于建宁
- 作品数:5 被引量:53H指数:4
- 供职机构:山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 脂质体法转染小鼠体细胞的研究
- 转染效率低是脂质体转染法存在的主要问题,制约了它的广泛应用。本文以绿色荧光蛋白(GFP)基因为报告基因研究了影响脂质体法转染小鼠体细胞效率的因素及转染对小鼠体细胞的影响,以期提高脂质体转染效率,为转基因克隆打下基础。首先...
- 于建宁
- 关键词:脂质体法GFP转染效率细胞周期凋亡
- 文献传递
- 影响小鼠体细胞脂质体法转染效率的因素被引量:10
- 2005年
- 本实验主要研究脂质体量、质粒量、细胞在脂质体-质粒复合物中暴露时间、细胞传代次数以及细胞种类对转基因效率的影响.首先研究了脂质体量、质粒量和细胞在脂质体-质粒复合物中暴露时间对小鼠胎儿成纤维细胞(MFFC)的绿色荧光蛋白(GFP)转染效率的影响.结果表明,在本实验条件下,用传至3代的MFFC,24孔培养板中每孔接种4-10×104个细胞,70%-90%贴满程度,当脂质体(LipofectAMINE)4μg、质粒(pEGFP-N1)0.3μg,复合物作用时间为6h时获得的转染效率最高,为30.7%.用此方案比较不同传代次数的MFFC转染效率结果表明,原代细胞的转染效率为10.0%,3代为28.9%,到15代降到7.2%.说明随着传代次数的增加,转染效率逐渐降低.将MFFC、小鼠输卵管上皮细胞(MOEC)和小鼠颗粒细胞(MGC)分别传至3代,采用上述方案进行转染,转染效率分别是27.8%、13.7%和14.2%.可见不同种类细胞的转染效率不同.细胞周期检测表明,无论是不同代次的细胞还是不同种类的细胞,其转染效率高低与M期所占比例的多少有关.这为如何提高转染效率提供了有利的依据.
- 于建宁苗德强马所峰谭秀文袁继红谭景和
- 关键词:基因转移脂质体小鼠体细胞转染效率脂质体法
- 山羊卵泡颗粒细胞和输卵管上皮细胞共培养对山羊体外受精胚胎发育的影响被引量:15
- 2004年
- 试验共分 3组 :对照组为单独培养液 ;第 2组为单层颗粒细胞 ;第 3组为输卵管上皮细胞 ,将山羊体外受精胚胎随机放入以上 3组处理中。结果显示山羊体外受精胚胎在卵泡颗粒细胞中发育到囊胚的比率为 4 1.0 % ,在输卵管上皮细胞中发育到囊胚的比率为 5 8.1% ,而在M199培养液中为 5 .6 %。山羊体外受精胚胎分别与山羊卵泡颗粒细胞和输卵管上皮细胞共同培养时 ,均可提高山羊体外受精胚胎的发育进程。且输卵管上皮细胞比颗粒细胞能显著提高山羊体外受精胚胎的发育进程 (P <0 .0 5 )。
- 刘进国邹晓庭于建宁
- 关键词:山羊卵泡颗粒细胞输卵管体外受精胚胎发育
- 纳米硒的研究进展及其应用前景被引量:16
- 2003年
- 纳米红色元素硒是利用蛋白质的酰胺平面对红色元素硒有吸引作用的原理,控制红色元素硒形成以蛋白质为核、以红色元素硒为膜和以蛋白质为分散剂的纳米粒子,具有护肝、抑制肿瘤、免疫调节、抗氧化等生物学功能。纳米红色元素硒具有高效低毒的特性,在畜牧业中的应用是可行的。
- 刘进国于建宁
- 关键词:纳米硒生物学功能无机硒有机硒
- 不同物种输卵管上皮细胞培养、纯度检测及支持小鼠胚胎发育的能力被引量:14
- 2006年
- 针对不同物种采用不同方法培养小鼠、山羊和鸡输卵管上皮细胞(OECs)并检测上皮细胞纯度,在此基础上比较了它们支持小鼠胚胎发育的能力。结果表明,3种细胞都能很好地生长,培养的细胞几乎全为上皮细胞(Vi-mentin单克隆抗体检测显示,小鼠、山羊和鸡OECs的阳性细胞率分别为2.4±0.3、1.3±0.3和1.8±0.4)。昆明白小鼠原核胚与小鼠、山羊和鸡OECs共培养,发育到囊胚的比例分别为61.7%、57.2%和56.2%,差异不显著(P>0.05)。说明鸡和山羊OECs能很好地支持小鼠胚胎发育。
- 谭秀文马所峰刘新勇张霞兰国成于建宁张俊功谭景和
- 关键词:胚胎体细胞共培养