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紫龙金对人乳腺癌细胞系MCF-7增殖及凋亡的影响被引量：9: 2010年; 目的观察复方中药紫龙金对人乳腺癌细胞系MCF-7增殖的抑制作用及对其凋亡的诱导作用,探讨紫龙金治疗乳腺癌的作用机制。方法依据培养液紫龙金浓度的差异,实验共设4组:(1)对照组:不加紫龙金干预的1640培养液;(2)紫龙金低浓度组:1.5 mg生药/mL紫龙金培养液;(3)紫龙金中浓度组:3 mg生药/mL紫龙金培养液;(4)紫龙金高浓度组:6 mg生药/mL紫龙金培养液。采用细胞计数法绘制生长曲线及四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度紫龙金对MCF-7细胞增殖能力的影响,并应用流式细胞术、Hoechst 33342核染色法及DNA梯度形成法测定紫龙金诱导凋亡的作用。结果(1)与对照组比较,紫龙金各剂量组的细胞计数在各时间点(24、48、72、96、120、144 h)明显减少,其差异均有统计学意义(P<0.05);紫龙金各剂量组间的生长抑制率差异除低、中浓度组间在24、72 h无统计学意义外(P>0.05),各剂量组间两两比较在不同时间点(24、48、72、96、120、144 h),其差异均有统计学意义(P<0.05)。紫龙金对MCF-7细胞的增殖抑制作用呈时间依赖性和剂量依赖性;(2)紫龙金使细胞阻滞在G_0/G_1期;(3)中、高浓度紫龙金诱导MCF-7细胞凋亡,并形成DNA ladder。结论紫龙金能抑制人乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖,并诱导细胞凋亡,从而起到抗肿瘤的作用。; 田志华梁云燕李振甫王代树; 关键词：紫龙金人乳腺癌细胞系MCF-7 增殖凋亡

紫龙金抑制人乳腺癌细胞系MCF-7生长的体内外实验研究被引量：4: 2010年; 目的探讨复方中药紫龙金在体内和体外对MCF-7人乳腺癌细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法 (1)台盼蓝拒染法和双层软琼脂克隆形成法检测紫龙金对MCF-7细胞增殖活性和克隆形成的影响;(2)Westernblot法检测紫龙金对p-ERK1/2蛋白表达的影响;(3)17-β-雌二醇缓释药片包埋法构建MCF-7细胞的BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型,并检测紫龙金(实验组灌胃生药20g紫龙金/kg体重)对肿瘤生长的抑制效应。结果 (1)紫龙金降低MCF-7细胞的存活率,并呈剂量和时间依赖性;(2)紫龙金组MCF-7细胞克隆形成率显著低于对照组,且随着浓度的增加,克隆形成能力明显降低[0.75、1.5、3.0、6.0mg/mL紫龙金组细胞克隆形成抑制率分别为(12.66±1.54)%、(88.83±2.13)%、100%、100%],克隆直径也明显减小或无克隆形成;(3)紫龙金下调p-ERK1/2蛋白的表达;(4)实验组裸鼠与对照组裸鼠4周后移植瘤的平均体积分别为(0.73±0.58)cm3、(1.36±0.64)cm3,平均瘤重分别为(1.02±0.25)g、(1.66±0.09)g,两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),实验组抑瘤率为38.55%。结论紫龙金可显著抑制MCF-7细胞的体内和体外增殖、转化和致瘤性,这可能与p-ERK1/2蛋白的表达下调有关。; 田志华梁云燕李振甫王代树; 关键词：紫龙金人乳腺癌细胞系MCF-7 P-ERK1/2

克隆肺腺癌亲代细胞A_(549)与耐顺铂细胞A_(549)^(DDP)耐药相关基因的差异表达片段被引量：2: 2001年; 目的　克隆肺腺癌耐药相关基因。方法　以mRNA差异显示技术检测耐顺铂肺腺癌细胞A54 9DDP及其亲代细胞A54 9基因表达的差异。差异表达基因片段被克隆并经Northernblot证实。结果获得 4个基因表达的差异cDNA片段 ,经测序、同源性分析 ,其中 2个片段 (A1、D1)在GeneBank中未发现同源序列 ,一个片段 (A2 )与白介素 1β转化酶 (Interleukin 1βconvertingenzyme ,ICE) 89%同源性 ,一个片段 (D2 )与MM45srRNA(Mousemusculus 45spre rRNA)基因 10 0 %同源。A1、A2 cDNA片段仅表达于A54 9细胞 ,D1、D2 cDNA片段仅表达于A54 9DDP细胞。结论　应用mRNA差异显示技术获得 4个肺腺癌A54 9与A54 9DDP间的基因差异表达片段。 2个新的差异表达片段以及与ICE、MM45sRNA高度同源的基因片段是否与耐药相关尚需进一步研究。; 王洁刘叙仪李振甫张宏梁莉蒋薇; 关键词：肺肿瘤耐药相关基因 MRNA差异显示法肺腺癌顺铂

抗p16单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1: 2000年; 目的 :制备抗p16单克隆抗体并进行鉴定。方法 :以p16合成肽为抗原免疫纯系小鼠。利用杂交瘤技术制备单克隆抗体 ,并利用亲和层析等法纯化抗体。通过酶免疫测定及免疫印迹等法对单克隆抗体进行分析及鉴定 ,并通过免疫组化方法与进口多克隆抗体进行比较。结果 :获得 4株稳定分泌抗 p16单克隆抗体杂交瘤株 ,与进口多克隆抗体比较 ,检测阳性及阴性符合率达 10 0 %。但使用单克隆抗体时 ,组织切片不需进行抗原修复 ,染色效果稳定。结论 :抗p16单克隆抗体的获得弥补了国内 p16检测试剂的空白。; 万文徽王青李振甫高学硕鄂征蔡红; 关键词：P16蛋白单克隆抗体多克隆抗体免疫组织化学

一种含SN3类配体的血管活性肠肽衍生物药物及其制备方法: 本发明涉及一种用于肿瘤放射显像的血管活性肠肽衍生物的螯合物，其是由血管活性肠肽衍生物与放射性同位素99mTc形成，所述血管活性肠肽衍生物为VIPSN3，其结构式为：His-Se...; 杨志顾晋李振甫张宏赵军; 文献传递

癌胚抗原单抗的制备及免疫学性状和动物体内分布的研究: 目的:制备针对 CEA 特异抗原决定族的单克隆抗体,为肿瘤免疫诊断及肿瘤放射免疫显像和放射免疫治疗提供特异抗体。方法:本研究从人结肠癌肝转移灶提取 CEA 抗原,利用杂交瘤技术制备抗 CEA 单克隆抗体,ELISA 方法...; 李振甫杨志张宏林保和; 文献传递

抗乳腺癌单克隆抗体的制备及其应用被引量：1: 2001年; 目的 :制备抗人乳腺癌单克隆抗体(McAb) ,用于临床肿瘤的免疫病理诊断与分型研究 ,为药物导向诊断和治疗奠定基础。方法 :以乳腺癌细胞系ZR75免疫Balb/c小鼠 ,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合 ,经选择培养、筛选及克隆化 ,获得恒定分泌抗ZR75单克隆抗体的杂交瘤细胞系BM109。结果 :单抗BM109的Ig亚类为IgG1,BM109抗原主要表达在靶细胞膜上 ,为分子量37KD的蛋白质抗原。在乳腺癌的免疫反应率为86.7 %(26/30) ,与胃癌、食管癌、卵巢癌等6种肿瘤的免疫反应率为9.5 %(4/42) ,而对乳腺纤维瘤、囊性增生症和周围正常乳腺组织未见阳性反应。结论 :所获一株抗乳腺癌单克隆抗体 ,具有较好的特异性 ,可望进一步用于乳腺癌的诊断。; 马忠良李振甫张虹王占民; 关键词：乳腺癌杂交瘤单克隆抗体

多聚腺苷酸信号缺陷病毒捕获宿主序列导致细胞转化: 2001年; 目的 :通过人工改变逆转录病毒多聚腺苷酸化信号 ,检测病毒转录能否产生病毒宿主融合转录产物及其是否具有转化细胞的能力 ,探讨病毒致癌的机制。方法 :用分子生物学技术人工定点突变鼠逆转录病毒多聚腺苷酸化信号 ,使之产生多聚腺苷酸缺陷性病毒 ;用该病毒转染大鼠REF 1细胞 ,并用G418筛选抗性细胞。通过Northernblot方法检查通读RNA的表达 ;通过细胞形态和软琼脂集落形成实验检测细胞的转化。结果 :多聚腺苷酸化信号缺陷病毒PS可在CRIP包装细胞形成病毒 ;用该病毒感染大鼠REF 1细胞 ,可捕获下游宿主细胞序列 ;多聚腺苷酸化信号缺陷病毒感染的REF 1混合细胞中的部分细胞可使REF 1细胞集聚能力增强 ,在软琼脂中以集落式生长。结论 :多聚腺苷酸信号缺陷病毒感染REF 1细胞后可通过表达病毒宿主通读RNA激活下游宿主序列使细胞发生转化。; 张青云李振甫王利民王雅明徐建军; 关键词：逆转录病毒细胞转化病毒

抗乳腺癌单克隆抗体mAb109的放射性标记与生物评价被引量：1: 2013年; 目的探索单克隆抗体mAb109的标记方法,并进行荷瘤动物模型的生物分布和显像研究。方法采用2-巯基乙醇(2-mercaptoethanol,2-ME)法还原单克隆抗体mAb109,并测定还原抗体浓度和巯基含量。通过葡庚糖转络合法用放射性核素99Tcm标记mAb109,测定标记抗体的标记效率和稳定性。建立乳腺癌动物模型,并进行体内分布和显像研究。结果还原抗体保持了较高的完整性,平均每分子抗体含有5.38个巯基。葡庚糖转络合法标记mAb109具有较高的标记率(>90%)和体外稳定性。标记抗体在肿瘤部位有显著的富集,且具有较长的滞留时间。荷瘤动物模型注射99Tcm-mAb109后,可以得到清晰的肿瘤影像。结论99Tcm-mAb109具有较高的标记效率,对所采用的葡萄糖调节蛋白78(glucose-related protein 78,GRP-78)阳性动物模型具有一定的靶向性。; 翟士桢李囡李振甫谢卿张宏杜进杨志; 关键词：葡萄糖调节蛋白78 乳腺癌单克隆抗体

胃癌单克隆抗体与丝裂霉素C交联物导向治疗研究──附3例临床初步试用报告: 1994年; 本文报告采用活性酯方法制备了胃癌单克隆抗体３Ｈ１１与ＭＭＣ直接交联物３Ｈ１１－ＭＭＣ，又以ＳＰＤＰ为交联剂，人血清白蛋白（ＨＳＡ）为中间载体制备了间接交联物３Ｈ１１－ＨＳＡ－ＭＭＣ。３Ｈ１１与ＭＭＣ克分子比，前者为１∶７，后者为１∶４０，两者抗体活性均近完全保留，ＢＧＣ８２３体外细胞毒实验ＩＣ５０分别为０．７μｇ／ｍｌ及０．９μｇ／ｍｌ，游离ＭＭＣＩＣ５０为４．３μｇ／ｍｌ。裸鼠胃癌移植瘤抑制率两种交联物均为７１．４％，明显优于游离ＭＭＣ（４６．９％）及非特导性抗体交联物（４％）（Ｐ＜０．０１）。３例晚期及手术后复发胃癌病人接受８、１６ｍｇＭＭＣ量的３Ｈ１１－ＨＳＡ－ＭＭＣ治疗，副反应包括寒战、轻至中度发热及恶心、呕吐；２例肿瘤稳定，１例进展。２例血中检出抗鼠抗体（ＨＡＭＡ）。; 王耐勤张运涛李农谈立松杨伯琴金懋林李振甫董志伟; 关键词：单克隆抗体丝裂霉素C 胃肿瘤

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