韦静宜
- 作品数：9 被引量：13H指数：2
- 供职机构：西南大学园艺园林学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 结球甘蓝花粉钙调素基因的克隆与表达分析被引量：4
- 2012年
- 根据芸薹属植物钙调素基因保守区域设计引物,采用同源克隆的方法从结球甘蓝自交不亲和系和自交系花粉中克隆得到一个钙调素开放阅读框cDNA序列,该序列长450bp,编码149个氨基酸;编码蛋白不含跨膜区,无信号肽,具有4个完整的EF-hand结构域。构建了结球甘蓝花粉钙调素原核表达系统,钙调素基因及其3个突变体在E.coli中得到表达,均获得分子量约为16kD的可溶性融合蛋白,在EGTA存在的条件下,各融合蛋白具有各自独特的凝胶迁移现象,活性检测表明甘蓝花粉钙调素活性依赖于钙离子。该基因在甘蓝自交不亲和系花粉萌发过程中表达量先上升后下降,在自交系中随花粉萌发增大而降低;在含有钙调素拮抗剂TFP的培养基中,自交不亲和系和自交系花粉中钙调素基因表达量均受到抑制;在含有W-7琼脂糖的培养基中无明显差异。
- 孙梓健韦静宜王小佳宋明汤青林王志敏任雪松
- 关键词：甘蓝花粉钙调素克隆
- 结球甘蓝花粉膜联蛋白基因的克隆及其表达分析被引量：2
- 2012年
- 对结球甘蓝(Brassica oleracea L.var.capitata L.)花粉总蛋白双向电泳及差异蛋白质谱分析,发现膜联蛋白在花粉萌发后较萌发前表达下调。通过同源扩增和RACE等方法首次在结球甘蓝花粉中扩增得到BoAnnexin2基因的cDNA序列,该基因cDNA全长1157bp,开放阅读框为951bp,编码316个氨基酸残基,预测分子量为36.02kD,等电点6.33。BoAnnexin2编码蛋白C端有4个膜联蛋白重复序列,共2个Ⅱ型钙结合区域,在第4个钙结合区位点包含GXXXGXS(T)/DXXG基序。实时荧光定量试验表明,BoAnnexin2在甘蓝成熟未萌发花粉中的表达量是萌发45min后表达量的8倍,表明BoAnnexin2在甘蓝花粉萌发起始阶段起到重要调控作用。
- 孙梓健许俊强宋明韦静宜汤青林王志敏王小佳
- 关键词：结球甘蓝花粉膜联蛋白
- 甘蓝eSRK重组体的构建及其与SCR的相互作用
- 2012年
- SRK与SCR是甘蓝自交不亲和雌雄性决定因子,两者间相互作具有单倍型特异性。为了探讨HVI/II区域在SRK单倍型特异性及其与SCR互作中的作用,采用重组技术构建甘蓝不同单倍型eSRK(SRKE与SRKF)间的重组体eSRKE-1、eSRKE-2和eSRKE-3,用酵母双杂交系统3检测各eSRK重组体与SCR之间的相互作用。结果表明:SCRE能与eSRKE作用,而不能与eSRKF作用,说明eSRKE、eSRKF属于不同单倍型;SCRE与重组体eSRKE-1、eSRKE-2、eSRKE-3均不发生作用,HVI和HVII区域内差异的氨基酸位点共同参与了与SCR的作用;SCRF不能与eSRKE-1、eSRKE-2、eSRKE-3作用,替换HVI/II区域后并不能改变SRK的单倍型。
- 韦静宜高启国任雪松王小佳李成琼宋明
- 关键词：SRKSCR酵母双杂交
- 甘蓝eSRK重组体、突变体的构建及其与SCR相互作用单倍型的研究
- 自交不亲和(Self-incompatibility，SI)是显花植物在自然选择下进化出的反自交机制，而自交不亲和信号传导是研究植物胞间信号传导的模式系统。SI反应在十字花科中表现为自我或自我相关的花粉在柱头表面的萌发抑...
- 韦静宜
- 关键词：自交不亲和酵母双杂交甘蓝重组体突变体单倍型
- 文献传递
- 甘蓝两种SRK短截蛋白的体外表达及其与THL1作用检测被引量：1
- 2011年
- 为探明S–位点受体激酶(SRK)上与类硫氧还蛋白1(THL1)作用的氨基酸区域以及两者间作用方式,依据SRKE1上功能域分布构建了两种SRKE1短截体原核表达质粒pGEX-SRKE1A和pGEX-SRKE1B,分别在大肠杆菌BL21中获得了可溶性表达。通过体外孵育检测蛋白质相互作用的方法对SRKE1A、SRKE1B与THL1相互作用进行了检测,结果表明SRKE1A和SRKE1B均可与THL1结合,明确了THL1与SRK相互作用并不依赖于SRK激酶活性。两类SRK等位序列间比对结果表明Cys在两类SRK间的保守性存在明显差异,推测两类SRK材料亲和性的差异可能与Cys保守性不同有关。
- 高启国孙梓健韦静宜朱利泉王小佳
- 关键词：甘蓝
- 蛋白质内含肽的研究及应用进展
- 2010年
- 内含肽的发现与研究只经过短短的20年,但已在各个生物领域展现出应用潜力。本文阐述了蛋白质内含肽的相关概念、种类、分布、结构、功能和自我剪接机制。分析了内含肽在当前生物技术领域中的应用情况以及存在的优点和局限性,最后就内含肽的应用前景进行了展望。
- 韦静宜宋洪元李成琼王小佳司军任雪松
- 关键词：内含肽
- 砍瓜×广西蜜本南瓜的杂种鉴定被引量：4
- 2007年
- 采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法对砍瓜(母本)、广西蜜本南瓜(父本)以及杂种F1代的POD与Est同工酶进行测定,结果表明,父母本的两种同工酶均有明显差异,F1代两种同工酶谱表现出双亲的互补性,F1代Est同工酶出现杂种酶带Rf=0.816.证明POD和Est同工酶是可以用来鉴定南瓜品种及其杂种.气孔密度和形态也反应出双亲与F1代的差异,F1代气孔密度介于双亲之间,气孔形态偏向于父本.因此,气孔形态特征也可用来鉴定双亲和杂种.F1代瓜皮、瓜肉颜色和品质更接近父本.
- 李晓林韦静宜叶绍华
- 关键词：砍瓜杂种F1代同工酶气孔
- 基于SRK和SCR序列的甘蓝自交不亲和系单倍型分析被引量：2
- 2011年
- 采用RT-PCR和其他分子生物学方法,以甘蓝自交不亲和系E1和F1柱头cDNA为模板扩增SRKE1和SRKF1基因,以花药cDNA为模板扩增SCRE1和SCRF1基因.经序列比对首次证明E1和F1材料分别为S28和S7单倍型.经三维结构分析,预测SCRE1上C5-C6和C7-C8之间氨基酸序列决定SCRE1的单倍型特异性,SRKE1上TNNSFYSRLKVS序列决定了SRKE1的单倍型特异性,并对两者相对作用的关键氨基酸位点进行了分析.
- 高启国韦静宜朱利泉王小佳
- 关键词：甘蓝自交不亲和性单倍型
