酶-3(cleaved caspase-3)蛋白表达。结果与对照组比较,高糖组细胞活性明显升高[(1.116±0.105)比(0.684±0.072)](P<0.05)。与高糖组比较,12.5 mL/L、25 mL/L和50 mL/L的白花蛇舌草组细胞活性明显降低[(0.847±0.076)、(0.639±0.058)、(0.421±0.042)比(1.116±0.105)](P<0.05)。选择50 mL/L的白花蛇舌草作为研究对象。与对照组比较,高糖组G_(0)/G期细胞百分比[(60.02±5.01)%比(54.72±4.31)%]、细胞凋亡率[(17.11±1.01)%比(3.32±0.47)%]、活性氧水平[(96.18±5.22)比(42.14±3.56)]及PCNA、CyclinA1和cleaved caspase-3表达均明显升高,G_(2)/M期和S期细胞百分比明显降低(P<0.05)。与高糖组比较,HDI组G_(0)/G期细胞百分比[(32.31±3.42)%比(60.02±5.01)%]、细胞凋亡率[(9.72±0.73)%比(17.11±1.01)%]、活性氧水平[(67.75±4.83)比(96.18±5.22)]及PCNA、CyclinA1和cleaved caspase-3表达均明显降低,G_(2)/M期和S期细胞百分比明显升高(P<0.05)。结论白花蛇舌草可降低高糖诱导的HRCECs增殖、凋亡及活性氧水平,阻滞细胞周期,机制可能与调节PCNA、CyclinA1和cleaved caspase-3表达有关。
- 李祥芸朱祥祥徐涛
- 关键词：视网膜血管上皮细胞白花蛇舌草凋亡活性氧
- TGF-β1对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应中植片IL-10表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的研究重组腺相关病毒介导的转化生长因子-β1(recombinant adeno-associat-ed virus mediated transforming growth factor-β1,rAAV-TGF-β1)对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的抑制作用以及对白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)表达的影响。方法构建rAAV-TGF-β1真核表达质粒载体。40只角膜新生血管化的SD大鼠行穿透性角膜移植术。实验组(20只):角膜植片预浸泡在rAAV-TGF-β1(10×1012v.g.L-1)的达尔伯克必需基本培养液F12混合培养液中37℃孵育30min;对照组(20只):角膜植片预浸泡在0.1mol.L-1磷酸盐缓冲液中37℃孵育30min。裂隙灯观察TGF-β1对大鼠角膜植片存活时间、排斥反应指数的影响。术后第1周、第2周、第4周、第2个月对角膜植片行组织病理学检查,免疫组织化学方法检测角膜组织中IL-10的表达。结果对照组角膜植片平均存活时间为(10.40±2.45)d,实验组为(18.70±1.51)d,比对照组显著延长,差异具有显著统计学意义(P<0.01);术后第2周实验组角膜植片排斥反应指数(3.48±0.86)明显低于对照组(7.65±0.42),差异具有显著统计学意义(P<0.01)。IL-10在术后主要表达于角膜的上皮层与内皮层。术后各时期实验组IL-10的表达明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论rAAV-TGF-β1能显著延长角膜植片存活时间,抑制大鼠高危角膜移植免疫排斥反应,其机制与提高角膜组织中IL-10的表达有关。重组腺相关病毒是眼科基因治疗的有效载体。
- 黄晓莉周炼红艾明朱祥祥邢怡桥谭锦泉
- 关键词：重组腺相关病毒高危角膜移植免疫排斥反应
- 重组腺相关病毒介导的血管内皮生长因子反义核苷酸对糖尿病视网膜病变的影响
- 2008年
- 目的 观察重组腺相关病毒（rAAV）介导的血管内皮生长因子（VEGF）反义核苷酸（rAAV-aVEGF 165）对糖尿病大鼠视网膜VEGF表达的影响。方法 40只Sprague-Dawley大鼠用链尿佐菌素（STZ）腹腔注射诱导糖尿病大鼠模型。去除实验中途死亡和血糖恢复的大鼠，共计32只大鼠纳入研究，随机平均分为实验组和对照组,每组各16只。实验组和对照组大鼠玻璃体腔分别注射rAAV-aVEGF165（10^10 pfu/ml）、磷酸盐缓冲液各10 μl，建模后1、5个月免疫组织化学及Western blot评价视网膜VEGF的表达，并对视网膜血管进行透射电子显微镜观察。结果 1个月时，实验组和对照组大鼠视网膜VEGF表达极低；5个月时，实验组大鼠视网膜VEGF表达较同期对照组降低，差异有统计学意义（t=23.87, P＜0.01）。透射电子显微镜观察显示，实验组视网膜未见明显异常改变，而对照组视网膜微血管腔明显狭窄，基底膜明显增厚，密度不均，并出现断裂，内皮细胞明显肿胀，突起增多，管腔明显狭窄，周细胞内细胞器结构模糊，细胞核固缩，呈凋亡状态，异染色质明显分布不均，浓集。结论 rAAV-aVEGF165能下调视网膜VEGF的表达，从而阻止糖尿病视网膜病变的发生、发展；rAAV是眼反义基因治疗的有效载体。
- 周炼红陈剑朱祥祥陈希邢怡桥巩丽清
- 关键词：基因疗法血管内皮生长因子A核苷酸类
- TGF-β_1基因在高危角膜移植术后对移植排斥反应的作用
- 2009年
- 目的研究高危角膜移植术后，重组腺相关病毒（rAAV）携载的TGF—β1基因（rAAV—TGF—β1）在角膜中的表达及对免疫排斥反应的影响。方法用碱烧伤的方法建立受体角膜新生血管（CNV）化模型。20只Wistar大鼠角膜为供体，40只SD大鼠为受体进行大鼠穿透角膜移植。治疗组术前将20只供体植片置于含rAAV—TGF-β1的DMEM／F12混合培养液中常温培养30min，对照组术前将20只供体植片置于DMEM／F12培养液中常温培养30min，术后裂隙灯下观察植片排斥反应及存活情况。免疫组织化学染色观察2组术后1、2、4周TGF—β1在角膜中的表达。Western blot检测2组术后1、2、4、8周TGF—β1的表达量。结果治疗组角膜平均存活时间为（17．60±2．31）d，对照组为（9．27±1．50）d，治疗组角膜植片混浊及血管化程度明显低于对照组（P〈0．01）。免疫组织化学染色显示治疗组术后1周TGF-v在角膜上皮呈弱阳性表达，术后2～4周角膜上皮及内皮细胞层呈阳性表达并高于对照组。对照组术后1～4周TGF—β1在角膜上皮及基底膜呈弱阳性表达。Western blot检测显示术后1周2组角膜TGF—β1含量差异无统计学意义（P〉0．05），术后2、4、8周治疗组角膜TGF—β1的表达较对照组增高（P〉0．05）。结论rAAV-TGF—β1能减轻高危角膜移植的排斥反应。
- 周炼红朱祥祥邢怡桥谭锦泉王炯
- 关键词：腺相关病毒转化生长因子高危角膜移植
- 磁共振水成像技术在检查泪道阻塞中的应用被引量：5
- 2013年
- 目的评价磁共振水成像(magnetic resonance hydrography,MRH)在检查泪道阻塞中的应用价值。方法双侧结膜囊滴生理盐水后,利用MRH技术对24例48侧正常眼泪道及26例45侧溢泪眼泪道进行检查,采用T2加权快速自旋回波序列(T2W/TSE)扫描,并对图像进行分析,19眼泪道阻塞眼分别接受泪囊鼻腔粘膜吻合术、内窥镜下激光泪道成形术及硅胶管植入术。结果 MRH能够提供清晰的泪囊及鼻泪管影像并对阻塞的部位及泪道形态改变作出准确的判断,48侧正常眼及45侧溢泪眼泪小管显像不理想,24例48侧正常眼泪囊及鼻泪管显像清晰,45侧溢泪眼MRH诊断与泪道冲洗诊断相符。通过最大信号强度投影重建图像能对泪道改变进行详细分析,接受手术的19眼中,18眼术中所见与MRH诊断结果相符,1眼鼻泪管狭窄患眼泪道内窥镜下表现为阻塞。结论 MRH是一种可靠的、非侵袭性的检查方法,其在泪道阻塞的诊断和治疗中将起重要作用。
- 王根国朱祥祥陈辉杜龙庭张少维毛晓春
- 关键词：泪道磁共振水成像
- 正常成年人眼眶脂肪体积随年龄变化的磁共振成像定量分析被引量：1
- 2013年
- 目的利用磁共振成像（MRI）研究不同年龄段正常成年人眼眶脂肪体积的变化，探讨正常成年人眼眶脂肪体积随年龄变化的趋势。方法调查研究。召集我院144例（男女各半，288眼）成人健康体检志愿者，按年龄分组（1组，18～35岁；2组，36～50岁；3组，≥51岁）平均入组不同年龄组男、女各为24例，行眼眶MHI扫描并测量眼眶脂肪体积，经标准化处理后，分析不同性别及年龄段正常成年人眼眶脂肪体积变化。采用单因素方差分析、独立样本t检验、Spearman等级相关进行数据分析。结果男性各年龄组之间眶脂肪体积差异无统计学意义（F=0．787，P〉0．05），女性各年龄组之间眶脂肪体积差异无统计学意义（F=1．183，P〉0．05），男、女2组眼眶脂肪体积比较差异无统计学意义（t=1．029，P〉0．05），眼眶脂肪体体积与年龄之间无相关性（r=-0．087，P〉0．05）。结论正常成年人眼眶脂肪体积随年龄增长无明显变化，男、女性别之间无明显差异。
- 毛晓春朱祥祥陈辉杜龙庭许畅李贵刚张虹
- 关键词：磁共振成像成年人年龄
- 房水对体外培养兔晶体上皮细胞增殖影响的实验研究
- 目的 研究房水对培养的兔晶体上皮细胞的增殖能力的影响；方法 采用体外培养的兔晶体上皮细胞,在第三代培养细胞中添加20、50、80 μl体积的房水,借助甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazoliu...
- 毛晓春王根国刘海菊吴京莉朱祥祥许畅
- TGF-p1基因在高危角膜移植术后对移植排斥反应的作用
- 目的观察高危角膜移植术后,重组腺相关病毒(rAAV)携载的TGFβ31基因(rAAV-TGFβ1)在角膜中的表达情况及对免疫排斥反应的影响。方法40只Sprague-Dawley(SD)大鼠为受体,首先用碱烧伤的方法建立...
- 朱祥祥周炼红邢怡桥谭锦泉
- TGF-β1对大鼠高危角膜移植术后植片超微结构变化的影响
- 黄晓莉周炼红艾明朱祥祥邢怡桥谭锦泉
- 儿童视觉发育敏感期微视觉诱发电位研究被引量：1
- 2009年
- 目的 观察不同年龄儿童微视觉诱发电位（miniVEP）的潜伏期和振幅值变化。方法 对随机选取的84名正常儿童和正常成年人的168只眼进行miniVEP检测。所有受试者按年龄分为A组：0-3个月；B组：4-6个月；C组：7-12个月；D组：1-3岁；E组：4-6岁；F组：7-12岁。G组：对照组，正常成年人。每组均为12人24只眼。采用德国Roland 电生理仪，使用miniVEP刺激器行闪光VEP（F-VEP）检查，分析P100波波形、振幅高低及潜伏期时程长短。结果 Ａ组振幅平均值最低，潜伏期平均值最大，分别为（7.39±1.79） μV和（137.45±7.64） ms；A、B、C、D、E组振幅平均值依次增高（F=359.56），A、B、C、D组潜伏期平均值依次缩短（F=326.64），差异有统计学意义（P〈0.01）；E、F、G组振幅均较高，3组之间差异无统计学意义（F=2.39，P〉0.05）；D、E、F、G组潜伏期均较短，4组之间差异无统计学意义（F=2.64，P〉0.05）。结论 儿童随着年龄增长, 振幅增高，潜伏期缩短，潜伏期的发育先于振幅达到成人水平。
- 周炼红朱祥祥邢怡桥易莲芳王炯吴丽
- 关键词：儿童
