卜淑蕊
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 供职机构：北京协和医院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金卫生部临床学科重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SELDI-TOF-MS技术在消化道肿瘤诊断中的应用被引量：1
- 2006年
- 卜淑蕊钱家鸣
- 关键词：消化道肿瘤蛋白质芯片SELDI-TOF-MS技术
- DNA高甲基化检测在临床中的应用价值与前景被引量：1
- 2006年
- 卜淑蕊钱家鸣
- Stealth核糖核苷酸干扰抑制胰腺癌细胞DNMT1表达的研究被引量：1
- 2011年
- 目的:研究靶向甲基化转移酶1(DNMT1)基因的Stealth核糖核苷酸干扰(RNAi)技术对胰腺癌细胞Panc-1中DNMT1表达的抑制作用。方法:通过Block-IT TMRNAi Designer在线设计合成针对DNMT1的Stealth核糖核苷酸(siRNA),以50 nM siRNA用脂质体转染法转染Panc-1细胞。同时设空白对照组,RNAi阴性对照组,荧光RNAi组,每组3个复孔;在转染24 h、48 h、72 h后用荧光显微镜观察转染效率,以48 h荧光强度最亮。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测DMNT1信使核糖核酸(mRNA)含量,免疫印迹(Westem blot)检测DNMT1蛋白的表达。结果:将靶向DNMT1基因Stealth RNAi转染到胰腺癌细胞Panc-1中后,Panc-1细胞在转染RNAi后48 h的转染效率为50%～60%;DNMT1的蛋白和mRNA水平显著下调,与对照组相比,转染后48 h的相对抑制率分别为68%和67.8%(P<0.05),也显著低于空白对照组及空载体组(P<0.05)。结论:DNMT1靶向的Stealth RNA瞬时转染到胰腺癌细胞Panc-1中可显著沉默DNMT1的基因和蛋白的表达,为胰腺癌的基因治疗提供新的理论依据。
- 卜淑蕊钱家鸣
- 关键词：胰腺癌RNA干扰
- 不同方法提取胰腺癌患者大便DNA的质量比较和评价
- 2008年
- 胰腺癌是高度恶性肿瘤之一,近年发病率明显升高.已有学者采用分子生物学技术对胰腺癌患者粪便中癌基因K-ras和抑癌基因p53的突变进行系统研究报道.粪便DNA提取技术成熟稳定,但需要用国外进口的土豆粉来中和粪便中的抑制PCR产物反应的物质,由于这种原料在市场上不易获得,限制了该方法的广泛应用.为此,本实验应用提取粪便的专用试剂盒与我院的改良方法[1]提取DNA,对DNA的质量、浓度、纯度和性价比方面进行综合比较.
- 卜淑蕊温小恒钱家鸣伍东升
- 甲基化特异性聚合酶链反应检测粪便ppENK基因甲基化对胰腺癌诊断的可行性
- 2012年
- 目的评价甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测粪便ppENK基因高甲基化用于诊断胰腺癌的可行性。方法收集胰腺癌患者24例和对照6例的新鲜粪便标本。采用MSP检测全部粪便标本中ppENK的甲基化状态；采用PCR检测全部粪便标本中野生型ppENK的阳性率。采用PCR-限制性片段长度多态性（RFLP）检测粪便K-ras的突变情况。将胰腺癌细胞PC3单细胞悬液加入同一健康者粪便标本，MSP法检测ppENK甲基化阳性，计算甲基化阳性时需掺人的胰腺癌细胞的最少数量。结果30份粪便标本的甲基化检出率为0（0／30），非甲基化检出率为10％（3／30），野生型ppENK检出率为6．7％（2／30）；PCR-RFLP可检测出所选10份野生型ppENK阴性的胰腺癌标本中的8份，其中7份有K-ras第12位密码子突变。MSP方法能够检测到粪便中ppENK甲基化条带所需胰腺癌细胞的数量至少为50个／ml。结论采用MSP方法检测胰腺癌患者粪便标本的ppENK基因甲基化状态，尚不能成为筛查和诊断胰腺癌的方法。
- 卜淑蕊钱家鸣杨红
- 关键词：聚合酶链反应粪便胰腺肿瘤脑啡肽
