杨蕾蕾
- 作品数：102 被引量：118H指数：6
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- 相关领域：农业科学医药卫生生物学建筑科学更多>>
- 一种抑制山羊副流感病毒3型复制的靶标位点序列及其应用
- 本发明涉及一种抑制山羊副流感病毒3型（CPIV3）复制的靶标位点序列及其在制备抗山羊副流感病毒3型药物中的应用。所述抑制山羊副流感病毒3型复制的靶标位点序列位于干扰素调节基因2（IRF2）的3’UTR中，其核苷酸序列如S...
- 李基棕钟纯燕毛立李文良郝飞孙敏刘茂军杨蕾蕾张纹纹
- 文献传递
- 山羊干扰素tau的原核表达及其抗病毒活性研究
- 引言/目的干扰素tau(interferon-tau,IFN-tau)属于I干扰素的一种,具有抗病毒、抗细胞增殖、免疫调节功能。不同物种来源的干扰素tau具有种属特异性。与其他I干扰素不同的是,IFN-tau的产生无需病...
- 郝飞李文良毛立李基棕孙敏杨蕾蕾张纹纹江杰元
- 边界病病毒RT-PCR检测方法的建立和应用
- 2022年
- 边界病(border disease)由边界病病毒(border disease virus, BDV)引起,导致绵羊和山羊持续感染和繁殖疾病,2012年在国内首次报道,但目前尚无特异的RT-PCR方法对该病原进行检测。本研究通过比对黄病毒科瘟病毒属病毒的全基因组序列,以3′-UTR基因为靶基因,设计了特异扩增BDV的引物。通过构建重组质粒pMD18-T-BDV,以其作为标准品建立了BDV的RT-PCR检测方法。进一步优化该方法的反应条件,并进行特异性、敏感性及临床样品检测。结果显示,该方法在退火温度48~60℃时均可特异扩增BDV,通过检测牛病毒性腹泻病毒1型(BVDV-1)、牛病毒性腹泻病毒2型(BVDV-2)和猪瘟病毒(CSFV)提取的RNA,该方法可特异扩增BDV而对其他同属病毒检测均呈阴性,表明其特异性良好;同时,该方法具有良好的敏感性,最低检出限可达10~1拷贝/μL,敏感性极高。利用该方法检测BDV持续感染羊和人工感染羊,发现持续感染羊的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、淋巴结、卵巢、脑等器官均可检测到BDV,而人工感染羊只能在感染3~7 d的血液和淋巴结中检测到病毒RNA,其他器官中未检测到病毒。本研究建立了特异检测BDV的RT-PCR方法,并证明了BDV在持续感染羊和一过性感染羊中的病毒分布情况,为其可能的排毒途径提供了依据。
- 毛立张纹纹李文良杨蕾蕾孙敏程子龙李基棕郝飞刘茂军
- 关键词：RT-PCR检测方法
- 一种用于检测山羊副流感病毒3型和小反刍兽疫病毒的引物对
- 本发明涉及一种用于检测山羊副流感病毒3型和小反刍兽疫病毒的引物对，属于生物技术领域。本发明提供了检测病毒的专用引物，包括引物对A和引物对B，引物对A包括引物1和引物2，引物对B包括引物3和引物4；引物1、引物2引物3和引...
- 郝飞李文良毛立杨蕾蕾江杰元张纹纹王钟毓
- 文献传递
- 山羊Viperin基因的表达及其抗病毒作用
- 引言干扰素是先天免疫的重要组成成分,其中I型干扰素可以诱导产生多达300种的干扰素刺激基因(ISGs)。Viperin是近年来新发现的一种ISG,已有研究证明它对多种病毒具有抗病毒活性。最近有对猪Viperin功能及其抗...
- 李文良吴铖楠毛立李基棕郝飞杨蕾蕾张纹纹江杰元
- 山羊副流感病毒3型JS2013分离株对豚鼠致病性的研究
- 为了探究CPIV3 JS2013分离株的致病性,本试验采用豚鼠研究该病毒在动物体内的复制及机体组织病理损伤等情况。结果表明:攻毒后2天攻毒组的豚鼠开始出现临床症状。RT-PCR检测攻毒后第3天到第7天出现病毒血症,攻毒后...
- 王钟毓李文良郝飞毛立杨蕾蕾张纹纹江杰元
- 文献传递
- 牛病毒性腹泻病毒E2蛋白阻断ELISA抗体检测方法的建立
- 2023年
- 为了建立一种检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E2蛋白抗体的阻断ELISA方法,以BVDV-1重组E2蛋白作为包被抗原,辣根过氧化物酶(HRP)标记的BVDV-1 E2蛋白的单克隆抗体作为检测抗体,经过一系列的条件筛选与优化,建立阻断ELISA方法,并对该检测方法的特异性、敏感性和与中和试验结果的符合率进行测定。经优化后的最佳反应条件:抗原包被质量浓度为0.25 mg/L;酶标单抗稀释度为1∶2000,37℃孵育1 h;待检血清稀释度为1∶8,37℃孵育1.5 h;37℃避光显色10 min。使用该方法对87份BVDV阴性牛血清进行检测,确定当待检血清的阻断率≤21.13%时,该血清为阴性;阻断率≥26.86%时,该血清为阳性。该方法检测BVDV-2、边界病病毒、猪瘟病毒、牛副流感病毒3型、口蹄疫病毒、布鲁菌、副结核及牛支原体阳性血清均无交叉反应;最低可检出中和效价为8的阳性血清。用该方法检测105份临床血清样品,与血清中和试验总符合率为93.33%,且阻断率与中和抗体效价呈正相关。上述结果表明,本研究建立的阻断ELISA方法特异性好、灵敏度高、操作简便,为BVDV流行病学调查及免疫效果评估提供了一种新的技术手段。
- 刘鑫欢何苗锋张纹纹程子龙毛立毛立刘茂军杨蕾蕾李文良
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒E2蛋白阻断ELISA单克隆抗体
- 边界病病毒E2蛋白质的原核表达及间接ELISA检测方法的建立被引量：2
- 2015年
- 边界病病毒(Border disease virus,BDV)是导致绵羊和山羊繁殖障碍的重要病原。为了建立检测BDV特异抗体的ELISA方法,本研究将BDV基因克隆入原核表达载体p ET-32a(+),并构建重组表达菌,经SDS-PAGE和Western blot鉴定目的蛋白质。以纯化的重组表达蛋白质为抗原,建立间接ELISA(r E2-ELISA)检测方法。通过反应条件优化,确定抗原包被浓度4.0μg/ml;封闭液为20 g/L BSA;血清最佳稀释度为1∶50,孵育1 h;二抗最佳稀释倍数为1∶30 000,作用45 min;以TMB为底物显色10 min。用该ELISA方法检测瘟病毒属的CSFV、BVDV阳性血清,结果均为阴性。对187份山羊血清样品进行临床检测,与Svanova试剂盒检测结果阳性符合率为76.25%,总符合率为74.87%;上述检测方法同时与Western blot鉴定结果进行比较,结果显示,Western blot结果与r E2-ELISA检测结果的符合率为79.55%,高于与Svanova试剂盒检测的符合率(72.73%)。表明建立的间接ELISA检测方法可适用于临床BDV血清样品的抗体检测。
- 毛立刘霞李文良杨蕾蕾张纹纹魏建忠江杰元
- 关键词：间接ELISA
- 山羊疱疹病毒Ⅰ型的分离鉴定与致病性被引量：3
- 2018年
- 为了查明引起2013—2014年江苏多地育肥羊出现呼吸道症状为主的疾病的病因,通过采集发病羊场鼻拭子,采用细胞接毒分离培养、病毒蚀斑纯化、病毒形态结构观察和病毒核酸鉴定,分离到一株山羊疱疹病毒Ⅰ型(caprine herpesvirus 1,CpHV-1),命名为JSHA1405;并对其进行了致病性试验。分离鉴定结果表明:病料接种MDBK细胞后,盲传至第3代时产生明显细胞病变;电镜下可见直径约100nm有囊膜的病毒粒子;gB全基因测序表明其为CpHV-1,序列比对显示JSHA1405株与CpHV-1瑞士分离毒E/CH株相似性最高,为99.2%。致病性试验表明,JSHA1405分离株可导致山羊发热持续一周以上,体温最高可达41.8℃。山羊感染后临床症状明显,表现为精神沉郁、流浆液性或脓性鼻涕,可通过鼻腔/粪便排毒。山羊感染后第7天出现中和抗体,第28天达到最高。这是国内首次报道CpHV-1的分离鉴定及致病性,分离毒JSHA1405具有较强的致病性,为CpHV-1病原学及防控技术研究提供依据与参考。
- 郝飞毛立李文良李基棕杨蕾蕾张纹纹孙敏钟纯燕刘茂军江杰元
- 关键词：GB
- 一株分泌抗裂谷热病毒NSs蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用
- 本发明提供一株分泌抗裂谷热病毒NSs蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，属于生物技术领域。分泌抗裂谷热病毒NSs蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株2D6D10，其保藏编号为CCTCC NO：C2019269。本发明还提供所述...
- 李文良张聪张纹纹陈亚玲杨蕾蕾毛立李基棕孙敏刘茂军
- 文献传递
