符瑞佳 作品数:15 被引量:20 H指数:3 供职机构: 海南医学院 更多>> 发文基金: 广西壮族自治区自然科学基金 国家自然科学基金 海南省高等学校科学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
抗病毒药物细胞筛选模型与药效评估服务平台的建立 尹飞飞 邓菲 陈锦龙 崔秀吉 符瑞佳 张优 王珊珊 海南省拥有独特的热带动植物、海洋生物资源,尤其是“南药”资源和民族医药经验丰富,抗病毒药物成分的筛选对南药产品的开发及带动传统医药产业的发展具有重大的现实意义。该项目将在现有的病毒学研究基础上,建立针对5种病毒的抗病毒药...关键词:关键词:天然药物 抗病毒药物 曼氏迭宫绦虫异柠檬酸脱氢酶的基因克隆、蛋白表达及其在裂头蚴阶段的转录水平检测分析 2022年 目的利用生物信息学方法识别和分析曼氏迭宫绦虫异柠檬酸脱氢酶(SmNAD-IDH)核苷酸序列及生物学特征;克隆该基因并诱导蛋白表达,分析其在裂头蚴阶段的转录水平。方法利用生物信息学在线分析工具对SmNAD-IDH基因的核苷酸序列进行识别,预测分析氨基酸序列的理化性质。分别以曼氏迭宫绦虫裂头蚴cDNA、孕节cDNA和成节cDNA作为模板PCR扩增目的基因,扩增产物与表达载体pET-30a重组后转化至BL21细胞中诱导蛋白表达。利用real time PCR技术分析裂头蚴阶段三羧酸循环中3个关键代谢酶的转录水平。结果BLASTx分析SmNAD-IDH基因全长1095 bp,编码蛋白由356个氨基酸组成。该基因与其他寄生虫同源基因核苷酸序列一致性>70%,与人类同源基因核苷酸序列一致性为51%。该蛋白的理论等电点为6.84,分子质量为40 ku,并且氨基酸序列中无信号肽和跨膜区,为脂溶性稳定的胞内蛋白。SmNAD-IDH在裂头蚴、成节、孕节中均有表达,在裂头蚴阶段三羧酸循环中的关键酶柠檬酸合成酶、酮戊二酸脱氢酶、SmNAD-IDH均有转录,以SmNAD-IDH的转录水平较高。结论成功重组SmNAD-IDH基因并诱导SmNAD-IDH蛋白表达,该蛋白对于曼氏迭宫绦虫,尤其是裂头蚴,是具有潜在研究价值的重要代谢酶。 梁鹏 张园元 符瑞佳 王大勇 王大勇关键词:曼氏迭宫绦虫 基因克隆 蛋白表达 转录水平 人芽囊原虫感染小鼠血清中IL-17水平的动态观察 被引量:2 2012年 目的观察小鼠感染人芽囊原虫后血清中白细胞介素17(IL-17)水平的动态变化,从细胞因子的角度来探讨IL-17在人芽囊原虫感染中的意义。方法 BABL/C小鼠120只随机分为实验组、免疫抑制剂组、对照组,每组各40只,三组小鼠分别于感染后第2d、3d、4d、5d、6d、7d、8d、10d、12d、14d各取4只,采用ELISA试剂盒检测小鼠血清中IL-17水平。结果免疫抑制剂组和对照组小鼠血清中IL-17的含量在不同感染时期基本处于稳定水平(P>0.05),而感染后不同时期的实验组小鼠血清IL-17水平出现升高,差异有统计学意义(P<0.05),其中第4d、5d、6d的表达分别高于免疫抑制剂组和对照组(P<0.05),且第5d达到高峰。结论提示了IL-17可能在人芽囊原虫早期感染中发挥了重要作用。 符瑞佳 伍玲园 卢作超 唐莉莉 刘腾 张璠 刘登宇关键词:人芽囊原虫 白细胞介素17 血清 广西医科大学在校大学生人芽囊原虫感染情况调查 被引量:7 2011年 目的:了解广西医科大学在校大学生人芽囊原虫(Blastocystis hominis,B.h)的感染情况。方法:应用酸醚离心沉淀法粪检,抽查3个年级共1 433人,统计分析民族、性别、生源地、不同年级组别之间B.h感染率。结果:广西医科大学在校大学生B.h平均感染率为14.93%;汉族感染率13.48%,壮族感染率18.38%,其他民族感染率为17.24%。各年级感染率最低为13.19%,最高达16.28%。男性感染率为14.74%;女性感染率为15.06%。广西本地生源感染率为15.06%;外地生源感染率为13.94%。结论:广西医科大学在校大学生B.h感染率较高,并且存在校内感染的可能性。壮族学生B.h感染率高于汉族。 刘腾 刘晓泉 石焕焕 何姗姗 王鸽 符瑞佳 林俊仪 罗宝花 韦祎 陈曦 易乾彦 邹齐关键词:人芽囊原虫 大学生 感染率 一种基于液相基因芯片技术对甲型和乙型流感病毒分型检测方法的建立 被引量:3 2017年 目的建立能够对甲型流感病毒(influenza virus A,INFA)和乙型流感病毒(influenza virus B,INFB)进行区分的液相基因芯片技术,为甲型和乙型流感病毒的分型提供一种高通量、高灵敏度的检测和鉴定方法。方法从NCBI的Gen Bank下载具有代表性的流感病毒基因组序列,利用生物信息学软件Bio Edit进行序列比对,分别设计针对INFA和INFB的简并引物和特异性探针,将设计好的引物和探针与Gen Bank中所有的基因序列进行比对,以验证其特异性。经探针合成、悬浮液相芯片制备和检测条件的优化获得用于甲型和乙型流感病毒分型的液相基因芯片。结果所检测INFA和INFB均可获得特异性杂交信号,非特异性杂交信号不明显,将2种病毒混合,模拟混合病毒感染也可以得到相应的特异性杂交信号。灵敏度评估结果表明INFA的检测灵敏度为1~10空斑形成单位(plaque forming unit,pfu),而INFB为10~100 pfu。将本方法用于检测11份临床样本,其结果与荧光定量分型逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测方法的结果一致。结论本研究初步建立了INFA和INFB的液相基因芯片检测技术,可用于流感病毒的初步筛查和鉴定,并且可以进行混合感染样本的检测,为流感病毒的分型和鉴定提供了一种新的手段。 陈锦龙 吕刚 张优 符瑞佳 尹飞飞关键词:甲型流感病毒 乙型流感病毒 人芽囊原虫在IMDM单相培养基中的体外培养效果观察 被引量:5 2010年 目的观察IMDM(Iscove's Modified Dulbecco's Medium)单相培养基对人芽囊原虫(Blastocystis hominis,B.h)的体外培养情况。方法采用IMDM单相培养基对B.h进行体外连续培养,比较不同pH值、血清浓度及接种量等条件下虫体生长繁殖情况及影响因素。结果 B.h在IMDM培养基中最适培养条件为:pH值7.0-8.0;新生牛血清含量大于10%;接种量不小于1×105个原虫/管;青、链霉素1万单位/mL,于37℃条件下厌氧培养,每3-6天转种1次,可以达到长期培养效果。结论 IMDM单相培养基更适合B.h的生长繁殖,可以用于诊断及体外长期培养。 唐莉莉 卢作超 战廷正 符瑞佳 伍玲园 刘登宇关键词:人芽囊原虫 体外培养 影响因素 用于SFTSV等八种病原体联检的组合物及检测方法 本发明涉及微生物核酸的测定方法,特别地,本发明提供了一种用于联合检测八种病原体的引物和探针组合物和检测方法,这八种病原体包括莫氏立克次体、Q热立克次体、恙虫病东方体、埃立克体、斑点热群立克次体、无形体、荆门病毒和新布尼亚... 尹飞飞 田秀颖 肖美芳 黄艺 唐川宁 王高玉 彭箬岩 梁培 符瑞佳 邓宛心曼氏迭宫绦虫翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)生物学功能的研究 符瑞佳 胡海岩 梁培 范志刚 许可 夏乾峰 研究发现:重组蛋白Sm TCTP主要定位于曼氏迭宫绦虫成虫的生殖系统上,其引发的信号传递可能对曼氏迭宫绦虫生殖系统的发育和功能有着重要的调控作用,提示该蛋白具有作为抗曼氏迭宫绦虫药物靶标的潜能。该项研究为探讨绦虫生殖发育...关键词:关键词:曼氏迭宫绦虫 生殖系统 药物治疗 曼氏裂头蚴糖原磷酸化酶的生物学特性分析及功能域克隆、表达 被引量:1 2021年 目的通过生物信息学软件分析曼氏裂头蚴(Sparganum mansoni,Sm)糖原磷酸化酶(glycogen phosphorylase,GP)的生物学特性,并对SmGP功能域(fSmGP)进行基因克隆及蛋白原核表达。方法利用生物信息学相关软件,分析Sm GP基因的生物信息学特征。通过PCR扩增得到功能域序列片段,克隆至原核表达载体pET-28α,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达fSmGP,并对表达蛋白进行western blot鉴定。结果Sm GP蛋白由519个氨基酸残基组成,相对分子质量为59.80 kDa,等电点为6.95,由C、H、N、O、S 5种原子组成。SmGP的序列与其他物种的氨基酸序列一致性在70%以上。其氨基酸序列中具有32个磷酸化位点、10个潜在的B细胞表位和15个潜在的T细胞表位。在二级结构中,以α螺旋为主,三维空间结构分析显示以二聚体形式存在,且分子中的功能位点空间分布集中。PCR、双酶切鉴定、测序结果均表明pET-28α-fSmGP的功能区重组质粒构建成功;western blot结果显示成功诱导fSmGP蛋白表达。结论SmGP属于Glycosyltransferase-GTB-type超基因家族,是一个高度保守的蛋白分子,但在蛋白分子的C端是功能区域较为集中和表位集中的区域,表达该功能域为后续对fSmGP免疫学分析等实验提供了指导,同时也为研究曼氏裂头蚴的糖代谢规律奠定了一定基础。 谭钦月 王清吟 符瑞佳 符瑞佳 周晓君 王妹妹 林于金 吕刚 吕刚关键词:曼氏裂头蚴 生物信息学分析 原核表达 一种寨卡病毒的检测引物及应用 本发明提供了一种寨卡病毒的检测引物及应用,属于医学检验领域。本发明提供的寨卡病毒检测引物能准确地、特异的检测出寨卡病毒,浓度低至1×10<Sup>1</Sup>拷贝/μL依然能检测出,具有较高的灵敏度;应用该检测引物检测... 吕刚 朱奇轩 尹飞飞 张优 吴悦 王珊珊 陈锦龙 符瑞佳 李奕基文献传递