张持
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：重庆大学生物医学工程联合学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学更多>>
- 基底硬度对肝细胞胞间粘附复合物稳定性影响的实验研究
- 目的：通过比较分析不同硬度基底上的融合生长肝细胞（L02）的差异，探查细胞间粘附复合物稳定性不同的成因，加深微观力学环境改变对细胞群体生长行为及其表型影响的进一步认识。 方法：构建细胞体外培养模型，制备聚乙烯醇水凝胶基...
- 张持
- 关键词：肝细胞稳定性分析
- 基底硬度对肝细胞胞间粘附复合物稳定性的影响被引量：2
- 2013年
- 目的通过比较汇合生长肝细胞(L02)对不同硬度基底(3.6、10 kPa和30 kPa)的响应,探查细胞间粘附复合物稳定性差异的成因。方法运用实时显微拍摄观察L02细胞在不同硬度基底上的形态特征;采用免疫荧光染色技术检测细胞肌动蛋白骨架构象和β-连环蛋白表达分布;应用Western blot方法检测β-连环蛋白的表达及其磷酸化水平。结果①不同硬度基底上汇合生长L02细胞间粘附复合物稳定性不同,在乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)作用下随基底硬度增加,细胞分离时间缩短;②汇合生长L02细胞在软基质上肌动蛋白骨架成皮质下环,β-连环蛋白分布于细胞连接处。随着基底硬度增大,细胞骨架环变得不完整,胞内骨架呈放射状分布,β-连环蛋白弥散分布于细胞质中;③随基底硬度增加L02细胞膜上β-连环蛋白表达显著降低(P<0.01),细胞质中磷酸化的p-β-连环蛋白(Tyr654)的表达量显著增加(P<0.01)。结论基底硬度影响肝细胞粘附复合物稳定性,基底硬度越大复合物稳定性越差,这与基底硬度增加导致的p-β-连环蛋白(Tyr654)表达量增高有关。
- 王红兵张持杨力邹小兵于光磊刘美霞许蓉林雨
- 关键词：肝细胞Β-连环蛋白
- 基底硬度与细胞因子TGF-β_1协同作用对肝细胞表型的影响被引量：3
- 2012年
- 目的通过建立与肝组织生理和病理硬度相当的体外培养模型,探讨基底硬度和TGF-β1协同作用对肝细胞表型变化的影响。方法采用免疫荧光显微观测技术及Western Blotting等试验方法,研究肝细胞在不同硬度梯度的聚丙烯酰胺基底膜上的细胞形态调整、运动变化特征、骨架构象以及整合素、E-钙粘素、白蛋白和alpha-平滑肌动蛋白表达的差别,并通过图像分析软件对上述结果进行定量分析。结果 3.6 kPa基底膜上单个分散细胞运动变形活跃,但群体细胞极化变小,肌动蛋白沿皮质下呈环状排列,E-钙粘素和白蛋白表达高,整合素和alpha-平滑肌动蛋白的表达水平较低,加药组与对照组变化趋势一致;30 kPa基底膜上细胞运动变形欠活跃,加药组与对照组相比,E-钙粘素和白蛋白表达均下调,alpha-平滑肌动蛋白表达上调;30 kPa与3.6 kPa对照组相比、30 kPa与3.6 kPa加药组相比,E-钙粘素及白蛋白表达均下调(P<0.05),alpha-平滑肌肌动蛋白的表达上调(P<0.05)。10 kPa基底膜上对照组和加药组与30 kPa和3.6 kPa对照组和加药组相比,均无显著性差异。结论基底硬度增加可诱导肝细胞表型转化,并促进TGF-β1对肝细胞代谢行为的影响。
- 王红兵徐以娟徐秋华于光磊邹小兵杨力白洁杨雨张持
- 关键词：细胞表型体外培养细胞形态
- 用于细胞培养的聚乙烯醇水凝胶力学性能模拟及定量控制被引量：4
- 2013年
- 采用化学交联法制备聚乙烯醇(PVA)水凝胶,以此作为细胞体外培养基底。通过改进的拉伸法测量材料的杨氏模量(E),并讨论交联剂与羟基单体的摩尔比(d)、PVA的初始浓度(C_0)对E的影响。利用回归分析建立E与C_0、d关系的数学模型,实现对E的定量控制,模拟细胞在体内生长的生物物理环境。结果表明:该数学模型模拟的相对误差不超过0.08,可实现对PVA力学性能的定量控制。此外,研究了基底硬度对L02细胞铺展及形态学特征的影响,细胞更倾向于在硬基底上铺展,在软的基底上,细胞的形态更趋近于圆形。
- 邹小兵刘美霞于光磊王红兵杨力张持许蓉
- 关键词：力学性能数学模型细胞培养
