杜杰静
- 作品数:7 被引量:7H指数:1
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- HO-1修饰的骨髓间充质干细胞对受损肠道保护作用及其机制的研究
- 目的:⑴探讨骨髓间充质干细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BMMSCs)对体内外活化T细胞的免疫调节作用。⑵探讨血红素加氧酶-1(hemeoxygenase-1,HO-1)修饰的...
- 杜杰静
- 关键词:小肠缺血缺血再灌注免疫调节充质干细胞
- 大鼠骨髓间充质干细胞在淋巴细胞增殖中的免疫调节作用被引量:1
- 2013年
- 目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BM MSCs)在体外对淋巴细胞增殖的影响及其作用机制。方法:分离和鉴定大鼠MSCs,与淋巴细胞、BRL、刀豆蛋白(ConA)建立共培养体系,混合培养0h、24h和48h后,用ELISA方法检测上清中TNF-α、TGF-β和IL-10的分泌量,MTT方法检测淋巴细胞数目变化,流式细胞仪检测调节T细胞(Treg)的含量变化。结果:加入MSCs后TNF-α分泌量降低,TGF-β和IL-10分泌量升高,OD值明显低于未加MSCs组的对照组(P<0.05),Treg含量升高。结论:骨髓MSCs在单独存在以及与BRL同时存在时均对淋巴细胞的增殖具有抑制作用,并且作用程度随时间变化不明显,其中IL-10、TGF-β以及Treg参与了这种免疫抑制过程。
- 郭瑞雪沈中阳宋红丽杜杰静张静郑卫萍王玉亮
- 关键词:细胞分裂生理学淋巴细胞增多生理学干细胞
- 骨髓间充质干细胞体外诱导免疫调节机制的探讨被引量:3
- 2012年
- 目的:观察骨髓间充质干细胞(BM MSCs)对体外活化T细胞的免疫调节作用。方法:提取Wistar大鼠BM MSCs及新鲜脾淋巴细胞做共培养。实验分3组,3个时间点:分别为0、24、48 h脾淋巴细胞/BM MSCs+刀豆蛋白A(ConA)(实验组),脾淋巴细胞+ConA(对照组),单纯淋巴细胞组(空白组)。MTT检测T淋巴细胞活性,ELISA检测细胞因子TNF-α、IL-10及TGF-β水平,流式检测Foxp3+调节性T细胞表达率。结果:(1)与对照组相比,实验组24、48 h在2个时间点T淋巴细胞活性均显著降低(P<0.05);(2)与对照组相比,实验组TNF-α在2个时间点有显著降低(P<0.05),实验组IL-10、TGF-β表达水平有显著升高(P<0.05);(3)实验组Foxp3+T调节细胞表达率高于对照组;(4)随着时间延长,空白组及对照组T淋巴细胞活性均显著降低(P<0.05),实验组T淋巴细胞活性随时间延长差异无统计学意义。结论:BM MSCs可以抑制T淋巴细胞活化,并通过减少炎症因子TNF-α的释放抑制免疫应答。另外,BM MSCs可通过自分泌及诱导T调节细胞产生并分泌免疫抑制因子IL-10、TGF-β下调免疫反应,产生免疫耐受。
- 杜杰静宋红丽沈中阳郭瑞雪吴本娟付楠楠
- 关键词:骨髓间充质干细胞T淋巴细胞免疫调节共培养
- rhEPO对大鼠肠道缺血再灌注损伤的保护作用
- 2012年
- 目的:探讨人类重组促红细胞生成素(rhEPO)对大鼠肠道缺血再灌注损伤的保护作用,观察其对肠道紧密连接蛋白(ZO-1)表达的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠36只,随机分为假手术组(A组)、缺血再灌注组(B组)和rhEPO预处理组(C组)3组,每组12只。A组只给予剖腹手术,C组缺血前10 min预先皮下注射rhEPO 1 000 U/kg,B、C组均夹闭肠系膜前动脉45 min后恢复再灌注2 h,取血清及小肠组织行二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸、TNF-α检测及HE染色和ZO-1蛋白免疫组织化学检测。结果:与B组比较,A、C组小肠绒毛排列整齐,破坏程度明显减轻,ZO-1蛋白表达水平增高。ELISA结果显示:血浆DAO、D-乳酸和TNF-α水平在B组和A、C组之间均有显著性差异(P<0.05),A和C组之间差异也有统计学意义(P<0.05)。结论:预先注射rhEPO对缺血再灌注损伤的肠道有保护作用,并且其对ZO-1蛋白的表达有一定影响。
- 张静沈中阳宋红丽郭瑞雪杜杰静
- 关键词:缺血再灌注损伤肠道紧密连接蛋白
- 骨髓间充质干细胞移植对大鼠小肠缺血再灌注损伤的影响被引量:1
- 2012年
- 目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对其小肠缺血再灌注损伤的影响。方法获取健康Wistar大鼠骨髓,体外提取、培养BMSC,收获传代培养的第3代细胞并鉴定其表型。在健康Wistar大鼠肠黏膜下注射皮肤黑色素瘤细胞,并用底物荧光素法示踪细胞。另外制作Wistar大鼠肠道缺血再灌注模型,将模型大鼠分为2组:实验组大鼠在肠黏膜下注射BMSC悬液1ml(含5×10^6个细胞);对照组大鼠在肠黏膜下注射等量生理盐水。分别于术后0、2、6、24、72和120h处死大鼠,留取血清和小肠组织样本。采用酶联免疫吸附试验检测血清二胺氧化酶(DA0)、D-乳酸和肿瘤坏死因子α(TNF-α),用光镜和透射电镜观察肠组织,蛋白质印迹法和免疫组织化学法检测紧密连接蛋白-1(,ZO-1)。结果体外成功分离培养出BMSC。经肠黏膜移植后的皮肤黑色素瘤细胞定植在肠道。实验组大鼠小肠病理改变较对照组轻,小肠黏膜屏障更完好。术后6h实验组DAO为(11.36±1.89)IU/ml,对照组为(14.27±2.09)IU/ml(P〈0.05);24h时实验组DAO为(5.04±1.04)IU/ml,对照组为(7.35±1.46)IU/ml(P〈0.05)。术后6h实验组D-乳酸为(1.57±0.25)mmol/L,对照组为(1.93±0.19)mmol/L(P%0.05);术后24h实验组D-乳酸为(I.09±0.13)mmol/L,对照组为(1.41±0.07)mmol/L(P〈0.01)。术后6h实验组TNF-a为(266.09±8.84)ng/L,对照组为(286.81±11.54)ng/L(P〈0.01);术后24h实验组TNF-a为(190.39±4.24)ng/L,对照组为(218.49±15.51)ng/L(P〈0.01)。实验组ZO-1的表达高于对照组。结论肠黏膜下移植BMSC可以减轻小肠缺血再灌注损伤。
- 张静沈中阳宋红丽董冲郑卫萍郭瑞雪杜杰静
- 关键词:小肠间质干细胞移植再灌注损伤
- 血红素加氧酶-1与肝移植被引量:1
- 2012年
- 在肝移植过程中,移植物的缺血缺氧是不可避免的,肝缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)限制了肝移植存活率,通过某种方式上调血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的表达在许多动物移植模型中被证实具有减轻移植物再灌注损伤(reperfusion injury,RI)和慢性排斥反应的作用。同时,人为诱导时,HO-1可减缓病理进展、促进供体特异性耐受。本文综述了HO-1的生物学特性、诱导和调控机制及对肝移植的影响3个方面的最新研究成果。
- 杜杰静宋红丽
- 关键词:血红素加氧酶-1肝移植免疫调节慢性排斥反应间充质干细胞
- 骨髓间充质干细胞在体外肠上皮环境下免疫调节的作用机制被引量:1
- 2012年
- 目的观察异基因骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在体外肠上皮细胞环境中产生免疫调节的机制。方法挑选培养状态良好的结肠癌细胞系CaCo-2,提取Wistar大鼠骨髓MSCs及新鲜脾淋巴细胞做共培养。实验分4组,实验组为脾淋巴细胞、骨髓MSCs、CaCo-2共培养+刀豆蛋白A(ConA),对照组为脾淋巴细胞、CaCo-2共培养+ConA,增殖组为脾淋巴细胞+ConA,空白组为单纯脾淋巴细胞。分别于培养0、24、48 h后,MTT检测T细胞活性,ELISA检测细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)及转化生长因子-β(TGF-β)水平,流式检测Foxp3+调节性T细胞表达率。结果在单层肠上皮共培养环境下,与对照组比较,实验组T细胞活性显著降低(P<0.05),TNF-α也有显著降低(P<0.05),IL-10、TGF-β表达水平有显著升高(P<0.05);Foxp3+调节性T细胞表达率升高;T细胞活性随着时间延长有逐渐降低趋势(P<0.05)。结论在体外单层肠上皮细胞环境中,骨髓MSCs可以通过直接抑制T细胞活化产生TNF-α抑制免疫应答,并可间接通过自分泌及诱导调节性T细胞产生并分泌免疫抑制因子IL-10、TGF-β下调免疫反应,产生免疫耐受。
- 杜杰静宋红丽沈中阳郭瑞雪吴本娟付楠楠
- 关键词:骨髓间充质干细胞T淋巴细胞免疫调节CACO-2共培养