何天源
- 作品数：14 被引量：84H指数：5
- 供职机构：上海第二医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术发展基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 兔骨骼肌直接注射质粒DNA的生物效应被引量：9
- 1998年
- 目的:通过肌肉直接注射质粒DNA,了解局部骨骼肌细胞能否表达外源基因,并观察注射体积及注射剂量对表达的影响.方法:以β-半乳糖苷酶基因的真核细胞表达载体质粒DNA作为报告基因,通过直接肌注法观察质粒DNA在新西兰兔后肢骨骼肌表达情况,测定不同注射体积组及剂量组的表达效率.结果:外源基因能够在骨骼肌细胞内表达,表达效率随注射剂量的增加而增加,在本研究10μg、25μg、50μg、80μg和 100μg剂量组中,100μg组表达效率最高(10.30%±10.42%);注射体积对表达效率无影响,但能降低表达的变异程度.结论:基因直接肌注法能成功地转移目的基因,增加注射剂量和体积有利于提高表达效率和降低变异,该方法有望成为一种新的基因转移技术以治疗慢性下肢动脉缺血性疾病.
- 施娅雪张柏根何天源陈诗书
- 关键词：基因转染骨骼肌
- 阳离子脂质体介导血管内皮生长因子的基因表达被引量：2
- 1998年
- 以 RT-PCR 自人胎肝中克隆和筛选血管内皮生长因子(VEGF)全长 cDNA,测序鉴定正确后,插入真核表达载体 pAdCMVlink1中的 EcoRI 和 KpnI 位点。用 lipofect AMINE 体外介导转染 CHO 细胞,收集转染后24h 至第5d 的培养上清,用 RT-PCR 检测转染细胞中外源 VEGF165基因的转录、Miles 试验检测细胞培养上清中 VEGF 的生物活性。结果表明,实验所克隆的 VEGF DNA 片段为含有信号肽结构的、长度为619bp 的全长 cDNA,与文献一致。外源基因在转染细胞中能有效转录,其分泌于培养上清中的表达产物具有强大的生物活性。
- 何天源陈诗书钱虎声张柏根
- 关键词：VEGF阳离子脂质体基因治疗动脉疾病
- 肿瘤浸润性淋巴细胞的体外培养及对肿瘤细胞的杀伤作用被引量：3
- 1997年
- 目的：观察肿瘤浸润性淋巴细胞（ＴＩＬ）体外扩增速度及对肿瘤细胞的杀伤作用。方法：肿瘤组织经处理后，用淋巴细胞分离液可分离得到ＴＩＬ，用含ｒＩＬ２的完全培养基培养ＴＩＬ，并作ＴＩＬ对肿瘤细胞的杀伤率。结果：培养４０ｄ的黑色素瘤ＴＩＬ，扩增达９７７３倍。ＴＩＬ对黑色素瘤、卵巢囊腺癌、大网膜转移性腺癌和癌性腹水等自体瘤细胞的效靶比例为４０∶１时，培养１５ｄ的ＴＩＬ对肿瘤细胞的杀伤作用明显高于２０∶１；当效靶比例相同（２０∶１）时，培养２０ｄ的ＴＩＬ对肿瘤细胞的杀伤作用高于１５ｄ，而在４０∶１时培养２０ｄ与１５ｄ的杀伤率无差别。ＴＩＬ对Ｋ５６２肿瘤细胞株也有较强的杀伤作用。结论：ＴＩＬ在含ｒＩＬ２的完全培养基中可大量扩增，ＴＩＬ对肿瘤细胞的杀伤作用与效靶比例及培养时间有关。
- 陈治文夏俊刘爱国何天源
- 关键词：肿瘤浸润性淋巴细胞体外培养
- VEGF基因在兔骨髓基质细胞中的表达及活性测定被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨人血管内皮细胞生长因子(VECF)基因修饰的免骨髓基质细胞对VEGF基因的表达及表达产物的生物学活性。方法 制备真核表达质粒pAdCMV-VEGF165,以Superfect转染试剂介导VFGF基因转染兔骨髓基质细胞,收获转染后24h至6d的转染上清和细胞,采用RT-PCR技术、免疫组化SABC法检测转染细胞中外源性VECF165基因的转录及表达,用血管内皮细胞增殖试验测定转染细胞培养上清中VEGF的生物活性。结果 VEGF基因转染的兔骨髓基质细胞可有效转录VEGF165,其分泌于培养上清中的表达产物可促进血管内皮细胞增殖,具有很强的生物活性。结论 VEGF基因转染的兔骨髓基质细胞可有效表达具有生物活性的VEGF。
- 万超杨庆铭邓廉夫张玥何天源卢健
- 关键词：血管内皮生长因子转基因骨髓基质细胞
- pSV-VEGF_(165)肌肉原位注射促进兔缺血后肢毛细血管形成被引量：8
- 1999年
- 目的探索一种更为简便安全的下肢动脉缺血性疾病的基因治疗途径。方法建立兔后肢缺血动物模型，将体外构建的重组大肠杆菌质粒ｐＳＶＶＥＧＦ１６５１ｍｇ分５点注射于缺血肌群，３０天后切取标本，测定毛细血管密度和毛细血管数／肌肉数比值。结果经ｐＳＶＶＥＧＦ１６５治疗后，缺血肢体毛细血管密度和毛细血管数／肌肉数比值显著增加，小腿部位比大腿部位增加明显（Ｐ＜００５）。结论肌肉内原位注射ｐＳＶＶＥＧＦ１６５是一种简单有效的治疗基因的转染途径，能显著增加缺血肢体毛细血管形成。
- 赵意平施娅雪何天源张皓陈诗书陈诗书
- 关键词：内皮生长因子动脉闭塞性疾病基因治疗
- 血清LSA测定在恶性肿瘤临床诊断中的初步应用被引量：2
- 1990年
- 本文根据Svennerholm和蒋谷人等的方法略加改良,测定了蚌埠地区113例正常人,71例恶性肿瘤患者和82例非肿瘤疾病患者血清脂质结合唾液酸(LSA)的含量。正常值为12.4mg/dl(SD=±3.6mg/dl),71例不同肿瘤患者的平均值为28.2mg/dl(SD=±9.7mg/dl),阳性率为88.7％,82例非肿瘤疾病患者的平均值为16.82mg/dl(SD=±5.4mg/dl),假阳性率为17％。方法的灵敏度,重复性(平均CV=3.6％)和回收率(平均回收率=101.4％)测定结果是满意的。本研究的初步结果表明,血清LSA测定对肺癌、白血病、胃癌和食管癌具有一定的临床诊断价值。
- 薛侃何天源吴亦英陈志毅王安潮林怀忠吴鸿悌
- 关键词：恶性肿瘤血清LSA
- 酸稳定蛋白酶抑制剂抑制活力测定
- 1995年
- 本文报道酸稳定蛋白酶抑制剂（ＡＳＰＩ）抑制活力测定方法，胸水和血清标本变异系数为３．０％～４．２％和０．８％～６．８％，平均３．４％，回收率为９６．０％～９８．７％和９６．０％～１０５．９％，平均９８．８％。测定７７例正常人血清ＡＳＰＩ抑制活力，其均值为０．３９８ｍｇ／ｍｌ（Ｓ＝±０．１２６ｍｇ／ｍｌ）．测定癌性和非癌性胸水各７例，ＡＳＰＩ抑制活力均值分别为０．６９ｍｇ／ｍｌ和０．４３ｍｇ／ｍ１（Ｐ＜０．０１）．本结果提示ＡＳＰＩ抑制活力测定对良、恶性胸水鉴别诊断有一定意义。
- 何天源薛侃刘新民
- 关键词：蛋白酶抑制剂肺肿瘤血清胸水病理学
- 金黄色葡萄球菌稳定L型DNA的提取及酶切被引量：5
- 1994年
- 本文从一例恶性淋巴瘤合并金黄色葡萄球菌Ｌ型败血症患者的骨髓内分离得到金黄色葡萄球菌稳定Ｌ型，用玻璃微珠机械研磨方法提取ＤＮＡ，纯化后被ＥＣＯＲＩ酶切，酶切ＤＮＡ片段可用于核酸杂交等分子物生学研究。
- 何杰张世馥蒋玖宋秀宇何天源
- 关键词：金黄色葡萄球菌L型DNAECORI
- 血清脂质结合唾液酸测定对肺部病变的诊断价值
- 1990年
- 本文介绍正常人113名,肺部恶性病变49例及肺部良性病变33例的血清LSA测定结果,正常人血清LSA含量平均值为0.1243±0.0358g/L。特异性97.40％,男女间无差异,48例肺癌血清LSA平均值0.2698±0.0915g/L,敏感性85.40％;33例良性病变LSA平均值0.1712±0.0767g/L,特异性78.79％。肺癌患者血清LSA较良性病变明显升高,故测定血清LSA对鉴别良恶性病变有一定价值。
- 王安潮何天源
- 关键词：唾液酸CSA血清肺癌
- 逆转录病毒介导人VEGF在兔皮肤成纤维细胞中的表达
- 2000年
- 本文以人VEGF cDNA为目的基因,构建成逆转录病毒质粒载体,并进一步包装成重组缺陷型逆转录病毒,以此感染原代兔皮肤成纤维细胞,经G418筛选,获得了具有分泌VEGF能力的抗性细胞克隆,经Southern、PCR、Northern、RT-PCR等检测,证实了外源基因已整合至原代兔皮肤成纤维细胞基因组中,无重排和产生野生型病毒之患。整合的VEGF可在修饰细胞中转录,经内皮细胞增殖实验和血管通透性实验证实其表达产物具有强大的生物活性。为进一步研究VEGF的生物学功能和生理效应提供有用的工具。
- 何天源施娅雪陈诗书
- 关键词：VEGF逆转录病毒皮肤成纤维细胞血管生成
