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李佩真
作品数:
2
被引量:4
H指数:1
供职机构:
军事医学科学院微生物流行病研究所
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发文基金:
国家重点基础研究发展计划
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
荫俊
军事医学科学院微生物流行病研究...
孟露露
军事医学科学院微生物流行病研究...
王慧
军事医学科学院微生物流行病研究...
史晶
军事医学科学院微生物流行病研究...
白瑜
军事医学科学院微生物流行病研究...
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作者
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孟露露
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荫俊
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微生物学报
1篇
微生物学通报
年份
2篇
2005
共
2
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抗A型肉毒毒素人源三结构域抗体的重组设计与表达
被引量:1
2005年
以获得的抗A型肉毒毒素人源单链抗体ScFvB17为模板 ,PCR扩增抗体ScFv基因的重链可变区 (VH)和轻链可变区 (Vκ) ,以重链恒定区 1(CH1) 5′端 12个氨基酸的序列作为连接肽 ,构建成三结构域抗体分子 :VH_连接肽_Vκ(VH Vκ)。重组VH Vκ抗体分子在大肠杆菌中得到高效表达 ,其表达量占菌体总蛋白质的 34%以上。表达的蛋白质在菌内形成包含体 ,采用镍柱金属鏊合层析法对该包含体进行纯化 ,得到了纯度高达 95 %的VH Vκ。ELISA等实验结果显示 ,重组设计并制备的三结构域抗体蛋白VH Vκ不但可以特异识别毒素抗原 ,具有与原母本单链抗体ScFv相同的抗原特异性 ,而且具有了更高的相对亲和力和稳定性。
王慧
荫俊
史晶
孟露露
李佩真
关键词:
A型肉毒毒素
中和活性
抗A型肉毒毒素人源单链抗体融合蛋白的重组设计
被引量:3
2005年
以获得的抗A型肉毒毒素单链抗体为模板,进行融合改构,将人IgG1的Fc片段连接到ScFv的C端,在大肠杆菌中实现抗体融合蛋白ScFv-Fc的表达,表达量30%以上,蛋白以包含体形式存在,经过体外变复性的抗体融合蛋白ScFv-Fc,进行Protein G Sepharose柱亲和层析纯化,纯度达90%~95%.体外活性检测结果表明,重组抗体融合蛋白ScFv-Fc可以特异结合A型肉毒类毒素抗原,其相对亲和力近似于母本单链抗体,其稳定性高于母本单链抗体.
王慧
史晶
孟露露
李佩真
白瑜
荫俊
关键词:
A型肉毒毒素
稳定性
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