张改梅
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牛分枝杆菌重组蛋白TB27.4的表达、纯化及活性鉴定
- 2014年
- 为探索TB27.4蛋白在牛结核病鉴别诊断中的作用,本试验以牛分枝杆菌ValleeⅢ株基因组DNA为模板,PCR扩增tb27.4全长基因片段,将其定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组质粒pET-TB27.4,优化原核表达条件,并用AKTA Purifier对蛋白的纯化条件进行优化。SDS-PAGE结果显示重组蛋白为可溶性表达,且大小与理论值相符,用牛分枝杆菌阳性血清进行Western blotting检测有特异性条带,且可特异性地刺激牛分枝杆菌感染牛外周血淋巴细胞释放大量IFN-γ。结果表明,重组蛋白TB27.4具有良好的B细胞活性和T细胞刺激活性,为进一步研究其在牛结核病诊断中的作用奠定了基础。
- 高新桃李平俊鑫婷贾红郭晓宇张改梅李明刘淑清朱鸿飞许雷
- 关键词：牛分枝杆菌纯化活性鉴定
- 猪只运输车的生物安全控制被引量：2
- 2016年
- 对于猪场来说,看不见的病菌比看得见的脏乱差更加恐怖。猪只运输车是最容易携带病原的移动工具之一,对车辆的生物安全措施必须细致到极致。猪场工作人员都知道,污染的运输车辆可以非常迅速地传播疾病。
- 张改梅
- 关键词：生物安全措施养猪业肥皂水致病菌污染刮擦
- 检测牛IFN-γ双抗体夹心ELISA的建立及在牛结核病诊断上的初步应用被引量：3
- 2014年
- 本研究旨在建立牛IFN-γ体外释放法,为牛结核病的免疫学诊断提供一种快速、有效的新检测技术。分别以获得的牛IFN-γ单克隆抗体Bo-mAb1作为捕获抗体,以Bo-mAb2H作为检测抗体,建立了基于双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)的牛IFN-γ体外释放法。该方法的最低检出限为3.12ng·mL-1,可特异性检测出重组牛IFN-γ(Bac-BoIFN-γ)及天然BoIFN-γ,而与猪、犬、鸡的天然IFN-γ无交叉反应。批内、批间变异系数小于5.11%。临床检测结果显示,与结核菌素皮内变态试验(TST)、进口BovigamTM试剂盒检测的符合率分别为88.7%和95.3%。结果表明,DAS-ELISA法具有良好的敏感性、特异性及精确度,可用于临床样品的检测,为监测牛结核病特别是其早期感染提供了强有力的检测技术手段。
- 张改梅贾红侯绍华鑫婷郭晓宇袁维峰刘淑清吴竞高新桃李明董瑞凯朱鸿飞
- 关键词：牛结核病IFN-Γ双抗体夹心ELISA
- 牛分枝杆菌TB9.8蛋白的表达及其诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞因子的分泌
- 2014年
- 为研究牛分枝杆菌TB9.8蛋白对小鼠巨噬细胞RAW264.7的生长及分泌细胞因子的影响,本研究将编码牛分枝杆菌TB9.8蛋白的基因克隆于pET-30a质粒中并在E.coli中进行表达。经SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,表达的重组蛋白(rTB9.8)约9.8 ku,具有良好抗原性。以不同剂量的纯化rTB9.8刺激巨噬细胞RAW264.7,采用动态实时细胞检测技术分析rTB9.8对RAW264.7生长影响的最佳时间点和最佳剂量,结果表明rTB9.8可以在8 h^24 h对RAW264.7细胞的增殖产生明显的抑制作用。此外,rTB9.8能够显著诱导RAW264.7细胞表达TNF-α、IL-6和IL-12。本实验为进一步研究牛分枝杆菌rTB9.8与宿主细胞相互作用提供了实验依据。
- 刘淑清贾红侯绍华鑫婷袁维峰郭晓宇张改梅高新桃李明吴竞董瑞凯朱鸿飞
- 关键词：牛分枝杆菌细胞因子
