郝彦哲 作品数:12 被引量:12 H指数:2 供职机构: 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
慢病毒介导siRNA和细胞内抗病毒因子对HIV抑制作用研究 随着人类免疫缺陷病毒(HIV)在全球蔓延,HIV感染已成为严重危害人类健康的疾病。高效抗逆转录病毒疗法能够显著地改善AIDS患者的症状,但需要终身用药,药物带来累积性毒性,一旦药物治疗失败就会产生耐药性病毒株。另一方面,... 郝彦哲关键词:人类免疫缺陷病毒 慢病毒载体 文献传递 基于一体化系统流感病毒快速检测技术的建立 2024年 目的本研究旨在开发一种快速、准确的流感病毒一体化核酸检测方法。方法设计了针对近年来国内流感病毒主要流行株的特异性引物和探针,将其与提取、扩增试剂和即时检测(point of care test,POCT)系统整合,实现针对流感病毒的核酸提取、反应体系配制、扩增反应和结果判读功能的快速一体化病毒核酸检测流程。使用培养的流感病毒对检测体系进行检测下限测试,并对检测体系进行特异性测试。结果成功设计了甲型和乙型流感病毒的二重扩增引物和探针,实现了500拷贝/ml的检测下限,并通过特异性测试验证了检测试剂对腺病毒、呼吸道合胞病毒等其他呼吸道病原体无交叉反应。本研究建立的基于POCT技术的流感病毒核酸快速检测方法,可以实现在50 min内完成核酸提取、扩增和结果判读检测全流程,同时可以实现检测数据的实时上传。结论开发的基于POCT技术的流感病毒快速检测试剂盒,实现了"样品进、结果出"的便捷操作,适合在基层医疗机构中快速检测流感病毒,具有重要的临床应用价值。 张小山 马晶 郝彦哲 杨靖 侯美伶 李红霞 刘京端 孟号迪 曹玉玺 张晓光关键词:流感病毒 核酸检测 慢病毒介导双shRNA靶向于HIV的抑制作用研究 被引量:1 2013年 RNA干扰可以有效地抑制特定基因的表达,在HIV基因治疗中成为一种重要的方法。为了防止病毒逃逸株的出现,本研究分别构建了靶向于HIV-1调控蛋白基因vpr和tat的shRNA重组慢病毒载体以及含有这两种shRNA的双表达重组慢病毒载体,分别由U6和H1两种启动子启动,通过与靶向基因tat和vpr表达质粒在293T细胞中进行共转染,采用荧光定量PCR方法测定细胞内靶向基因的表达丰度,结果显示双表达shRNA的重组慢病毒载体对vpr和tat的表达抑制率分别可以达到89.20%和62.00%。与pNL4-3病毒包装质粒共转染,P24ELISA显示plvx-vpr-tat shRNA对病毒包装产量的抑制率可以达到99.05%,比单个shRNA的抑制率都要强,HIV-1NL4-3体外对MT4细胞攻毒实验表明双shRNA重组慢病毒载体具有很强的抑制病毒复制的能力。 郝彦哲 滕智平 杨怡姝 孙晓娜 马晶 金孝华 曾毅关键词:HIV 基因治疗 RNA干扰 SHRNA 表达gH/gL抗原的腺病毒载体EBV疫苗免疫BALB/c小鼠后的T细胞表位鉴定 2024年 为了鉴定表达爱泼斯坦-巴尔病毒(Epstein-Barr virus,EBV)gH/gL保护性抗原的腺病毒载体疫苗在BALB/c小鼠中的T细胞表位,本研究使用表达gH/gL蛋白的腺病毒载体EBV疫苗免疫BALB/c小鼠,利用IEDB Analysis Resource软件对序列进行亲和力预测,设计合成EBV gH基因和gL基因的肽库,并将其混合成肽池,取免疫后的小鼠脾细胞进行IFN-γ ELISPOT检测,通过肽池和单肽两轮筛选检测具有阳性反应的多肽片段,确定优势反应肽。结果显示筛选出gH基因5条特异性优势肽,其中序列为LRGPFSYPSLTSAQS的单肽反应最强;gL基因4条特异性优势肽,其中序列为ASLNSPKNGSNQLVI的单肽反应最强。本研究使用IFN-γ ELISPOT法筛选和确定了9条EBV gH抗原特异性和gL抗原特异性优势T细胞表位,为EBV免疫学与疫苗研究提供了参考。 石雪洋 郝彦哲 李晨雨 马琦 王冰丹 冯霞 李淑英关键词:T细胞表位 基于一体化系统非洲猪瘟病毒快速检测技术的建立 被引量:1 2024年 猪感染非洲猪瘟病毒后,发病率和病死率可高达100%,常造成巨大经济损失和社会影响。非洲猪瘟目前没有有效的预防性疫苗,主要防控手段为尽早发现传染源、切断传播途径。目前最常用的非洲猪瘟病毒检测方法是荧光定量PCR,但是该方法耗时长、实验条件要求高,不利于在基层单位使用。本研究通过对非洲猪瘟病毒基因进行分析,针对其中p72基因设计和合成了多条引物探针,通过实验确定最优引物探针浓度、反应退火温度、延伸时间等条件,再结合一体化核酸检测系统,最终建立了基于即时检测(Point-of-care test, POCT)技术的非洲猪瘟病毒核酸快速检测方法。该方法可以在50min内完成核酸提取、扩增和结果判读的检测全流程,并可以有效检出大于1000拷贝/mL的标本,为非洲猪瘟病毒防控提供了技术手段。 韩卫芳 侯美伶 马晶 郝彦哲 李红霞 刘京端 孟号迪 张晓光关键词:非洲猪瘟病毒 核酸检测 重组HIV-AEgp145和SIV-envT基因的rAAV8在小鼠体内的免疫原性研究 被引量:1 2021年 病毒性载体疫苗是一种有前途的艾滋病疫苗。为了构建以重组腺相关病毒8型(recombinant adeno associated virus type 8,rAAV8)为载体,表达HIV或SIV包膜蛋白的艾滋病疫苗。同时在小鼠体内对其免疫原性进行评价,为下一步研究奠定基础。本研究分别构建了表达HIV AE亚型和SIV mac239株包膜蛋白(不含胞内区)的rAAV8-AEgp145和rAAV8-SIVenvT两种重组病毒,并通过PCR和Western Blot方法对重组病毒进行了体外鉴定。将两种重组病毒分别接种BALB/c小鼠,应用ELISA和ELISPOT方法检测小鼠的HIV/SIV特异性抗体滴度和细胞免疫应答强度。结果显示,rAAV8能够在293T细胞中高效表达HIV AEgp145和SIV envT基因。小鼠接种两种重组病毒3-5W后,均能检测到gp120特异性抗体和env特异性细胞免疫应答,并且在16-20W后反应强度仍显著高于对照组。以上结果提示,携带HIV AEgp145和SIV envT基因的rAAV8载体能够在小鼠体内诱导中等强度并且持续时间较长的特异性体液和细胞免疫应答。 何小周 杨靖 李红霞 郝彦哲 冯霞 马学军关键词:体液免疫 人类免疫缺陷病毒 一种EBV抗原优势表位肽及其应用 本发明提出了一种EBV抗原优势表位肽,EBV抗原包括EBV gH抗原和EBV gL抗原,所述EBV gH抗原优势表位肽的氨基酸序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID N... 郝彦哲 冯霞 张晓光 李红霞永生化人脐带间充质干细胞系及其建立方法和应用 本发明获得了永生化人脐带间充质干细胞系。通过构建重组慢病毒plvx-htert载体,将人端粒酶的催化亚基hTERT导入到脐带间充质干细胞中,筛选出了能够稳定表达出hTERT的干细胞系。经过细胞培养及各种水平的鉴定,证明所... 曾毅 郝彦哲 滕智平 马晶 张晓梅 李东升HIV基因治疗概况及最新进展 被引量:4 2013年 控制人类免疫缺陷病毒(HIV)感染一直是发展中国家和发达国家面l临的一个巨大挑战。一方面,虽然高效抗逆转录病毒疗法(highly active antiretroviral treatment, HAART)能够显著地改善艾滋病(AIDS)患者的症状,但是也存在着很多重要的问题和缺陷。药物代谢动力学的个体差异会带来药物相关毒性,药物治疗只能抑制病毒复制,不能杀灭病毒, 郝彦哲 滕智平 曾毅关键词:基因治疗 人类免疫缺陷病毒 高效抗逆转录病毒疗法 药物代谢动力学 HIV 抑制病毒复制 香叶木素抗甲型H1N1流感病毒研究 2024年 目的筛选香叶木素与甲型H1N1相关蛋白的结合位点,评价香叶木素抗甲型H1N1病毒的效果,分析抗病毒作用效果和机制,筛选备选的抗病毒单体药物。方法应用分子对接软件Discovery Studio预测香叶木素分子与甲型H1N1病毒相关蛋白的结合位点,筛选可能结合的蛋白位点,并利用等离子共振法对香叶木素分子与初步筛选的甲型H1N1病毒的相关蛋白进行体外分子对接实验,进一步明确香叶木素分子的抗H1N1作用靶点。利用ELISA法以及xCELLigence RTCA DP实时细胞分析技术检测香叶木素对病毒的抑制作用。结合两部分检测结果综合评价香叶木素对甲型H1N1病毒的抗病毒药效,明确作用机制。结果香叶木素与甲型H1N1病毒的HA、NP、NA蛋白均有一定程度的结合,且在无毒计量下对H1N1病毒HA蛋白具有靶向性。香叶木素对甲型H1N1病毒的体外抑制率高达91.97%,其抑制效果在24 h内相对稳定。结论香叶木素通过靶向甲型H1N1流感病毒,可发挥高效的抗甲型H1N1流感病毒活性,为香叶木素等传统中药单体成分在抗甲型流感的药物开发上提供了新的思路。 郝峻 王明连 赵洪武 郝彦哲 李劲涛关键词:H1N1病毒 分子对接