李育中
- 作品数:26 被引量:12H指数:2
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金:协和青年科研基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项云南省重点新产品开发计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生自然科学总论理学更多>>
- 树鼩IgE高亲和力受体α亚基的原核表达、抗体制备及鉴定
- 2018年
- 目的:原核表达树鼩IgE高亲和力受体α亚基(FcεR1α)并制备抗体,为研究树鼩过敏反应动物模型奠定基础。方法:提取树鼩肝脏及脾脏组织RNA,用巢式PCR法扩增树鼩FcεR1α基因,连接至pMD-19T载体后进行DNA测序,将测序正确的目的片段与表达载体pET30a(+)连接,构建重组表达质粒,转入表达宿主菌大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,Ni-NTA树脂柱亲和层析纯化;将纯化的蛋白作为免疫原免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体;Western印迹检测多克隆抗体的特异性,ELISA检测多克隆抗体的效价。结果:调取了树鼩FCεRIα基因,并将该序列去信号肽的胞外结构(第26~213氨基酸)构建到pET30a(+)载体上,通过IPTG诱导表达并纯化了FCεRIα蛋白,蛋白纯度在90%以上。ELISA效价检测结果表明免疫动物制备的多克隆抗体效价为100 000,且该抗体能够检测到真核细胞表达的树鼩IgE FCεRIα蛋白。结论:在大肠杆菌中表达并纯化获得树鼩FcεRIα,免疫动物制备了多克隆抗体。
- 张晶晶肖红剑李育中宫悦毕研伟寸韡
- 关键词:树鼩原核表达过敏性反应
- 一种用于检测甲型肝炎病毒滴度的细胞系及其构建方法与应用
- 本发明涉及一种用于检测甲型肝炎病毒滴度的细胞系及其构建方法与应用。本发明利用3ABC蛋白酶能与MAVS相互的性质,将MAVS C端与荧光蛋白构建融合蛋白,并将其包装成慢病毒颗粒,感染细胞后,表达的融合蛋白会锚定在细胞质中...
- 寸韡毕研伟龙琼肖红剑李育中
- 用细胞工程培养的泛生墙藓原丝体制备的动物拒食剂
- 本发明涉及一种用细胞工程培养的泛生墙藓原丝体制备的动物拒食剂,属生物技术领域。本发明的动物拒食剂经以下工序得到:由细胞工程方法繁殖得到的泛生墙藓原丝体用0.5倍体积的90%乙醇研磨,再加入10-100倍体积的75%乙醇,...
- 陈穗云李育中陈正贵沈霏汪家乐张鸽范静黎兴江
- 文献传递
- 狭叶仙鹤藓基因组DNA甲基化的初步研究
- DNA甲基化是指在DNA碱基上添加甲基基团的一种化学修饰,是广泛存在于真核生物中的一种DNA共价修饰。作为表观遗传修饰的主要方式之一,DNA甲基化在基因表达调控过程中发挥着重要作用,提供了独立于DNA序列的遗传信息存储和...
- 李育中
- 关键词:DNA甲基化AFLP技术
- 用细胞工程培养的泛生墙藓原丝体制备的抗病毒制剂
- 本发明涉及一种用细胞工程培养的泛生墙藓原丝体制备的抗病毒制剂,属生物技术领域。本发明的抗病毒制剂经以下工序得到:由细胞工程方法繁殖得到的泛生墙藓原丝体用0.5倍体积的90%乙醇或甲醇研磨,再加入10-100倍体积的75%...
- 陈穗云李育中陈正贵沈霏汪家乐张鸽范静黎兴江
- 文献传递
- “Anti-UV Clone”柴胡细胞提取物对UV-B照射HaCaT细胞的影响
- 2011年
- 利用噻唑蓝比色分析法(MTT法)研究"Anti-UV Clone"柴胡细胞株不同溶剂提取物对UV-B照射HaCaT细胞活性的影响.实验结果表明,"Anti-UV Clone"柴胡细胞株乙醇和乙酸乙酯提取物均抑制HaCaT细胞的活性,而水提取物则能提高HaCaT细胞的活性.因此,"Anti-UV Clone"柴胡细胞株水提取物进一步被用于HaCaT细胞紫外线照射研究.与UV-B照射组相比,在照射前或照射后加入"Anti-UV Clone"柴胡细胞株水提取物均能不同程度提高细胞的活性(p<0.05);在照射前或照射后加入0.2 U/mL的"Anti-UV Clone"柴胡细胞株水提取物,细胞活性分别比照射组提高10.54%或14.95%.说明"Anti-UV Clone"柴胡细胞株水提取物中可能含有UV-B保护物质.
- 李育中范静沈霏王建光杨菊芬吕琦马海英夏光敏陈穗云
- 关键词:南柴胡提取物UV-BHACAT细胞MTT
- 一种外源片段高效定点定向插入DNA病毒基因组的方法
- 本发明属于病毒基因重组技术领域,具体涉及利用非同源重组机制,将外源DNA片段定点、定向地高效插入特定大型DNA病毒基因组。本发明包括下列步骤:1)设计并构建针对DNA病毒基因组特定切割位点的CRISPR‑Cas9(clu...
- 寸韡宫悦毕研伟李智华李育中张晶晶
- 文献传递
- “Anti-UV Clone”柴胡细胞提取物对HaCaT和HepG2细胞生长的影响研究被引量:1
- 2010年
- 实验利用噻唑蓝比色分析法(MTT法)研究"Anti-UV Clone"柴胡细胞株不同溶剂提取物对人角质上皮细胞(HaCaT细胞)和人肝癌细胞(HepG2细胞)生长的影响.实验表明,75%乙醇提取剩余物在低浓度时对HaCaT细胞的生长具有显著的促进作用,其中以加入质量浓度为2.50mg/L时效果最好,添加后HaCaT细胞的生长速率比空白对照高(43.71±1.23)%.表明该提取物中存在促进HaCaT细胞生长的活性物质.而"Anti-UVClone"柴胡细胞株石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯提取物则都会抑制HaCaT细胞和HepG2细胞的生长.其中石油醚和乙酸乙酯提取物对HaCaT细胞生长的抑制作用最强,在加入质量浓度为7.50mg/L时对HaCaT细胞的抑制率分别达(39.70±0.61)%和(40.20±0.95)%;而石油醚提取物对HepG2细胞生长的抑制作用最强,在加入质量浓度为7.50mg/L时对HepG2细胞生长的抑制率达(44.97±1.01)%.
- 范静李育中沈霏王建光吕琦张鸽夏光敏陈穗云
- 关键词:提取物HACAT细胞HEPG2细胞MTT
- 一种纯化细菌荚膜多糖的方法
- 本发明公开了一种纯化细菌荚膜多糖的方法,所述纯化方法利用非离子表面活性剂,通过相分离法纯化细菌荚膜多糖。细菌荚膜多糖疫苗的制备过程中需要尽可能多地去除杂质蛋白和内毒素,以减少疫苗的副反应。目前使用的苯酚抽提法、柱层析法以...
- 寸韡肖红剑毕研伟李育中李智华丁晨高丹丹闫玲梅
- 文献传递
- 几种苔藓植物的组织培养被引量:4
- 2011年
- 实验以3种苔藓植物的孢子作为材料,通过组织培养的方式对其进行快速繁殖,表明Benecke培养基对苔藓植物孢子悬浮液发育为原丝体进而发育为植株有积极作用.实验探索了以原丝体为实验材料的配子体培养方法.
- 李骏盈陈林李育中陈穗云
- 关键词:苔藓植物快速繁殖