仝欢
- 作品数：8 被引量：38H指数：4
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：温州市科技计划项目浙江省医学创新学科建设计划浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 姜黄素上调线粒体融合蛋白2（Mfn2）抑制脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡的实验研究被引量：8
- 2016年
- 目的 研究姜黄素抑制脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡的作用与机制。方法 取45只清洁级BALB/c雄性小鼠，随机分为3组，即假手术组（n=15），脓毒症组（n=15），姜黄素组（n=15），实验重复3次。脓毒症组行盲肠结扎穿孔术（cecal ligation and puncture，CLP），术前予等体积生理盐水灌胃1周；姜黄素组行CLP术，术前给予姜黄素200 mg ·kg^-1·d^-1灌胃1周；假手术组仅行开腹，不予以结扎、穿孔，术前等体积生理盐水灌胃1周。观察各组小鼠术后24h死亡率，并处死存活小鼠，分离脾脏淋巴细胞。采用流式细胞术、TUNEL法检测淋巴细胞凋亡情况；流式细胞术检测线粒体膜电位水平；Western Blot检测Mfn2、Bax、Bcl-2蛋白表达。数据采用SPSS 18．0软件进行分析，计数资料采用χ2检验，计量资料组间比较采用单因素方差分析。结果 脓毒症组小鼠术后24 h死亡率为46.7％，较假手术组0.00％明显升高（P〈0.01），姜黄素组死亡率较脓毒症组有所降低（40.0％VS 46.7％，P〈0.01）。脓毒症组脾淋巴细胞凋亡率为（17.1±1.67）％，较假手术组（9.43±1.06）％明显增高（P〈0.01）；姜黄素组淋巴细胞凋亡率（12.70±1.25）％较脓毒症组比较明显下降（P〈0.05）。脓毒症组线粒体膜电位降低率为（45.13±4.14）％，较假手术组（21.63±1.62）％明显降低（P〈0.01），姜黄素组线粒体膜电位降低率为（29.67±2.15）％，较脓毒症组明显升高（P〈0.01）。与假手术组比较，脓毒症组线粒体Bax蛋白表达水平明显上调，而胞浆Bax蛋白表达水平明显降低（P〈0.01）。经姜黄素预处理后线粒体Bax蛋白水平较脓毒症组明显降低，胞浆Bax蛋白表达水平明显升高（P〈0.05）。与假手术组比较，脓毒症组Mfn2、Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P〈0.01），经姜黄素预处理后Mfn2、Bcl-2蛋白水平明显上调（P〈0.05）。结论 姜黄素能够上�
- 连洁洪广亮仝欢陈隆望赵光举应岚支绍册李萌芳卢中秋
- 关键词：姜黄素脓毒症淋巴细胞线粒体线粒体融合蛋白2线粒体
- 重组B因子小干扰RNA对激光诱导大鼠脉络膜新生血管的抑制作用被引量：3
- 2010年
- 目的探讨重组B因子（CFB）小干扰RNA（siRNA）抑制激光诱导的大鼠脉络膜新生血管（CNV）的效果。方法采用基因重组的方法获得重组CFB-siRNA，取棕色挪威（BN）大鼠42只84只眼，用激光光凝方式建立CNV模型，随机分为尾静脉注射组、玻璃体腔注射组、视网膜下腔注射组、对照组。3种不同的注射方式组分别设有相应的空质粒注射组。除对照组外，其余各组于激光光凝后第1、3、5天分别进行注射CFB-siRNA，尾静脉、玻璃体腔、视网膜下腔注射组的注射剂量分别为50、20、10μg；对照组激光光凝后不给于任何干预。激光光凝前和光凝后14d分别行荧光素眼底血管造影（FFA），根据荧光渗漏程度对各激光光斑评分来检测CNV的生成情况；免疫组织化学法检测各组大鼠脉络膜内血管内皮生长因子（VEGF）、第Ⅷ因子的表达情况。结果各组激光光斑荧光渗漏程度评分结果显示，CFB-siRNA尾静脉注射组与对照组相比荧光渗漏程度明显减轻（X^2=15．1620，P〈0．05）。免疫组织化学结果显示，CFB-siRNA尾静脉注射组VEGF、第Ⅷ因子的阳性表达强度在激光光凝后不同时间点之间差异无统计学意义（F=20．35，18．33；P〉0．05），而与同时间点其他各组相比，明显降低（F=77．96，55．68；P〈0．05）。其他各组VEGF、第Ⅷ因子的阳性表达强度在激光光凝后14d均显著强于激光光凝后7d（F=60．89，61．12；P〈0．05）。结论通过下调VEGF及第Ⅷ因子的表达水平，重组CFB-siRNA能有效的抑制CNV的生成。
- 仝欢尚庆丽马景学高建郑海洲魏素琴杨爱琴
- 关键词：小分子干扰疾病模型
- 白藜芦醇对小鼠肾纤维化TGF-β_1/Smads信号转导通路的干预研究被引量：15
- 2016年
- 目的:观察白藜芦醇对单侧输尿管梗阻(UUO)构建的小鼠肾纤维化模型TGF-β_1/Smads信号转导通路的影响,探讨其对肾纤维化的干预作用及其机制。方法:40只雄性ICR小鼠随机分为5组:假手术(Sham)组,UUO模型(UUO)组,UUO+白藜芦醇低剂量(20 mg/kg)治疗(ResL)组,UUO+白藜芦醇高剂量(40 mg/kg)治疗(ResH)组,UUO+氯沙坦(10 mg/kg)治疗(Los)组,每组8只。均于术后当天灌胃给药,每24 h 1次。14 d时处死小鼠,留取血清检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),肾组织行HE和Masson染色,观察病理结果,实时荧光定量PCR检测肾组织TGF-β_1、Smad2、Smad7 mRNA的表达。结果:白藜芦醇可以减轻肾组织纤维化的病理损害,使肾组织TGF-β_1、Smad2 mRNA表达降低,Smad7 mRNA表达升高(P<0.05,部分P<0.01),以高剂量组改善最显著。结论:白藜芦醇可呈剂量相关性下调TGF-β_1、Smad2及上调Smad7来抑制TGF-β_1/Smads信号转导通路,从而发挥抗肾间质纤维化的作用。
- 陈薪薪仝欢陈宇吕吟秋李凡凡陈孝倩陈朝生
- 关键词：白藜芦醇肾纤维化UUO
- 重组质粒pRNAT-U6.1/CFB siRNA的构建、鉴定及其对人脐静脉内皮细胞增生的影响
- 2015年
- 背景 脉络膜新生血管（CNV）是多种眼部疾病致盲的原因之一,研究发现补体系统在CNV的发病机制中起重要作用.目的 构建针对补体因子B（CFB）的小干扰RNA（siRNA）重组质粒,体外观察其对人脐静脉内皮细胞ECV-304增生的影响.方法 根据人CFB的基因序列设计引物,经PCR扩增后与质粒pRNAT-U6.1连接,得到重组质粒pRNAT-U6.1/CFB siRNA,并进行测序鉴定和PCR鉴定.ECV-304细胞株进行常规培养,用电转染技术将重组质粒或空质粒分别转染人ECV-304细胞株,分为CFB-siRNA转染组和空质粒转染组,未转染的细胞为空白对照组.细胞转染后继续培养48 h,于倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白（GFP）的表达并计算转染效率;采用半定量逆转录PCR（RT-PCR）法测定各组细胞中CFB mRNA的相对表达量;用MTT法检测各组细胞转染24、48和72 h时细胞的增生值（A）并计算生长抑制率;利用流式细胞技术检测各组细胞的生长周期变化.结果 PCR扩增的目的片段序列与CFB基因序列完全相符,ECV-304细胞转染后,倒置荧光显微镜下可见CFB-siRNA转染组和空质粒转染组的细胞中GFP呈绿色荧光.半定量RT-PCR结果显示,CFB-siRNA转染组、空质粒转染组和空白对照组的CFB mRNA相对表达量分别为0.07±0.04、0.14±0.02和0.14 ±0.03,总体比较差异有统计学意义（F=233.05,P=0.00）;其中CFB-siRNA转染组CFB mRNA相对表达量明显低于空质粒转染组和空白对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.MTT法检测结果显示,各组不同时间细胞增生抑制率总体比较差异有统计学意义（F分组=212.99,P=0.00）;CFB-siRNA转染组细胞转染24、48、72 h后细胞增生的抑制率分别为（23.45±0.01）％、（33.48±0.02）％和（45.49±0.01）％,明显高于同时间点空质粒转染组和空白对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.流式细胞仪检测结果显示,CFB-siRNA转染组、空质粒转染组和空白对照组G1期�
- 仝欢尚庆丽马景学高建王鑫
- 关键词：脉络膜新生血管小干扰RNA脐静脉内皮细胞
- 剩余碱水平对百草枯中毒患者预后的预测价值被引量：6
- 2017年
- 目的探讨急性百草枯中毒患者的预后影响因素，分析剩余碱（BE）水平与血浆百草枯浓度的相关性以及对急性百草枯中毒患者预后的预测价值。方法回顾性分析2009年1月至2015年8月间我院急诊重症监护室（EICU）收治的84例急性百草枯中毒患者的临床资料，收集患者入院后24h内的BE值和血浆百草枯浓度、中毒至洗胃时间、中毒至血液灌流（He）时间、百草枯中毒严重指数（SIPP）以及白细胞（WBC）、中性粒细胞比（N％）、血红蛋白（Hb）、血肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、血糖、血清钾、剩余碱（BE）、氧分压（PaO2）、二氧化碳分压（PaCO2）、pH值等指标。按随访30d后的转归情况分为死亡组（41例），存活组（43例），研究急性百草枯中毒患者预后的影响因素并分析BE水平与血浆百草枯浓度的相关性及对预后的预测价值。结果Logistic回归分析显示，与急性百草枯中毒患者预后有关的因素有BE、血浆百草枯浓度、AL．T、AST、Cr[BE：OR=O．511，95％可信区间为0．267～0．978；血浆百草枯浓度：OR=0．999，95％可信区间为0．999～1．000；均P〈0．osl。BE及血浆百草枯浓度与预后的受试者工作特征（ROC）曲线下面积（AUC）分别为0．775和0．927，BE≤-1．7mmol／L为最佳界值，其对预测患者死亡的敏感度、特异度分别为82．9％、62．8％，预测价值低于血浆百草枯浓度〉3273．935ng／ml的界值（auc0．927，78．0％、95．3％）。BE水平与血浆百草枯浓度呈负相关（r=-0．4，P〈0．01）。结论BE与血浆百草枯浓度呈负相关且BE水平对急性百草枯中毒患者的死亡具有一定的预测价值。
- 康晓文仝欢曹凯强莫清飞李玲文洪广亮毛璐李东赵光举卢中秋
- 关键词：百草枯中毒预后
- siRNA干扰B因子基因的表达及其抑制大鼠脉络膜新生血管的实验研究
- 目的：在眼部疾病中，血管增生过度是一大类致盲性眼病的根本原因，其中脉络膜新生血管性疾病占据较大比例。脉络膜新生血管(Choroidal Neovascularization，CNV)的生长及其所导致的出血、渗出、增生等是...
- 仝欢
- 关键词：脉络膜新生血管眼部疾病RNA干扰旁路途径
- 文献传递
- 环扎加压术对于术前无黄斑区病变患者的影响
- 2008年
- 目的 观察环扎加压术对于术前黄斑区无病变患者的影响。方法对53例53只眼视网膜脱离并且术前黄斑区无病变的患者接受环扎加压术。主要检查矫正视力和黄斑区OCT，Amsler表。结果发现术后黄斑区存在病变的患者视物变形的发生率与术后黄斑区无病变的患者视物变形的发生率比较，差异有统计学意义（P＜0．005）。结论患者环扎加压术后黄斑区出现病变与术后出现视物变形存在密切关系。
- 张怀强尚庆丽李玉涛刘淑伟仝欢
- 关键词：环扎加压术
- Klotho与自噬在脓毒症急性肾损伤小鼠中的表达趋势被引量：6
- 2017年
- 目的研究脓毒症急性肾损伤小鼠中Klotho与自噬的关系。方法选用清洁级健康雄性Balb／c小鼠，用盲肠结扎穿刺术（cecalligationandpuncture，CLP）建立小鼠脓毒症急性肾损伤模型，分别在CLP造模后3h、6h、12h、1d、2d、3d、5d处死小鼠（n=12只）；假手术组（Sham）（n=6）1d处死，正常组（Normal）（n=6）同时处死。留取血清检测血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN），肾组织行HE和PAS染色，观察光镜病理结果，电镜超微结构观察自噬体的形成，Westernblot和免疫组化检测肾组织Klotho蛋白、LC3蛋白和P62蛋白的表达以及分布。SPSS23．0软件采用独立样本资料的t检验进行统计学分析。结果CLP术后Scr和BUN明显升高，1d时达高峰，分别为（165．64±20．56）~mol／L和（45．51±d．05）mmol／L；HE和PAS染色显示肾小管刷状缘上皮细胞脱落，基底膜暴露，间质炎症细胞浸润，电镜显示肾脏可见自噬小体和吞噬泡。与Sham组相比，Klotho蛋白浓度从3h开始逐渐变淡，至1d时达最低值（t=51．851，P〈0．01），2d时有所恢复，然后逐渐转浓；LC3-Ⅱ呈相反的变化趋势，从3h开始逐渐增浓，至1d时达峰值（t=-22．676，P〈0．01），2d时有所下降，然后逐渐变淡，而P62（t=6．43，P=0．002）作为自噬的相关蛋白与LC3-Ⅱ反应相反，表明自噬的激活作用，在1d这个时间点最显著。免疫组化显示Klotho蛋白和LC3-II蛋白主要分布于肾小管胞浆内。CLP术后1d，Klohto蛋白明显减弱（t=-8．371，P〈0．01），LC3-Ⅱ蛋白明显增浓（t=4．995，P=0．001）。结论脓毒症急性肾损伤是Klotho减少，自噬增强的一个过程，Klotho和自噬的表达具有一定的时间依赖性。
- 陈薪薪褚晓琼吕望仝欢陈宇赵光举洪广亮陈朝生卢中秋
- 关键词：脓毒症急性肾损伤KLOTHO自噬P62小鼠
