范瑾
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：山西高校科技研究开发项目山西省科技攻关计划项目上海市科技兴农重点攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 麻鸡脾脏总RNA提取方法初探被引量：1
- 2010年
- 为了从麻鸡脾脏组织中提取出纯度高、完整性好的总RNA,将约80,120,140 mg的麻鸡脾脏组织分别与1 mL的RNAisoPlus混合,采用RNAisoPlus法进行提取。从提取出的RNA琼脂糖凝胶电泳图谱可知,当脾脏组织用量约140 mg时,RNA几乎全部降解;当脾脏组织用量约120 mg时,RNA降解严重;当脾脏组织用量控制在约80 mg时,提取出的RNA电泳图谱为清晰的3条带,分别为5 S,18 S,28 S,且A260/A280=1.982。上述结果表明,用1 mL的RNAiso Plus,并且把脾脏组织用量控制在80 mg左右时,可提取出纯度高、完整性好的总RNA。
- 陈书明常云花梁新峰曹新鹏范瑾
- 关键词：麻鸡脾脏总RNA
- 鸡传染性支气管炎病毒RT-LAMP检测方法的建立及S1蛋白T细胞表位的筛选
- 由传染性支气管炎病毒(IBV)引起的鸡传染性支气管炎(IB)是一种急性、高度接触性传染病,可引起各日龄鸡感染,是影响养禽业发展的主要疫病之一。IBV属冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属,该病毒血清型众多,...
- 范瑾
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒核酸疫苗
- 文献传递
- 鸡IBV S1蛋白的CD8+T细胞抗原表位多肽
- 本发明提供了鸡IB病毒S1蛋白的通用性CD8+T细胞抗原表位多肽，属于基因和蛋白质工程领域。本发明根据单倍型鸡MHC I类分子的结合基序，在IBV病毒的S1基因氨基酸序列中筛选符合结合基序列的表位多肽21条；然后用构建的...
- 丁铲谭磊仇旭升宋翠萍孙英杰于圣青范瑾
- 文献传递
- 传染性支气管炎病毒RT-LAMP检测方法的建立被引量：1
- 2012年
- 为建立一种快速、灵敏、特异的检测传染性支气管炎病毒(IBV)的逆转录-环介导等温扩增方法(RT-LAMP),针对IBV毒株保守性N蛋白设计4对LAMP特异性引物,以RNA为模板,在Bst DNA聚合酶作用下恒温反应,对不同型IBV、新城疫病毒、禽流感病毒和鸡滑液支原体进行特异性分析,并与普通RT-PCR进行灵敏性比较。结果表明RT-LAMP法在30min就能够特异性鉴定出不同型别的IBV,且灵敏度是普通RT-PCR的107倍,反应结果可眼观判断。本研究建立的IBV RT-LAMP检测方法具备耗时短、灵敏度高、简单易行等特点,在实验室快速诊断中是一种检测IBV的有效方法。
- 范瑾谭磊仇旭升孟春春包世俊胡美容何随彬郭小琴于圣青陈书明丁铲
- 关键词：传染性支气管炎病毒
- 鸡IBV S1蛋白的CD8+T细胞抗原表位多肽
- 本发明提供了鸡IB病毒S1蛋白的通用性CD8+T细胞抗原表位多肽，属于基因和蛋白质工程领域。本发明根据单倍型鸡MHC I类分子的结合基序，在IBV病毒的S1基因氨基酸序列中筛选符合结合基序列的表位多肽21条；然后用构建的...
- 丁铲谭磊仇旭升宋翠萍孙英杰于圣青范瑾
- 文献传递
- 鸡传染性支气管炎病毒多表位核酸疫苗的构建及其免疫研究被引量：4
- 2015年
- 应用筛选出的鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)结构蛋白S1基因的T细胞抗原表位盒、Australia T株和M41株S1基因的B细胞抗原表位,定向克隆入真核表达载体p VAX1,构建成5个真核表达质粒:p VAX-S1T+M、p VAXS1B-M41、p VAX-S1B-T、p VAX-S1T+S1B-M41、p VAX-S1T+S1B-T。将每组提取制备的质粒溶液通过腿部肌肉多点注射免疫7日龄SPF雏鸡,28日龄时加强免疫1次,同时设立PBS组作为对照免疫组。分别在首免前及免疫后7、14、21 d以及二免后10 d翅静脉采血并分离血清,用间接ELISA方法检测抗体效价。二免后10 d用IBV病毒液攻毒测定保护率。ELISA抗体效价结果显示:二免后10 d各免疫组抗体水平达到最高,p VAX-S1B-T、p VAX-S1T+S1B-M41和p VAX-S1T+S1B-T组与PBS组相比差异均具有显著统计学意义(P<0.05),p VAX-S1、p VAX-S1T+M和p VAX-S1B-T组与PBS组相比差异具有极显著统计学意义(P<0.01)。攻毒结果表明,p VAX-S1、p VAX-S1B-T组的保护效率均为75%,高于PBS组(12.5%),表明表位抗原成分能够有效发挥保护效力,与S1全基因疫苗组保护率相当。本研究结果为研制安全有效的新型IBV疫苗提供了新的途径。
- 刘芳谭磊陆凤范瑾刘开春王欣廖瑛仇旭升孙英杰宋翠萍王桂军丁铲
- 关键词：传染性支气管炎病毒抗原表位核酸疫苗免疫研究
