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小反刍兽疫西藏07株H、F、M、P蛋白在昆虫细胞中的表达: 本研究使用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达小反刍兽疫病毒西藏分离株Tibet07的H、F、M、P四个结构蛋白，并对其进行鉴定。扩增小反刍兽疫病毒Tibet07株H、F、M、P基因，克隆至pFastBac/CT-T...; 赵文年; 关键词：小反刍兽疫病毒杆状病毒表达系统血凝素基质蛋白磷蛋白; 文献传递

小反刍兽疫病毒Tibet 07株F蛋白在昆虫细胞中的表达及其抗原性鉴定: 2014年; 应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)西藏分离株Tibet07的融合蛋白,并对其抗原性进行鉴定。扩增PPRV Tibet 07株融合蛋白基因,克隆至pFastBac/CT-TOPO载体中,构建重组穿梭质粒pFastBacCT-PPRV-F,构建重组杆状病毒Bacmid-PPRV-F,转染sf9细胞,获得重组杆状病毒。通过SDS-PAGE鉴定F蛋白的表达,利用Western blotting和间接免疫荧光鉴定F蛋白的抗原性。表达的F蛋白在分子质量约59ku处可见特异蛋白条带。重组杆状病毒Bacmid-PPRV-F感染的sf9细胞可与抗PPRV阳性血清发生特异性反应。使用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达了PPRV西藏分离株Tibet 07的融合蛋白,为进一步研究其生物学功能及研制小反刍兽疫的亚单位疫苗奠定了基础。; 赵文年王清华刘春菊王淑娟雷程红包静月王志亮; 关键词：小反刍兽疫 F蛋白杆状病毒表达系统

小反刍兽疫07株H蛋白在昆虫细胞中的表达及其抗原性鉴定被引量：4: 2014年; 应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达小反刍兽疫病毒西藏分离株Tibet 07的血凝素蛋白,并对其抗原性进行鉴定。扩增小反刍兽疫病毒Tibet 07株H基因,克隆至p Fast Bac/CT-TOPO载体中,构建重组穿梭质粒p Fast Bac-PPRV-H,转化感受态大肠杆菌DH10BacTM,构建重组杆状病毒Bacmid-PPRV-H,转染sf9细胞,通过异源基因重组获得杆状病毒,通过病毒蚀斑试验检测扩增后病毒滴度。将P3代病毒以0.05MOI感染sf9细胞,通过SDS-PAGE鉴定H蛋白的表达,利用Western blot和间接免疫荧光鉴定H蛋白的抗原性。经过PCR、测序等证明重组杆状病毒Bacmid-PPRV-H构建正确。P2代重组杆状病毒的病毒滴度为1×107。表达的H蛋白在相对分子量约68 k Da处可见特异蛋白条带。感染的sf9细胞可与小反刍兽疫病毒H蛋白的单克隆抗体发生特异性反应。表明Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达了小反刍兽疫病毒西藏分离株Tibet 07的血凝素蛋白,为进一步研究其生物学功能及构建检测ELISA试剂盒奠定了试验基础。; 赵文年包静月王清华刘春菊王淑娟雷程红王志亮; 关键词：小反刍兽疫杆状病毒表达系统

新疆小反刍兽疫疫情诊断被引量：31: 2014年; 2013年12月新疆伊犁州霍城县发生不明山羊疫情,根据临床症状和剖检变化怀疑为小反刍兽疫感染。对3只病死山羊病料、8只患病山羊分泌物棉拭子样品和6只患病山羊血清样品分别进行病原学和血清学检测。利用竞争ELISA试剂盒对6份血清样本进行抗体检测,结果全部为阳性。利用抗原捕获ELISA试剂盒,在11只病羊样品中都检测到小反刍兽疫抗原。利用能特异性检测小反刍兽疫病毒的荧光定量RT—PCR方法,在11只病羊样品中检测到小反刍兽疫病毒核酸。利用特异引物进行PPRV N基因片段RT—PCR反应,从11只病羊样品中检测到PPRV核酸。针对2号样本病原核酸N基因和F基因片段进行序列同源性比较,结果该毒株与西藏流行株序列片段相似性分别为96.5%和97.5%。遗传进化分析,该病原属于谱系4,与巴基斯坦等国流行毒株遗传关系最近。; 王清华刘春菊吴晓东王华王明国王永生田建龙盛卓君林汉亮马伟李林任炜杰王淑娟赵文年包静月王志亮; 关键词：小反刍兽疫小反刍兽疫病毒遗传进化分析

牛布鲁氏菌病血清学调查被引量：1: 2013年; 采用虎红平板凝集试验和微量凝集试验,对345头牛血清进行了布鲁氏菌病抗体检测。结果显示,9头牛抗体呈阳性,阳性率为2.61%,牛布病感染率高,对该病应引起高度重视并应积极采取预防控制措施。; 雷程红赵文年郭芙莉王伊丽舒展吕春华黄杨波吴智年姚刚; 关键词：血清学调查

犬细小病毒性肠炎的诊断被引量：1: 2012年; 犬细小病毒性肠炎，以剧烈呕吐、腹泻和白细胞显著减少为其临床特征，病初发热，精神沉郁，不食，呕吐，腹泻，随着病情的发展，粪便由稀状变为咖啡色或番茄酱色样的血便并带有特殊的腥臭气味。该病发病率高，如果得不到正确诊断和及时治疗，死亡率也高。最近，乌鲁木齐市宠物犬发生疑似细小病毒性肠炎流行，我们结合临床表现，采用两种方法对该病进行了诊断，并对这两种方法做了比较。; 雷程红赵文年樊红春龚晓伟李新鹏马林; 关键词：犬细小病毒性肠炎白细胞番茄酱咖啡色发病率

小反刍兽疫病毒Tibet 07株P蛋白的真核表达及鉴定: 2014年; 为应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达小反刍兽疫病毒西藏分离株Tibet 07的磷蛋白并对其进行鉴定,应用PCR技术扩增小反刍兽疫病毒Tibet 07株P基因片段,克隆至pFastBac/CT-TOPO载体中,构建重组穿梭质粒pFastBac-PPRV-P,进一步构建重组杆状病毒Bacmid-PPRV-P,转染sf 9细胞,获得重组杆状病毒。通过SDS-PAGE鉴定P蛋白的表达,利用Western blot和间接免疫荧光鉴定P蛋白的抗原性。结果表明,表达的P蛋白分子质量约54ku;感染的sf 9细胞可与小反刍兽疫阳性血清发生特异性反应。表明应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功表达了小反刍兽疫病毒西藏分离株Tibet 07的P蛋白,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。; 王清华赵文年刘春菊王淑娟包静月王志亮; 关键词：小反刍兽疫杆状病毒表达系统

新疆规模肉牛养殖场肉牛包虫病感染情况调查: 2013年; 采用间接ELISA法,对270头肉牛血清进行了包虫病抗体检测。结果显示,270头牛抗体阳性率为0%,包虫病为零感染。本次结果说明只要科学饲养,严格规范管理,积极预防,定点屠宰,即使在包虫病流行区域内的家畜也能杜绝包虫病感染。; 雷程红王依丽郭芙莉赵文年姚刚; 关键词：规模养殖场肉牛包虫病血清学调查

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赵文年