鹿培源
- 作品数：10 被引量：23H指数：3
- 供职机构：北京大学基础医学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 蛋白激酶Cα-EGFP及其突变体真核表达载体的构建和在C2C12细胞中的表达被引量：2
- 2001年
- 目的:研究PKCα结构与转位的关系。方法:用PCR的方法构建了4个PKCα突变体,在DNA连接酶的作用下与pEGFP-N1结合后转移至质粒中,构建PKCα突变体-EGFP真核表达载体。观察它们在C2C12细胞中的表达及转位情况。结果:pPKCα-EGFP-N1转染C2C12肌细胞24h后,细胞内表达的PKCα-GFP融合蛋白主要定位于细胞浆,细胞核中未见分布。pPKCα-βⅠ-EGFP-N1、pPKCβⅠ-α-EGFP转染C2C12细胞24h的表达产物集中在胞浆。pPKCα(-)-EGFP-N1、pPKCα(m)-EGFP-N1转染C2C12细胞24h的定位与野生型明显不同。结论:PKCα的调节区(C1V1C2)尤其是RACK结合区(C2)、PKCα的催化区(C3V4C4)尤其是ATP结合位点与PKCα的转位密切相关。
- 陈瑞华张耕陆纲鹿培源贾弘禔
- 关键词：PKCEGFPC2C12细胞胞浆蛋白激酶CΑ突变体
- 蛋白激酶C突变体的构建及其在C2C12细胞中的表达
- 2003年
- 刘新华陈瑞华陆纲鹿培源贾弘禔李刚
- 关键词：聚合酶链反应蛋白激酶CDNA
- 肌肉LIM蛋白增强生肌素对AChRγ启动子的反式激活作用被引量：2
- 2002年
- 采用RT PCR技术克隆了大鼠肌肉LIM蛋白 (MLP) 6 40bp的全长cDNA序列 .以此cDNA为探针进行的Northern印迹表明 ,MLP于C2C12细胞在分化的第 3d至第 5d表达 .将MLPcDNA亚克隆至pcDNA3,构建真核表达质粒pcDNA3 MLP ,同时构建AChRγ启动子序列 (96 0bp)调控的荧光素酶报告基因真核表达质粒pGL3 γ .C2C12细胞转染及荧光素酶活性分析表明 ,复合转染pcD NA3 MLP和pGL3 γ的分化肌细胞表达的荧光素酶活性约为对照的 4倍 ;而在 3T3或未分化肌细胞复合转染pcDNA3 MLP和pGL3 γ均未检出报告基因表达 ,说明MLP可促进生肌素对AChRγ亚基基因启动子的反式激活作用 .
- 鹿培源倪菊华贾弘褆
- 关键词：生肌素反式激活作用
- “混合克隆”快速筛选重组体
- 2002年
- 目的 :从DNA重组体中快速鉴定出阳性克隆。方法 :通过将单克隆菌液混合分组提取质粒酶切鉴定找出阳性组 ,再从阳性组中鉴定出阳性单克隆。结果 :1 4组混合克隆中 2组为阳性 ,在 2个阳性组 8个单克隆中鉴定出 2个阳性单克隆。结论 :采用混合克隆方法筛选重组体可大大缩短筛选时间 ,而且没有假阴性 ,是一种既快又可靠的方法。目的 :从DNA重组体中快速鉴定出阳性克隆。方法 :通过将单克隆菌液混合分组提取质粒酶切鉴定找出阳性组 ,再从阳性组中鉴定出阳性单克隆。结果 :1 4组混合克隆中 2组为阳性 ,在 2个阳性组 8个单克隆中鉴定出 2个阳性单克隆。结论 :采用混合克隆方法筛选重组体可大大缩短筛选时间 ,而且没有假阴性 ,是一种既快又可靠的方法。
- 陆纲鹿培源贾弘禔
- 关键词：重组DNA克隆基因扩增分子克隆
- LIM蛋白家族的研究进展被引量：10
- 2003年
- LIM结构域是一种在进化上高度保守的双锌指结构 ,LIM蛋白在很多基本的生物学过程中起重要作用。本文综述了LIM蛋白家族成员的性质、生物学功能 。
- 孙佳鹿培源贾弘禔
- 关键词：结构域生物学功能
- 锌指蛋白对肌肉发育的调节被引量：3
- 2001年
- 鹿培源贾弘褆
- 关键词：锌指蛋白肌肉发育MRF骨骼肌
- 运动训练和营养补剂对大鼠骨骼肌糖原生成素基因表达的影响被引量：6
- 2005年
- 目的 :探讨不同运动训练方式和补剂对耗竭运动后恢复期骨骼肌糖原生成素 (GN)基因表达的影响 ,并观察GN基因和α -actin基因表达之间是否关联。方法 :以成年雄性SD大鼠为研究对象 ,采用正交设计法安排实验 ,研究耐力游泳训练、间歇高强度训练、肌酸、谷氨酰胺 4因素对上述指标的效应 ,实验期 2周。结果 :在糖原耗竭运动后恢复期 ,耐力训练和间歇高强度训练大鼠骨骼肌GN基因表达增高 ,运动后 2 4小时呈显著性差异 (P <0 . 0 5 ) ;补充肌酸或谷氨酰胺对GN基因表达未见明显影响。运动后骨骼肌α -actin基因表达各研究因素间无显著差异 ;GN基因和α -actin基因表达之间无时效关联。结论 :耐力训练和间歇高强度训练大鼠在糖原耗竭运动后恢复期骨骼肌GN基因表达增高 ,补充肌酸和谷氨酰胺对运动后GN基因表达无显著影响 ,运动后骨骼肌GN基因与α -actin基因表达不同步。
- 魏守刚杨则宜贾弘堤鹿培源宫明段桂华
- 关键词：运动后骨骼肌基因表达营养补剂肌酸
- 22号染色体与疾病
- 2000年
- 22号染色体是人类基因组计划实施以来最先完成序列测定的常染色体。序列分析揭示 ,2 2号染色体长臂含有 6 79个基因 ,包括 2 47个“已知基因” ,15 0个“相关基因” ,148个“预报基因”和 134个“假基因”。综合目前认识 ,与 2 2号染色体相关的疾病大致可分为 3类 :先天发育异常、肿瘤和某些疾病易感性。对该染色体DNA序列的测定不仅有助于人们了解其基因特性 。
- 杨诺鹿培源贾弘褆
- 关键词：染色体异常22号染色体疾病
- MLP增强生肌素对nAChRγ亚基基因启动子的结合活性
- 2003年
- 构建表达GAL4 MLP融合蛋白的真核表达质粒pBind MLP .哺乳动物细胞双杂交试验表明 ,MLP与生肌素E12复合物存在细胞内的相互作用 .构建表达GST融合蛋白GST MLP和GST E12的原核表达质粒pGEX 2TK MLP以及pGEX 4T 2 E12 .在E .coliBL2 1中诱导表达GST MLP、GST 生肌素和GST E12 ,并用亲和层析法纯化了这 3种GST融合蛋白 .这 3种GST融合蛋白进行的凝胶阻滞试验表明 ,MLP可以增强生肌素 E12复合物对AChRγ亚基基因启动子的结合活性 .研究初步阐明了MLP增强nAChRγ亚基基因启动子在分化C2C12细胞中的转录活性的分子机制 .
- 鹿培源邵世滨倪菊华贾弘褆
- 关键词：MLP生肌素NACHR结合活性
- MLP促进AChRγ亚基基因启动子转录活性的分子机制
- 该研究采用RT-PCR技术克隆了大鼠MLP的全长cDNA.Northernblot显示，MLP一塌胡涂C2C12细胞在分化培养基中培养的第3天开始表达.用MLP的真核表达载体和AChRγ亚基基因调控区调控的荧光素酶报告基...
- 鹿培源
- 关键词：MLP生肌素骨骼肌细胞转录调节
