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陶聪: 作品数：26 被引量：51H指数：4; 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

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冷刺激小鼠脂肪组织差异表达长链非编码RNA的初步研究被引量：1: 2015年; 脂肪组织主要有白色脂肪组织(WAT)和褐色脂肪组织(BAT)两种类型;WAT储存能量,BAT通过特异性表达解耦联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)消耗能量产热。与BAT不同,WAT具有很强的可塑性,在寒冷刺激下,呈现褐色脂肪表型、获得褐色脂肪的产热活性("褐色化")。根据对冷刺激组(6℃)和对照组(28℃)小鼠的肩胛区褐色脂肪组织(iBAT)和皮下白色脂肪组织(sWAT)的RNA转录组测序分析结果,初步筛选出1个差异明显的长链非编码RNA(lncRNA-6030408B16Rik)。通过qRT-PCR检测lncRNA-6030408B16Rik在野生型小鼠的脾脏、肌肉、肾脏、十二指肠、大脑、肝脏、sWAT和iBAT中的表达;24只雄性C57BL/6野生型小鼠随机分成冷刺激组(6℃)和对照组(28℃),两组小鼠分别在6和28℃环境下处理10d,分别采集两组的iBAT和sWAT;并分离出生1d的野生型小鼠褐色前脂肪细胞,诱导分化后,收集0、1、3、5d的细胞,检测UCP1基因和lncRNA-6030408B16Rik在分化过程中的时空表达。qRT-PCR结果显示iBAT和sWAT中lncRNA-6030408B16Rik的表达量均明显高于其他组织;与对照组相比,冷刺激组iBAT中lncRNA-6030408B16Rik的表达量极显著上调(P<0.01),冷刺激组sWAT中lncRNA-6030408B16Rik的表达量显著上调(P<0.05);前脂肪细胞诱导分化的过程中,lncRNA-6030408B16Rik的表达量呈先上调后下调的趋势。lncRNA-6030408B16Rik在脂肪组织中特异性高表达。lncRNA-6030408B16Rik可能对白色脂肪组织"褐色化"及褐色前脂肪细胞的分化具有重要的调控作用。; 黄素娟陶聪甄二东王亚君魏刚白立景杨述林王彦芳李奎敖红; 关键词：小鼠白色脂肪组织褐色脂肪组织前脂肪细胞分化长链非编码RNA

急性冷刺激后巴马猪背膘和腹股沟皮下脂肪组织的脂质组比较被引量：1: 2020年; 本研究旨在获得巴马猪皮下脂肪组织(包括背膘(backfat)和腹股沟皮下脂肪组织(inguinal subcutaneous white adipose tissue,iWAT))在急性冷刺激(4℃、4 h)后其脂质组成应答的差异。正常饲喂的6月龄巴马公猪在急性冷刺激处理后进行屠宰,收集背膘和腹股沟皮下脂肪组织,利用液相二级质谱(LC-MS/MS)高通量脂质组学检测技术分析其脂质组成。结果表明,在巴马猪皮下脂肪组织中,中性脂类、游离脂肪酸、磷脂类和鞘脂类4大类脂质含量差异巨大,其中含量最高的为中性脂类,在腹股沟皮下脂肪组织和背膘中分别占4大脂类总和的97.43%和98.53%;含量最低的为鞘脂类,在腹股沟皮下脂肪组织和背膘中所占比例分别为0.10%和0.07%。在16亚类脂质组成中含量最高的脂质为甘油三酯,在腹股沟皮下脂肪组织和背膘分别占16亚类脂质总和的95.97%和97.33%;含量最低的脂质为磷脂酸,在腹股沟皮下脂肪组织和背膘中所占比例分别为3.98E-04%和1.13E-04%。主成分分析表明,背膘和腹股沟皮下脂肪组织在急性冷刺激后脂质组成存在差异。以∣差异倍数∣>1.5和P<0.05为标准筛选,共获得18种差异显著的脂类,其中16种脂类在背膘中含量显著低于腹股沟皮下脂肪组织,其中包括14种甘油三酯、DAG32∶1(16∶1/16∶0)和PE40∶6p;只有2种脂质(CL74∶8(18∶2)和TAG54∶3(16∶0))在背膘中的含量显著高于腹股沟皮下。巴马猪皮下脂肪主要脂质组成为甘油三酯;急性冷刺激后,背膘和腹股沟皮下脂肪组织对急性冷刺激存在不同的应答。; 潘建飞郑千涛陶聪赵建国王彦芳; 关键词：背膘

BMP2蛋白或其编码基因在调控猪米色脂肪细胞分化中的应用: 本发明涉及基因工程技术领域，具体公开了BMP2蛋白或其编码基因在调控猪米色脂肪细胞分化中的应用。本发明利用基因工程技术构建过表达质粒、重组蛋白增加BMP2基因的表达，发现其能增加猪米色脂肪细胞的分化效率及产热功能。此外本...; 王彦芳刘嘉莉陶聪张立兰陈川河

利用CRISPR-CAS9系统敲除猪胎儿成纤维细胞系中APOC3基因的方法: 本发明涉及生物技术领域，提供一种利用CRISPR‑CAS9系统敲除猪胎儿成纤维细胞系中APOC3基因的方法，其是根据猪APOC3基因序列，设计并合成靶向猪APOC3基因的sgRNA，然后构建含有所述sgRNA的CRISP...; 王彦芳汤嘉玉杨淳怀赵莹杨述林陶聪吴添文

猪脂肪组织发育示踪系统及应用: 本发明涉及生物技术领域，提供一种猪脂肪组织发育示踪系统及应用，所述系统包括px330‑Rosa26和pRosa26‑AdipoTracer‑KI两个载体。于猪友好基因座位Rosa26中定点整合了AdipoTracer系统...; 王彦芳王煜吴添文毕登峰陶聪

SCD基因敲除的猪胎儿成纤维细胞系及其构建方法: 本发明提供SCD基因敲除的猪胎儿成纤维细胞系及其构建方法。利用CRISPR/Cas9系统编辑猪SCD基因，打靶位点位于SCD基因第二外显子，可以有效地敲除SCD基因，得到SCD基因敲除猪胎儿成纤维细胞，该敲除细胞可用于制...; 王彦芳刘璐璐王煜陶聪梁小娟刘嘉莉; 文献传递

ITGA2基因在调控猪米色脂肪形成中的应用: 本发明公开了ITGA2基因在调控猪米色脂肪形成中的应用。本发明利用RNA‑seq技术，通过分析藏猪成熟米色脂肪细胞和白色脂肪细胞的基因表达差异，筛选出米色脂肪特异性的高表达基因，并基于人、鼠、猪比较基因组学技术，成功鉴定...; 陶聪张立兰王彦芳陈川河刘嘉莉

UCP3基因在巴马猪和藏猪脂肪组织中的表达和甲基化分析被引量：5: 2019年; 为探究解偶联蛋白3(uncoupling protein 3,UCP3)基因在巴马猪和藏猪皮下脂肪组织中的表达和甲基化水平,试验采用实时荧光定量PCR技术检测UCP 3基因在巴马猪和藏猪皮下脂肪组织中的mRNA表达水平;针对猪UCP 3基因启动子区域(-3580^+920 bp),利用在线软件MethPrimer对该区域进行CpG岛预测,并采用亚硫酸氢盐测序法(bisulfite sequencing PCR,BSP)检测其甲基化水平,探究UCP 3基因甲基化水平在巴马猪和藏猪中的差异。结果显示,巴马猪皮下脂肪组织UCP 3基因表达量显著高于藏猪(P<0.05);在UCP 3基因启动子区预测到3个CpG甲基化岛,分别是CpG island1(-3171^-2928 bp)、CpG island2(-154^-2 bp)和CpG island3(+648^+806 bp),其中CpG island1和CpG island3的甲基化水平在巴马猪和藏猪中差异较小,而藏猪CpG island2的甲基化水平(42.61%)高于巴马猪(24.49%)。本研究绘制了2个猪种CpG island2甲基化水平的黑白点图,其中CpG位点为4、8、9、10、11、12、15,藏猪甲基化频率分别比巴马猪高28.26%、17.39%、26.09%、26.09%、26.09%、23.91%和34.78%。在CpG island2处预测到3个转录因子结合位点(SP2、PPARγ和EGR1)。结果表明,巴马猪和藏猪皮下脂肪组织中UCP 3基因mRNA水平的表达差异可能是由于CpG island2的甲基化水平不同所导致,藏猪DNA甲基化水平在一定程度上阻碍了转录因子与启动子调控区域的结合,从而抑制了UCP 3基因的表达。; 范一萍王彦芳陶聪; 关键词：藏猪 UCP 脂肪组织甲基化

TMEM100基因调控猪脂肪细胞能量代谢: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及TMEM100基因调控猪脂肪细胞能量代谢。本发明利用基因工程技术构建过表达质粒增加TMEM100基因的表达，发现其能增加猪米色脂肪细胞的分化效率及产热功能。此外本发明还进行了反向验证，...; 王彦芳姜琳陶聪刘嘉莉王佳昊

RNF20及其介导的组蛋白H2B单泛素化对小鼠棕色脂肪细胞分化的影响: 2020年; 旨在研究RNF20及其介导的组蛋白H2B第120位赖氨酸的单泛素化(H2Bub)对小鼠棕色脂肪细胞成脂分化的影响。采集1日龄和2月龄雄性C57BL/6小鼠的棕色脂肪组织(n=3),用Western blot方法检测RNF20的表达及其介导的H2Bub水平。利用胶原酶消化法分离获得1日龄小鼠的棕色前体脂肪细胞。分别诱导棕色前体脂肪细胞和C3H10T1/2细胞系成脂分化,通过油红O染色检测其分化效果,进一步通过Western blot检测细胞分化前后(0和8 d)RNF20的表达及其介导的H2Bub水平。通过siRNA干扰Rnf20基因在C3H10T1/2细胞系中的表达,油红O染色方法观察Rnf20基因对成脂分化的影响,利用qPCR和Western blot技术检测Rnf20基因的干扰效率及其介导的H2Bub水平。结果显示,2月龄小鼠棕色脂肪组织中RNF20表达量及其介导的H2Bub水平均显著高于1日龄小鼠。脂肪细胞分化标记蛋白PPARγ和CEBPα的表达水平,RNF20表达量及其介导的H2Bub水平在棕色前体脂肪细胞及C3H10T1/2细胞成脂分化后均显著增加。此外,在C3H10T1/2细胞中敲降Rnf20基因后,与阴性对照组相比,RNF20及其介导的H2Bub水平显著降低,成脂分化后脂滴明显减少。综上表明,RNF20对小鼠棕色脂肪细胞的分化是必需的,敲降Rnf20基因导致组蛋白H2Bub水平显著降低,且降低了C3H10T1/2细胞的成脂分化效率。本研究丰富了小鼠棕色脂肪细胞分化过程中的表观遗传调控研究,为深入理解动物脂肪细胞分化提供了新的基因素材。; 梁小娟陶聪赵莹王超刘璐璐王彦芳; 关键词：成脂分化小鼠

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