田玺择
- 作品数：8 被引量：24H指数：3
- 供职机构：石河子大学医学院新疆地方与民族高发病省部共建教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆生产建设兵团医药专项基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株Hsp16．3基因打靶载体的构建与鉴定
- 2012年
- 结核分枝杆菌感染人体后主要寄生在宿主巨噬细胞内，结核分枝杆菌小分子热休克蛋白（smallheatshockproteins，sHSPs）Hsp16．3是其在宿主巨噬细胞内生存繁殖所必需的蛋白质，已有研究表明Hsp16．3与结核分枝杆菌的潜伏感染关系密切，本研究利用基因敲除技术构建了结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株Hsp16．3基因打靶载体，
- 田玺择徐芳董江涛姚楠吴芳章乐曹旭东张万江
- 关键词：结核分枝杆菌感染HSP16.3基因敲除技术打靶载体强毒株小分子热休克蛋白
- 不同毒力结核分枝杆菌感染小鼠对肺泡巨噬细胞的凋亡率及其时相性变化的影响被引量：18
- 2012年
- 目的:探讨不同毒力结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞的凋亡率及其时相性变化。方法:不同毒力结核分枝杆菌悬液分别经小鼠尾静脉注射、复制及鉴定各组小鼠感染模型,各组小鼠感染模型复制成功后第1、3、5、7、9、11、13、15天,进行肺泡灌洗,收集小鼠肺泡灌洗液,获取感染小鼠肺泡巨噬细胞,以激光共聚焦显微镜技术检测及鉴定结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞,流式细胞术检测上述各时间点、各组感染小鼠肺泡巨噬细胞的凋亡率,比较各组感染小鼠肺泡巨噬细胞凋亡率的时相性变化。结果:激光共聚焦显微镜检测结果显示,结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株和卡介苗菌株(BCG)均被小鼠肺泡巨噬细胞大量吞噬。流式细胞技术检测结果显示:结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株感染小鼠模型组和卡介苗菌株(BCG)感染小鼠模型组,在小鼠感染模型复制成功后1～9天,小鼠肺泡巨噬细胞的凋亡率逐渐升高,9天时两组小鼠肺泡巨噬细胞的凋亡率均达最高,随着时间的延长,两组小鼠肺泡巨噬细胞的凋亡率呈现逐渐降低趋势。结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株感染小鼠组,感染小鼠的肺泡巨噬细胞的凋亡率明显高于卡介苗菌株(BCG)感染小鼠组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:感染小鼠的肺泡巨噬细胞的凋亡率与结核分枝杆菌的毒力强弱呈正相关。
- 董江涛徐芳田玺择姚楠吴芳章乐王远志曹旭东张万江
- 关键词：结核分枝杆菌肺泡巨噬细胞凋亡
- 卡介苗菌株Hsp16.3基因打靶载体的构建及鉴定
- 2012年
- 目的构建卡介苗菌株Hsp16.3基因打靶载体。方法体外培养卡介苗菌株并提取基因组DNA,扩增Hsp16.3基因两侧序列5'-Hsp16.3和3'-Hsp16.3,分别插入到pKO质粒载体预定位点中构建Hsp16.3基因置换型打靶载体,筛选并进行PCR、双酶切鉴定及测序鉴定。结果构建的卡介苗菌株Hsp16.3基因打靶载体,经PCR、双酶切鉴定及测序证实pKO质粒中的2个插入片段为所需目的基因。结论成功构建出卡介苗菌株Hsp16.3基因打靶载体。
- 田玺择徐芳董江涛姚楠吴芳章乐曹旭东张万江
- 关键词：基因敲除HSP16.3卡介苗
- 结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3基因缺失突变菌株对感染小鼠肺泡巨噬细胞凋亡率的影响及其时相性变化被引量：3
- 2013年
- 探讨结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3基因缺失突变菌株对感染小鼠肺泡巨噬细胞凋亡率的影响及其时相性变化。用激光共聚焦显微镜技术检测及鉴定结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞,流式细胞术检测不同时期感染小鼠肺泡巨噬细胞凋亡率,比较结核分枝杆菌Hsp16.3基因缺失突变株与正常株感染小鼠肺泡巨噬细胞凋亡率的时相性变化。激光共聚焦显微镜检测结果显示:结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株、结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株Hsp16.3基因缺失突变株(△H37Rv)、卡介苗菌株(BCG)以及卡介苗株Hsp16.3基因缺失突变株(△BCG)均被小鼠肺泡巨噬细胞大量吞噬。流式细胞技术检测结果显示:小鼠感染△H37Rv菌株后,巨噬细胞的凋亡率逐渐上升,至感染7d时达到高峰,随后逐渐降低,1～7d内,各时间段△H37Rv感染组巨噬细胞凋亡率均显著高于H37Rv感染组,9～11d内,△H37Rv感染组巨噬细胞凋亡率反而低于H37Rv菌株组,但13～15d内,△H37Rv感染组巨噬细胞凋亡率又呈现出比H37Rv感染组高的现象,差异均有统计学意义(P<0.05)。△BCG组凋亡率1～7d内呈现明显下降趋势,7d后巨噬细胞凋亡率变化趋于平稳,且1～5d内,△BCG组凋亡率显著高于BCG组(P<0.05),7～15d内,△BCG组与BCG组巨噬细胞凋亡率无明显差异。结果表明:与结核分枝杆菌H37Rv株野生株相比,结核分枝杆菌H37Rv株Hsp16.3基因缺失突变株在感染的早期和晚期对小鼠肺泡巨噬细胞有更强的致凋亡作用,而这种致凋亡作用与结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3基因的缺失相关,说明在结核分枝杆菌感染的早期和晚期,结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3的表达能够抑制宿主巨噬细胞的凋亡。
- 赵小杰黄晓艳庹清章董江涛田玺择刘云霞董伟杰刘丹霞李微吴芳章乐张万江
- 关键词：结核分枝杆菌缺失突变凋亡
- 结核杆菌Hsp16.3基因缺失突变株的构建及鉴定
- 目的：构建及鉴定结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株Hsp16.3基因缺失突变株、结核分枝杆菌国际标准无毒株H37Ra菌株Hsp16.3基因缺失突变株和卡介苗菌株Hsp16.3基因缺失突变株。为进一步研究Hsp16....
- 田玺择
- 关键词：结核分枝杆菌同源重组
- 文献传递
- 基因敲除技术在结核病研究中的应用
- 2011年
- 1989年,美国科学家Capecchi[1]通过研究胚胎干细胞同源重组原理获得的基因敲除小鼠取得成功,因此,Capec-chi与美国科学家Smithies、英国科学家Evans共同分享了2007年诺贝尔生理学或医学奖,成为基因敲除研究史上的又一里程碑。经过20多年的不断发展,
- 田玺择张万江
- 关键词：基因敲除技术诺贝尔生理学或医学奖结核病基因敲除小鼠胚胎干细胞EVANS
- 结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞诱导结核分枝杆菌小分子热休克蛋白HSP16.3分泌表达模型的建立及鉴定被引量：4
- 2012年
- 为了建立及鉴定结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞诱导结核分枝杆菌小分子热休克蛋白HSP16.3分泌表达的模型。采用将0.3mL浓度约为1.0×107个/mL结核分枝杆菌菌悬液经昆明小鼠尾静脉注射,复制结核分枝杆菌感染小鼠模型,经鉴定小鼠感染模型复制成功后第15天,进行小鼠肺泡的灌洗,收集小鼠肺泡灌洗液,获取感染小鼠肺泡巨噬细胞,以提取的感染小鼠肺泡巨噬细胞内的结核分枝杆菌基因组DNA为模版PCR扩增结核分枝杆菌小分子热休克蛋白HSP16.3的基因,同时进一步利用激光共聚焦显微镜观察小鼠肺泡巨噬细胞的方法进行研究。PCR结果证实感染结核分支杆菌的巨噬细胞内有结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3的基因表达;同时激光共聚焦显微镜下可见感染小鼠肺泡巨噬细胞内吞噬有大量结核分枝杆菌,并且证实有结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3的分泌表达。成功建立了结核分枝杆菌感染小鼠肺泡巨噬细胞诱导结核分枝杆菌小分子热休克蛋白HSP16.3分泌表达的模型。
- 董江涛徐芳田玺择姚楠吴芳章乐王远志曹旭东张万江
- 关键词：结核分枝杆菌
- 结核分枝杆菌Hsp16.3表达与感染小鼠肺泡巨噬细胞凋亡的关系被引量：3
- 2014年
- 目的探讨结核分枝杆菌（MTB）小分子热休克蛋白Hspl6．3表达与感染小鼠肺泡巨噬细胞凋亡的关系。方法分别将MTB国际标准强毒株H37Rv株Hspl6．3基因缺失突变菌株（△H37Rv）、结核杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株（H37Rv）以及无菌生理盐水溶液（空白对照）通过小鼠尾静脉注入小鼠体内以建立小鼠的感染模型，并在感染后的1、3、5、7、9、11、13、15d分离及鉴定小鼠肺泡巨噬细胞，用激光共聚焦显微镜技术检测及鉴定MTB感染小鼠肺泡巨噬细胞；流式细胞术检测不同时间点感染小鼠肺泡巨噬细胞的凋亡率；Westernblot技术检测小鼠肺泡巨噬细胞内半胱天冬酶-3（Caspase-3）和B细胞淋巴瘤／白血病-2（Bel-2）蛋白的表达。结果△H37Rv菌株感染组和H37Rv菌株感染组凋亡率均高于空白对照组，△H37Rv组的巨噬细胞凋亡率在感染1-7d内逐渐升高，至感染7d时达到高峰，随后呈下降趋势，与H37Rv组相比，1-7d及13-15d，△H37Rv组的巨噬细胞凋亡率高于H37Rv组，差异有统计学意义（P〈0．05）；H37Rv组和△H37Rv组的巨噬细胞Caspase-3和Bcl2蛋白表达水平均高于空白对照组；l-7d内，H37Rv感染组和△H37Rv感染组的巨噬细胞Caspase-3表达水平逐渐升高，至第7天达到高峰，且△H37Rv感染组在第13天时出现第二次高峰，但Caspase-3表达水平均高于H37Rv感染组，差异有统计学意义（P〈0．05）；在感染的早期（1-7d），△H37Rv感染组Bcl-2的表达水平无明显变化（P〈o．05），但在9d后逐渐升高；H37Rv感染组巨噬细胞内Bcl-2的表达水平1-7d内无明显变化（P〈O．05），7d后逐渐升高，但△H37Rv感染组Bcl-2的表达水平始终低于H37Rv组且7d后表现更为显著。结论在MTB感染的早期和晚期，MTB小分子热休克蛋白Hspl6．3的表达能够有效抑制小鼠肺泡巨噬细胞的凋亡，而这种抑制作用可能是通过抑制凋亡蛋白酶Caspase-3的表�
- 庹清章董江涛田玺择刘云霞董伟杰刘丹霞李微吴芳章乐张万江
- 关键词：结核分枝杆菌肺泡巨噬细胞CASPASEBCL-2
