李玉清
- 作品数：22 被引量：164H指数：8
- 供职机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金：科技基础性工作专项引进国际先进农业科技计划国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 青岛地区产ESBLs鸡源大肠杆菌耐药性调查与优势基因型分析被引量：23
- 2015年
- 【目的】通过抗菌药物敏感性测定试验以及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型和基因型检测试验,了解青岛地区肉鸡养殖场产ESBLs大肠杆菌菌株的分布情况及耐药特征,分析ESBLs流行基因型和基因亚型,为指导临床合理使用抗菌药物、有效控制产ESBLs菌株的感染和流行提供依据。【方法】采用微量肉汤稀释法对249株大肠杆菌菌株进行抗菌药物敏感性测定试验,采用CLSI推荐方法进行ESBLs表型检测和确证实验,采用PCR方法、序列测定以及生物学分析软件进行ESBLs耐药质粒的DNA扩展和基因型分析,利用SPSS19.0软件对产ESBLs菌株与非产ESBLs菌株的耐药情况进行差异显著性分析。【结果】83.13%(207/249)的鸡源大肠杆菌菌株产ESBLs;产ESBLs菌株对7种抗菌药的耐药率高于非产ESBLs菌株,其中对庆大霉素、大观霉素、氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻呋等5种药物差异显著(P<0.05),而产ESBLs菌株对四环素和氟苯尼考2种抗菌药的耐药率显著低于非产ESBLs菌株;产ESBLs菌株多重耐药程度显著高于非产ESBLs菌株,其多重耐药率分别为99.03%和92.86%(P=0.035);CTX-M型、TEM型和OXA型ESBLs菌株的检出率分别为100.00%、99.52%和47.83%,未检测出SHV型ESBLs菌株;产酶菌株分属于10个基因亚型,TEM-1型、CTX-M-65型和CTX-M-55型、OXA-1型是优势基因亚型,并首次从健康家禽中检测到基因重组嵌合体CTX-M-123和CTX-M-64。【结论】产ESBLs鸡源大肠杆菌菌株在青岛地区广泛流行和传播;产ESBLs菌株耐药相对非产ESBLs菌株严重;相比国内其它地区,CTX-M型和TEM型同样成为青岛地区产ESBLs鸡源大肠杆菌菌株的流行基因型,但基因亚型存在差异,TEM-1型、CTX-M-65型和CTX-M-55型、OXA-1型分别是各基因型的优势基因亚型。
- 曲志娜刘红玉王娟赵思俊李玉清黄秀梅盖文燕王君玮
- 关键词：鸡源大肠杆菌耐药性ESBLS基因型基因亚型
- 鸡、猪大肠杆菌ESBLs基因型检测及耐药性分析被引量：21
- 2013年
- 为检测不同动物源大肠杆菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型,探究ESBLs对大肠杆菌耐药性的影响,指导兽医临床有效防治大肠杆菌病。采用NCCLS标准方法和双纸片协同法,对102株大肠杆菌菌株进行抗菌药物敏感性测定和和ESBLs检测,设计合成4对引物,用PCR方法进行了ESBLs耐药质粒的DNA扩增和基因型分析。结果表明:以产ESBLs细菌的耐药质粒为模板扩增出了与预期片段大小相符的TEM、CTX-M型ESBLs产物,但均未扩增出SHV、OVA型ESBLs产物。鸡源、猪源产ESBLs菌株检出率分别为81%、6%。CTX-M、TEM型为山东莱西地区动物源产ESBLs大肠杆菌菌株的流行基因型,且鸡源产ESBLs大肠杆菌菌株分布广泛,应加强当地产酶耐药菌的监测和研究,以有效防治此类细菌引发的疾病。
- 曲志娜张颖李玉清李梁梁王娟黄秀梅刘焕奇
- 关键词：大肠杆菌ESBLS耐药性基因型
- 心水病病原体高度保守基因合成与原核表达
- 2012年
- 通过软件DNAStar分析,设计合成心水病病原体抗原性、保守性比较高的一段基因,长度为564bp,将它插入pUC57载体,再转入pET-32a质粒中进行原核表达并纯化表达产物。结果表明,合成的基因在大肠杆菌中得到高效表达并能简易地提纯,纯化的表达产物有望用于心水病免疫学检测;此合成外来基因还可以作为心水病病原PCR检测的阳性对照。这些工作为我国建立心水病防控技术储备奠定了一些基础,也为防控高度危险性外来传染病提供一种安全和可行的研究新思路。
- 邹艳丽赵永刚王志亮李玉清张永强包静月王君玮李金明
- 关键词：心水病基因合成
- 八省份猪群猪圆环病毒2型与猪细环病毒混合感染的调查被引量：11
- 2013年
- 为了解2012年我国部分地区猪群中猪圆环病毒2型(PCV2)和猪细环病毒(TTSuV)的混合感染情况以及PCV2流行株的基因型,应用PCR方法对采自山东、福建、安徽、河北、河南、广西、辽宁和湖北八省份的227份样品进行PCV2、TTSuV1和TTSuV2的检测,并对26株PCV2ORF2基因、17株TTSuV1和15株TTSuV2的部分UTR基因进行测序和进化分析。结果显示,PCV2的感染率为71.37%(162/227),PCV2与TTSuV1的混合感染率为44.05%(100/227),PCV2与TTSuV2的混合感染率为36.12%(82/227),3种病原体的混合感染率为29.52%(67/227)。在遗传演化关系上,26株PCV2分离株分布于3个大群,分别为PCV2a、PCV2b和PCV2d分支;TTSuV可以分为两大分支,分别为TTSuV1和TTSuV2。结果表明,上述省份的猪群中普遍存在PCV2和TTSuV的混合感染,且PCV2与TTSuV1的混合感染率高于PCV2与TTSuV2的感染率,甚至存在相当比例的PCV2与TTSuV1和TTSuV2的三重混合感染;上述地区流行的PCV2主要为PCV2d型。
- 李海超王娟李一经黄秀梅李玉清曲志娜邵卫星王君玮
- 关键词：猪圆环病毒2型共感染流行病学
- 用Nested-PCR诊断鸡弯曲菌病的研究被引量：2
- 2012年
- 本研究采用Nested-PCR方法,对于临床采集的感染空肠弯曲菌的病鸡组织样品进行了检测,研究结果表明,采用Nested-PCR方法检测空肠弯曲菌具有结果清晰,操作简便,快速等特点。研究还发现,空肠弯曲菌对鸡的致病性可能增强,应引起重视。
- 张康龚振华李蕾王洪伟李玉清张丽娟王丽萍庄青叶于建敏李金平刘国庆
- 关键词：空肠弯曲菌PCR禽病诊断
- 金黄色葡萄球菌耐药性及肠毒素分型研究被引量：8
- 2012年
- 为了解从生鲜乳中分离得到的31株金黄色葡萄球菌的耐药性和肠毒素分布情况,用微量肉汤稀释法进行药敏试验,用PCR方法进行肠毒素的检测和分型。结果表明,31株金黄色葡萄球菌耐药率在50%以上的抗菌药有7种,药耐药率小于10%的有3种;敏感率大于50%的抗菌药有6种,敏感率小于10%的有5种。31株金黄色葡萄球菌毒素基因携带率为93.5%,同时携带2种及以上毒素的菌株占67.7%,有SEA基因的占38.7%,含其他传统的毒素基因类型SEB、SEC、SED和SEE基因的菌株只占40.4%,携带新发现的毒素基因SEG、SHE、SEI和SEJ的菌株占67.7%。说明本次试验中的31株金黄色葡萄球菌对6类13种抗菌药都有不同程度的耐药性,且多重耐药现象比较严重。生鲜乳中分离的金黄色葡萄球菌带毒率高,且携带新发现的肠毒素基因较多。
- 史红王娟郑增忍单虎王述柏李玉清黄秀梅刘开成韩艳张鹏
- 关键词：金黄色葡萄球菌耐药性肠毒素
- 肉鸡生产链中肠炎沙门氏菌耐药性分析及ERIC-PCR分型被引量：9
- 2016年
- 目的：了解肉鸡生产链中肠炎沙门氏菌耐药性情况以及各生产环节菌株间亲缘关系,为临床用药及菌株追踪溯源提供依据。方法：采用微量肉汤稀释法对171株肠炎沙门氏菌进行13种抗菌药物药敏实验;采用肠杆菌基因间重复共有序列-聚合酶链式反应（enterobacterial repetitive intergenic consensus-polymerase chain reaction,ERIC-PCR）法对33株不同生产环节耐药菌株进行分子分型;采用SPSS 20.0软件、Gel-Pro Analyer 4.0和NTSYS pc 2.1软件进行分析。结果：171株肠炎沙门氏菌对13种药物耐药情况不同,其中对氨苄西林耐药情况最严重,耐药率高达90.06%,对恩诺沙星、氧氟沙星最为敏感,耐药率均仅为5.26%;不同环节间耐药性差异极显著（P〈0.01）;多重耐药率高达95.32%,共有26种耐药谱型。不同环节的33株肠炎沙门氏菌分为4种（Ⅰ~Ⅳ）基因型,遗传相似性在66%~100%,Ⅰ型为优势基因型;基因型相同的菌株耐药谱不一定相同,反之,耐药谱相同的菌株基因型不一定相同。结论：肉鸡生产链条中沙门氏菌对多种抗菌药物产生耐药性,且耐药谱种类繁多;沙门氏菌能够沿着生产链进行水平传播,肉鸡场环节菌株基因型相对复杂,菌株基因型与耐药表型之间无明显相关性。
- 李楠赵思俊王娟赵建梅李玉清黄秀梅王君玮丁宜宝刘焕奇曲志娜
- 关键词：肠炎沙门氏菌肉鸡耐药性
- 空肠弯曲菌的培养及其PCR鉴定研究被引量：2
- 2012年
- 为优化空肠弯曲菌分离培养过程并建立PCR鉴定方法,从鸡盲肠内容物中分离培养获得空肠弯曲菌,以该菌特异的保守序列为模板自行设计引物,扩增产物为773bp片段。鸡盲肠内容物分离培养得到空肠弯曲菌,而其他细菌如大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌均不能扩增出特异性片段,并对分离培养过程进行了优化。分离培养过程的优化有利于检测工作的进行,而所建立的PCR鉴定方法具有灵敏、特异的特点,可克服传统生化鉴定的缺点,为空肠弯曲菌的检测提供新方法。
- 杨胜男郑增忍张乐萃王娟曲志娜黄秀梅李玉清
- 关键词：空肠弯曲菌PCR鉴定
- 牛奶中金黄色葡萄球菌的耐药性及其肠毒素分型研究被引量：10
- 2013年
- 为了解我国部分生鲜牛奶中金黄色葡萄球菌污染状况和耐药情况,为指导奶牛场安全合理用药和保障消费者食品安全提供依据。采集3个省共6个奶牛场及挤奶站的新鲜牛奶进行金黄色葡萄球菌的分离鉴定、药敏试验以及分离菌肠毒素PCR分型。结果从338份生鲜牛奶中共分离鉴定金黄色葡萄球菌共39株,分离率为11.54%;所有分离菌株都有不同程度的耐药,尤其对磺胺类药物和青霉素类的耐药性非常严重;92.3%的菌株含SEA SAJ基因肠毒素。
- 王娟黄秀梅刘书科李玉清赵思俊曲志娜王玉东王君玮
- 关键词：生鲜牛奶金黄色葡萄球菌耐药性
- 胶东地区健康禽源大肠埃希菌耐药性与整合子-基因盒携带分析被引量：1
- 2014年
- 为了解健康禽源大肠埃希菌的耐药性及其Ⅰ型和Ⅱ型整合子携带情况和流行特征,探讨整合子与大肠埃希菌耐药表型的相关性,分析整合子在细菌多重耐药中的作用,采用MIC法和PCR方法分别检测249株健康禽源大肠埃希菌的耐药性和Ⅰ型、Ⅱ型整合酶基因及可变区。结果显示,12种药物耐药率均超过56.63%,多重耐药率高达98.39%;245株多重耐药菌株均含有Ⅰ型整合子,但含有Ⅱ型整合子的大肠埃希菌仅113株,Ⅰ型和Ⅱ型整合子的检出率分别为100%和46.12%;63.75%的Ⅰ型整合子阳性菌株扩增出5类大小不同的基因盒,大小为1 000bp^23 00bp,18.6%的Ⅱ型整合子阳性菌株扩增出2 200bp的基因盒;58.82%的菌株携带2种或2种以上的基因盒,基因盒以编码甲氧苄啶类和氨基糖苷类药物耐药性的dfrA和aadA基因家族为主,其中aadA22为优势基因盒,其次是dfrA17+aadA5基因盒。说明胶东地区禽源大肠埃希菌多重耐药现象严重;Ⅰ型整合子比Ⅱ型整合子更流行;Ⅰ型和Ⅱ型整合子参与多重耐药,但细菌携带的整合子-基因盒与其耐药表型无对应关系。
- 刘红玉王君玮王娟赵思俊黄秀梅李玉清曲志娜
- 关键词：大肠埃希菌多重耐药
