谢长林
- 作品数：6 被引量：8H指数：1
- 供职机构：安徽农业大学更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 亲和层析法分离纯化油茶籽多糖Ⅰ的研究被引量：8
- 2012年
- 根据油茶籽多糖Ⅰ所拥有的特异性磷酸基团,运用固化金属离子亲和层析法获得合适的金属螯合剂,使得具有一定降血脂作用的油茶籽多糖Ⅰ能特异性的被结合到琼脂糖凝胶上,从而获得纯度较高的油茶籽多糖Ⅰ。通过试验对亲和层析法在提取过程中的使用条件进行优化,得到最适pH以及离子类型。此外,试验将传统方法与亲和层析法进行比较,其对油茶籽多糖Ⅰ的纯化效果,尤其在去蛋白方面,后者能更有效地去除油茶籽多糖Ⅰ里残留的蛋白质。
- 王海林王春艳谢长林文汉
- E.coliT蛋白CM的原核表达及核磁方法指导下的晶体优化
- 2013年
- 越来越多的研究表明许多致病菌的病原性与生物体内莽草酸途径中的分支酸变位酶(chorismate mutase,CM)有着密切的关系,因此CM成为了开发新型抗生素和抗菌药物的热门靶标酶。采用分子克隆的方法,在感受态细胞BL21-Gold(DE3)中重组表达大肠杆菌(E.coli)T蛋白的CM(CM T)。通过Ni-NTA亲和层析柱、GE Superdex75凝胶过滤层析柱和GE MonoQ阳离子交换层析柱纯化后得到电泳纯的重组蛋白,质谱鉴定结果与原始序列基本吻合。经过蛋白质晶体试剂盒的初步筛选,在30%PEG 4000,100mmol/L NaAc pH4.6,200mmol/L NH4Ac条件中发现CM T晶体。利用核磁共振方法,分析CM T的1H-15N HSQC谱图信息,指导设计CM T晶体的优化方案,成功获得高衍射能力的CM T晶体,为CM T结构的解析奠定了坚实的基础。
- 芮斌谢长林江娜文汉
- 关键词：CMT原核表达HSQC
- 刀豆氨酸的提取及测定方法的优化
- 2012年
- 研究刀豆氨酸的提取及2,4-二硝基氟苯与刀豆氨酸在pH9.5硼砂缓冲溶液中反应的最佳条件,进而优化测定刀豆氨酸的方法。运用分光光度法测定2,4-二硝基氟苯与刀豆氨酸的络合物在571nm处的吸光值。结果表明,刀豆氨酸水提取法效果最好,DNFB-乙腈的用量为30μL时,刀豆氨酸与DNFB反应的络合物在571nm处有最大吸收值。在30min内稳定以后该络合物的OD值随着时间的增长而增加,对应线性回归方程为y=0.0083x-0.052,相关系数R2=0.9986。
- 王春艳王海林谢长林文汉
- 关键词：刀豆氨酸分光光度法
- 人源Arap3r PH-Arfgap人源EEA6A的See7及E.蛋白CM结构域的结构研究
- 小GTP酶是一类单体的G蛋白,通过在活性态和非活性态之间的转换,参与细胞信号的调控。GTP酶激活蛋白(GTPase–activatingproteins,GAPs)和GTP酶鸟苷酸交换因子(Guanine-nucleot...
- 谢长林
- 文献传递
- 人源EFA6A蛋白Sec7结构域的克隆表达与纯化
- 2013年
- 作为小GTP酶Arf6的鸟甘酸交换因子(GEF),人EFA6A蛋白主要包含PH和Sec7两个结构域,Sec7是行使GEF功能的核心区域。通过分析Jpred、Uniprot等生物信息学软件的预测结果,从全长1 024 aa中选取的重组Sec7结构域的边界为506-719,共214 aa。以人脑cDNA文库为模板,通过优化PCR程序成功扩增出Sec7基因,经NdeI和XhoI双酶切后亚克隆至原核表达载体p28a中,成功构建p28-Sec7重组子,测序结果与NCBI中公布的序列100%吻合。将重组质粒p28-Sec7转化至BL21-Gold(DE3)宿主菌中,终浓度0.3 mmol/L IPTG、16℃、24 h诱导表达,重组蛋白经过Ni柱和分子筛两步纯化。试验结果显示,重组Sec7成功表达,性质均一,纯度高于95%,表达量为70 mg/L。
- 谢长林芮斌江娜赵晨唐雅珺文汉
- 关键词：分子筛
- 人源Arap3的PH-ArfGAP，人源EFA6A的Sec7及E.coli T蛋白CM结构域的结构研究
- 小GTP酶是一类单体的G蛋白，通过在活性态和非活性态之间的转换，参与细胞信号的调控。GTP酶激活蛋白(GTPase–activating proteins,GAPs)和GTP酶鸟苷酸交换因子(Guanine-nucleo...
- 谢长林
- 文献传递
