黄玉兰 作品数:37 被引量:168 H指数:7 供职机构: 四川省疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 四川省卫生厅科研基金 国家科技重大专项 艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
椰毒假单胞菌酵米面亚种选择性分离培养基的比较研究 被引量:7 2018年 目的比较4种椰毒假单胞酵米面亚种选择性分离培养基(马铃薯葡萄糖琼脂,PDA;改良马铃薯葡萄糖琼脂,mPDA;椰毒假单胞菌酵米面亚种分离琼脂,PCFA;银耳卵黄氯霉素琼脂,TYCA)的分离效果,为修订GB/T4789.29—2003《食品卫生微生物学检验椰毒假单胞菌酵米面亚种检验》提供技术支持。方法接种椰毒假单胞菌酵米面亚种于4种选择性分离培养基,观察各培养基上目标菌菌落形态,计算生长率;接种10种常见致病菌和环境中常见菌于4种选择性分离培养基,进行生长特异性试验;通过直接涂布和增菌划线的加标试验,验证这4种选择性分离培养基对粪便、食品和环境土壤等不同标本/样品中椰毒假单胞菌酵米面亚种的分离检出情况。结果 mPDA和PCFA能够分别抑制8种和6种致病菌的生长,且椰毒假单胞菌酵米面亚种的生长率都高于75%;在mPDA和PCFA上,目标菌与多数杂菌形态有明显区别,而在PDA和TYCA上,形态相近不易区分;在粪便、土壤和食品等不同标本/样品的直接涂布和增菌划线分离的加标试验中,mPDA和PCFA上的检出率均超过80%,明显高于PDA和TYCA。结论 mPDA和PCFA分离效果比原标准的PDA明显提高,建议在标准修订中增加此两种选择性分离培养基。 黄伟峰 黄玉兰 杨祖顺 张林 刘丽 李莉 杨小蓉关键词:培养基 食源性致病菌 四川省23株红菇菌的分子鉴定及系统发育分析 2023年 目的 基于ITS序列对四川省23株红菇菌进行鉴定分析。方法 以2020年7月至2022年7月采自四川省部分地区的23株红菇菌为研究材料,采用离心柱法提取基因组DNA后对内转录间隔区(ITS)序列进行PCR扩增,并对测序所得序列进行遗传距离分析和发育树构建。结果 经鉴定23份红菇菌标本共有19个品种,其中包括3种毒蘑菇:日本红菇、亚臭红菇和密褶红菇。经ITS序列分析,23株红菇菌的平均遗传距离为0.340,其中日本红菇与密褶红菇的亲缘关系较近,遗传距离为0.124。而亚臭红菇与日本红姑、密褶红菇的亲缘关系较远,在0.572~0.581之间。结论 ITS序列初步实现了对红菇菌种类的鉴定和系统发育分析。可以将形态上与可食红菇相似的毒蘑菇进行区分、鉴定,为红菇菌中毒事件的应急处置提供科学的技术手段。 赵雯霞 刘丽 张林 黄玉兰 雷高鹏 杨小蓉关键词:系统发育分析 3种实时荧光PCR仪对120份新型冠状病毒检测标本的检测结果比较 被引量:5 2020年 目的对不同厂家生产的3种实时荧光PCR仪检测的同一批新型冠状病毒检测标本结果进行比较分析,考察3种实时荧光PCR仪对新型冠状病毒核酸检测结果的差异。方法采用同一厂家同一批号新型冠状病毒核酸检测试剂,运用3种不同型号实时荧光PCR仪对120例新型冠状病毒肺炎患者及密切接触者的咽拭子、尿液、唾液、粪便标本进行检测,采用SPSS20.0统计软件对检测结果和检测一致性进行分析。结果3种仪器检出率分别为42.50%、35.00%、38.33%。有95例患者标本通过3种仪器扩增后检测结果一致。以仪器A检测结果为参照,仪器B有21例检测结果不同,两者检出率差异无统计学意义(P>0.05),检测结果一致性一般(K=0.732);仪器C有14例检测结果不同,两者检出率差异无统计学意义(P>0.05),检测结果一致性好(K=0.821)。结论由于不同厂家生产的仪器原理和仪器使用维护状况不同导致检测结果存在一定差异,提示仪器厂家需进一步优化仪器性能,提高检测准确性;同时各检测机构应按照要求对PCR仪进行校准维护,确保仪器状态正常,并尽可能采取多种质控手段以确保检测结果准确性。 黄玉兰 韩声付 曾林子 肯布 张光慧 贾春燕 彭秀娟 杨小蓉关键词:新型冠状病毒 核酸检测 四川省一些实验动物养殖场SPF大鼠和小鼠肠内容物中金黄色葡萄球菌的检测 被引量:4 2019年 调查四川省一些实验动物养殖场的实验动物中金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)携带情况,找出传播途径和进化规律,分析其污染原因,为保障实验动物质量提供技术支撑。按照GB/T 14926.14-2001《实验动物金黄色葡萄球菌检测方法》对2011年-2017年四川省部分实验动物中SA进行检测,对分离的SA菌株进行PCR耐药基因mecA检测,并应用金黄色葡萄球菌A蛋白(Staphylococcus protein A,SPA)和脉冲场电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)进行分子分型。结果显示,2011年-2017年共从7家实验动物养殖场采集并完成370只实验动物中SA的检测,共检出SA 31株,总分离率为12.16%,且均从SPF大鼠中分离所得。31株SA的mecA基因均为阴性。SPA可分成5个型别,其中T2360为优势型别,PFGE型别有10个带型。四川省养殖实验动物中仅SPF大鼠携带SA,不同年份检出SA基因型别基本不同,不同养殖场同一年检出的SA具有相同基因型,说明不同养殖场中的SA可能来自同一污染源,应加强SPF大鼠监控,以确保实验动物的质量。 黄伟峰 刘科亮 刘理达 刘丽 黄玉兰 雷高鹏 杨小蓉关键词:实验动物 金黄色葡萄球菌 PFGE分型 四川省肉毒梭菌PCR基因分型方法比较研究 被引量:2 2017年 目的比较分析4种肉毒毒素(botulinum neurotoxins,Bo NT)基因分型方法,为四川省监测和食物中毒中肉毒梭菌(Clostridium botulinum)分型鉴定提供可靠的方法。方法使用本实验室保存的6株肉毒梭菌(包括A、B、E型)验证4种肉毒梭菌PCR基因分型鉴定方法——美国食品药品监督管理局(FDA)多重PCR分型方法、国际标准化组织(ISO)的两种多重PCR分型方法和一种实时荧光PCR分型方法,比较方法间的差异,并初步分析差异原因。结果 3种多重PCR方法均可在一个反应中同时检测A、B、E 3种型别肉毒梭菌。ISO多重PCR方法 1中A型检测虽能获得预期条带,但结果条带不清晰。其余两种多重PCR方法在分型检测肉毒梭菌时,可获得清晰的预期条带。实时荧光PCR分型方法能在多重反应体系中同时检测到不同型的肉毒梭菌,但由于荧光标记相同,要获得分型结果需要分别检测各毒素型别。结论美国FDA多重PCR方法和ISO多重PCR方法 2操作较简单易行,可在四川省肉毒梭菌监测中推荐使用。 雷高鹏 杨小蓉 黄玉兰 何树森关键词:肉毒梭菌 食物中毒 PCR 基因分型 食源性致病菌 沙门菌在皮蛋中的定量生长状况分析 被引量:3 2015年 目的了解不同血清型在皮蛋中生长状况以及定量生长情况,为定量风险评估和预防控制食源性疾病提供基础数据和科学依据。方法通过人工染菌的方法将3种血清型的10^2和10^5CFU的菌量分别注射入鸭蛋中,按照皮蛋的生产制作工艺制成皮蛋,在室温下储存,从存储1-227 d,分10次取出,通过菌落计数分析在皮蛋中生长状况。结果 3种血清型均能在皮蛋中生存和生长,不同浓度菌株进入皮蛋中24 h候后均能迅速生长至10^9。结论不同血清型均能在皮蛋中生长并长期存活。 杨小蓉 李莉 颜雯雯 黄玉兰 雷高鹏 徐耀方 黄伟峰 赵晋 何树森 罗隆泽关键词:皮蛋 四川省腹泻患者和食品加工从业人员致泻性大肠埃希菌监测分析 被引量:11 2016年 目的了解四川地区腹泻患者和食品加工从业人员携带致泻性大肠埃希菌(DEC)情况,为由此引起的食源性疾病预防控制提供科学依据。方法采集485例腹泻患者和1 404例食品加工从业人员粪便或肛拭子样本进行可疑菌株分离,再用多重PCR进行致泻性大肠埃希菌的鉴定。结果在1 889份样本中,检测出致泻大肠埃希菌361株,总阳性率为19.1%。其中腹泻患者阳性60例,阳性率为12.4%,EPEC最多,占18.3%,其次为EAEC,占16.7%。食品加工从业人员阳性301例,阳性率为21.4%,EPEC最多,占17.9%,其次为EAEC,占14.6%。非典型EPEC在腹泻样本和从业人员两类样品中阳性率分别为100.0%和96.3%,且在此两类样品中EPEC中同时有ast A^+分别占9.1%和29.6%,而在ETEC中均存在ast A^+。uid A^+丢失率在EPEC、EAEC中分别为1.5%、3.7%。结论 5种致泻大肠埃希菌在两类样本中所占比例基本一致,DEC感染类型以EPEC和EAEC为主。四川地区由DEC引起的腹泻及食品加工从业人员DEC携带率均较高,应加大监测和监管以促进食品安全。 吕虹 黄伟峰 黄玉兰 雷高鹏 杨小蓉关键词:致泻性大肠埃希菌 毒力基因 多重PCR 结合新型冠状病毒肺炎疫情探讨实验室生物安全防护 被引量:9 2020年 新型冠状病毒肺炎是湖北省武汉市疾病预防控制中心监测发现的不明原因肺炎,引起该肺炎的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)传染性较强,已有一线医务人员感染。本文结合防控实践,对送四川省疾病预防控制中心进行新冠肺炎检测标本的采集、转运及实验室检测、废弃物处理等环节的生物安全防护进行探讨,为实验室生物安全防控提出相关建议。 刘莉莉 赖发伟 王晓 俞秋华 林迁 徐佳楠 杨惠萍 杨小蓉 黄玉兰 胡顺铁 何树森关键词:新型冠状病毒 生物安全防护 2010年四川省部分地区肉鸡中沙门菌污染监测 被引量:1 2013年 目的对肉鸡养殖和屠宰环节进行沙门菌监测,确定肉鸡在养殖和屠宰环节中沙门菌的污染状况,分析肉鸡中沙门菌的污染来源,为食品安全风险评估提供基础数据,同时也为预防和控制由沙门菌起的食源性疾病提供科学依据。方法在四川省成都市、遂宁市选取肉鸡养殖场和屠宰场作为监测点。采集肉鸡活体肛拭、养殖场环境样本,肉鸡胴体,屠宰场环境样本进行沙门菌分离,并对检出菌株运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子分型,用微量肉汤稀释法进行14种抗生素药物敏感实验。结果共从2个肉鸡屠宰场和1个肉鸡养殖场采集样本417份,检出沙门菌12株,检出率为2.87%。通过PFGE分型,共得到4个带型。其中遂宁养殖场的1株环境分离株和遂宁屠宰场的3株肉鸡胴体分离株具有相同PFGE型别,成都屠宰场的2株环境分离株和该屠宰场4株肉鸡胴体分离株具有相似PFGE型别。遂宁分离的4株沙门菌对14种抗生素100%敏感。成都分离的8株沙门菌对14抗生素耐药程度各异,其中4株沙门菌能耐受3种以上药物。结论四川省部分地区肉鸡在养殖和屠宰环节存在沙门菌污染,且有多重耐药菌株出现,应进一步加大监测力度。 雷高鹏 杨小蓉 李莉 徐耀方 黄玉兰 赵晋关键词:肉鸡 PFGE分型 耐药性 四川省部分地区产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌检测及分析 被引量:2 2018年 目的了解四川部分地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的污染情况,为疾病预防治疗提供科学依据。方法采集四川省攀枝花、绵阳、南部县、德阳等地区食品、肉猪肛拭子和腹泻患者粪便样本,用含有头孢噻肟(终浓度为4μg/ml)的缓冲蛋白胨水进行增菌,接种ESBL平板,挑取可疑菌落,运用PCR方法鉴定菌株并检测耐药基因。结果共采集356份样本,其中食品样本186份、患者样本72份、猪肛拭子98份。从202份样本检出产ESBLs大肠埃希菌,检出率为56. 7%。从食品样本中分离出114株,猪肛拭子样本中分离出41株,腹泻患者粪便样本中分离47株;耐药基因显示CTX-M型中Group2型最多,为104株。结论四川省食品、患者、肉猪中产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌均有检出,肉猪分离株携带CTX-M耐药基因更广泛。 刘丽 黄玉兰 张林 雷高鹏 吕虹 杨小蓉关键词:超广谱Β-内酰胺酶 大肠埃希菌 耐药基因