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人肠道内Faecalibacterium prausnitzii的分离、鉴定及优良菌株筛选研究被引量：5: 2018年; 本研究通过特异性引物PCR、ERIC-PCR指纹图谱,从一健康人体肠道内筛选到20种ERIC类型的分离物。选取不同ERIC类型的代表菌株进行16S r RNA全长基因测序并在NCBI中进行BLAST,发现15种代表菌株的16S r RNA基因序列与库中的普拉梭菌（Faecalibacterium prausnitzii）相似性均达到97%以上,初步将这些代表菌株鉴定为普拉梭菌。为了筛选出与人体健康具有密切相关性且生物学活性强的优良菌株,通过综合分析15种ERIC类型的分离物的分离丰度及遗传距离,从鉴定出的15株代表菌株中挑选了7株候选优良菌株,进行胆汁酸盐耐受、丁酸盐产生和对肠屏障功能的障影响等评价。研究表明：胆汁酸盐浓度高于0.1%时,F18、F22、F109和F139菌株仍然可以生长,表现出较强的耐胆汁酸能力;菌株间产丁酸盐能力差异显著,F31的丁酸盐产量最高,其次为F18、F20、F33和F139,且这4株菌株间产丁酸盐能力无显著差异;菌株F31使肠屏障功能受损,而其他菌株无明显影响。综合实验数据,筛选出F18和F139为优良菌株。本研究成功实现了普拉梭菌的分离鉴定及优良菌株筛选,为后续的体内实验研究提供了重要研究基础。; 方超徐佳李娜张晓君申剑赵宇峰; 关键词：丁酸盐肠屏障

膳食诱导肥胖大鼠模型的肠道菌群结构及其特异分子标识物被引量：3: 2009年; 目的通过对膳食诱导肥胖(Diet Induced Obesity,DIO)大鼠与健康对照组大鼠的肠道菌群结构的分析比较,寻找造成2组大鼠菌群结构差异的分子标识物,探讨肠道菌群的组成和结构与宿主肥胖之间的关系。方法ERIC-PCR结合Southern-blot得到肠道菌群基因组指纹图谱,利用Southern-blot与多元统计方法(PCA、PLS等)找出差异条带,回收差异条带进行测序,根据序列设计特异性引物,以定量PCR法对结果进行验证。结果ERIC-PCR图谱表明膳食诱导肥胖大鼠在肠道菌群结构上与正常大鼠存在着较大的区别;根据杂交结果找到一段基因组DNA片段为膳食诱导肥胖大鼠组所特有,定量分析表明该DNA片段在2组大鼠间区别明显。结论膳食诱导肥胖大鼠所特有的一段基因组DNA片段可作为肥胖大鼠肠道的特征分子标识物,该标识物有望用于膳食诱导肥胖的机制研究中。; 张翼张晨虹申剑李后开倪艳张晓君赵立平庞小燕; 关键词：肥胖高脂膳食 ERIC-PCR 肠道菌群

一种苦荞麦凝集素的制备方法和应用: 本发明提供了一种苦荞麦凝集素(Tartaty Buckwheat Lectin，TBL)的制备方法，以及该蛋白在制备抗肿瘤药物中的应用。其制备方法是将苦荞麦种子粉碎，加入蛋白提取液低温提取，随后加入硫酸铵沉淀蛋白，再经过...; 崔晓东王转花贾乔瑾申剑; 文献传递

T-RFLP技术在人肠道柔嫩梭菌类群的组成分析中的应用被引量：3: 2009年; 目的建立能快速筛查和比较大规模人群肠道中柔嫩梭菌类群组成结构的T-RFLP(末端限制性片段长度多态性)。方法采用T-RFLP技术特异性地分析柔嫩梭菌类群的组成,考察该方法的重复性和灵敏度。用该方法对15个志愿者肠道中的柔嫩梭菌类群进行分析,并与DGGE方法分析的结果进行对比。结果T-RFLP方法重复性高,最低能检测到群落中1%的细菌,其结果与DGGE的分析结果具有较好的一致性。结论本研究建立的柔嫩梭菌类群特异性的T-RFLP方法能够对大量肠道样品中柔嫩梭菌类群的结构进行快速、有效的筛查和比较。; 柳欣源申剑王婷婷李旻赵立平庞小燕; 关键词：T-RFLP 多样性

副血链球菌F278及其用途: 本发明提供一种副血链球菌F278，其保藏号为CGMCC No.17578。副血链球菌F278为发明人采集的人母乳灌胃给在无菌包中生长的8周龄无菌小鼠，隔天用同样的母乳给每只小鼠进行二次灌胃。灌胃结束后继续在无菌包中饲养小...; 申剑李娜

唾液链球菌F286及其用途: 本发明提供一种唾液链球菌F286，其保藏号为CGMCC No.17579。本发明中唾液链球菌F286为发明人采集的人母乳灌胃给在无菌包中生长的8周龄无菌小鼠，隔天用同样的母乳给每只小鼠进行二次灌胃。灌胃结束后继续在无菌包...; 申剑李娜; 文献传递

两种粪便保存方法对肠道菌群结构研究的影响被引量：3: 2009年; 目的比较2种粪便保存方法（室温法和Invitek公司的粪便稳定剂保存法）对菌群结构研究的影响。方法应用PCR-变性梯度凝胶电泳技术（PCR-DGGE）方法，对用2种方法保存的3位志愿者粪便样品进行菌群结构的分析。结果室温法保存粪便样品24h后，S1个体菌群结构与原始样品的菌群结构相似度为83％，S2和S3的菌群结构与其原始样品的相似度仅为77％。而使用粪便稳定剂保存1d，期间各时间点样品菌群结构与原始样品相比变化较小，相似度在80％-90％。结论粪便稳定剂具有一定的稳定样品菌群结构的作用，在新鲜粪佰样品不能寺刻讲行深冻的情况下,使用粪便稳定剂是一种较好的样品保存方法。; 袁军李旻申剑赵立平庞小燕; 关键词：菌群结构 PCR DGGE

苦荞凝集素的纯化及性质鉴定被引量：7: 2015年; 目的:从苦荞麦种子中提取、纯化苦荞凝集素,对其凝血及酶学活性等性质进行初步研究。方法:采用缓冲液抽提、硫酸铵沉淀、透析及DEAE-纤维素阴离子交换层析(DEAE fast flow,DEAE FF纯化凝集素;高碘酸希夫(periodic acid-Schiff,PAS染色鉴定其蛋白种类,硫酸-苯酚法测定糖含量;凝血实验和糖抑制实验检测其凝血活性和结合糖特异性;以对硝基苯磷酸二钠为底物,测定磷酸酯酶活性。结果:从苦荞麦种子中获得了一种具有凝血功能的蛋白质——苦荞凝集素(tartary buckwheat lectin,TBL)。纯化的TBL在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE图谱上显示单一条带,根据SDS-PAGE计算其分子质量约为62 kD。PAS染色证明TBL为糖蛋白,糖含量为5.8%。凝血实验表明TBL对人的O型血红细胞具有特异性凝集作用,效价为15μmL对其他血型的红细胞没有凝血效应。血凝活性被D甘露糖和D-葡萄糖抑制,推测其是一种甘露糖结合凝集素。酶学性质鉴定显示,TBL具有磷酸酯酶活性,米氏常数Km=9.86×10-3 mol/L。结论:TBL可能是苦荞麦种子中的一种具有多种酶学功能的甘露糖凝集素。; 申剑崔晓东李玉英王转花; 关键词：苦荞凝集素糖蛋白磷酸酯酶

哺乳期过度喂养对幼鼠肥胖和肠道菌群结构的影响被引量：2: 2013年; 目的研究哺乳期过度喂养对幼鼠肠道细菌组成的影响以及肠道细菌与哺乳期过度喂养导致的幼年肥胖的相关性。方法将正常出生体重的4日龄雄性ICR仔鼠分为正常喂养组(NF组,每8只由1只母鼠喂养)和哺乳期过度喂养组(OF组,每4只由1只母鼠喂养),哺乳至3周龄时,对仔鼠进行口服糖耐量试验(OGTT),称量体重、各种器官和脂肪组织的重量,用基于细菌16S rRNA基因的变性梯度凝胶电泳(DGGE)和实时定量PCR分析仔鼠的粪便细菌组成,对细菌类群数量与表型数据进行相关分析。结果 OF组仔鼠从10日龄起体重显著高于NF组,3周龄时附睾和肾周脂肪垫重量显著高于NF组,两组仔鼠的空腹血糖以及OGTT血糖曲线下面积比较差异无统计学意义。对DGGE图谱的主成分分析表明两组仔鼠的菌群结构比较差异有统计学意义。定量PCR显示,OF组仔鼠粪便中产生内毒素的肠杆菌科细菌和产生破坏肠屏障功能的H2S的硫酸盐还原菌的数量显著高于NF组,而双歧杆菌、乳杆菌和丁酸盐产生菌的数量在两组仔鼠之间差异无统计学意义。粪便硫酸盐还原菌的数量与内脏脂肪的重量显著正相关。结论哺乳期过度喂养增加了肠道中肠杆菌科细菌和硫酸盐还原菌的数量,这些细菌的增加与仔鼠幼年期肥胖相关。; 唐璜王京晶吴欢赵宇峰张旭申剑; 关键词：肥胖肠道菌群

唾液链球菌F286及其用途: 本发明提供一种唾液链球菌F286，其保藏号为CGMCC No.17579。本发明中唾液链球菌F286为发明人采集的人母乳灌胃给在无菌包中生长的8周龄无菌小鼠，隔天用同样的母乳给每只小鼠进行二次灌胃。灌胃结束后继续在无菌包...; 申剑李娜

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申剑

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