樊建军
- 作品数：8 被引量：26H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 沉默GRP78/BIP表达对人膀胱癌T24细胞侵袭及迁移的影响及机制被引量：3
- 2015年
- 目的:探讨体外沉默葡萄糖调节蛋白GRP78/BIP表达对膀胱癌T24细胞侵袭及迁移的影响及可能机制。方法:设计、合成靶向GRP78基因的小干扰RNA,利用脂质体Liopfecta mineRNAIMAX转染入膀胱癌T24细胞,分别采用Realtime PCR、Western blot在mRNA和蛋白水平检测细胞内GRP78、MMP2、MMP9、Timp-2表达,采用Transwell实验及细胞划痕实验检测沉默GRP78表达对膀胱癌T24细胞侵袭及迁移的影响。结果:实验(siRNA-GRP78)T24细胞中GRP78表达显著降低,细胞侵袭迁移能力明显受到抑制,MMP2、MMP9表达降低,而Timp-2表达增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:沉默GRP78能明显抑制人膀胱癌细胞的侵袭、迁移能力,其机制可能与影响MMP2、MMP9、Timp-2表达相关。
- 伍家燕樊建军曾帆李海玉李韵张寒韬白鑫刘革力宋方洲
- 关键词：GRP78膀胱癌
- MCPH1增强宫颈癌caski细胞对顺铂敏感性的作用及机制
- 2014年
- 目的:研究MCPH1加强宫颈癌caski细胞对顺铂敏感性的作用及机制。方法:将慢病毒转染并筛选好的MCPH1过表达组caski+,和对照组caski-,分别用顺铂(cisplatin)处理,MTT法检测生长抑制效率,DAPI染色观察细胞凋亡形态,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Real-time PCR检测相关基因Bax、Caspase-3和P53 mRNA表达。结果:caski+cddp+组的生长抑制作用比caski-cddp+相更强,并呈时效和量效关系;DAPI染色形态学显示caski+cddp+组凋亡小体增多,可见致密强荧光;流式细胞仪检测凋亡率结果为caski+cddp+组凋亡率比caski-cddp+组高13.21%,其中晚期凋亡更明显,caski+cddp+组比caski-cddp+组高17.16%;Real-time PCR检测基因Bax、Caspase-3的mRNA水平,caski+cddp+组比caski-cddp+组分别高出2倍和77%,caski+cddp+组抑癌基因P53的mRNA水平也有上升。结论:MCPH1能增强宫颈癌caski细胞对顺铂的敏感性,为MCPH1的进一步研究和宫颈癌的化疗耐药性研究奠定了基础。
- 李韵麦力张冀马冬梅李海玉樊建军宋方洲
- 关键词：宫颈癌顺铂敏感性
- 人MCPH1基因重组慢病毒的制备及稳定感染HeLa细胞系的建立
- 2014年
- 目的 :构建人MCPH1(microcephalin 1)基因重组慢病毒载体并建立稳定过表达MCPH1基因的宫颈癌HeLa细胞株。方法:将MCPH1基因重组到pLenO-DCE质粒中,构建重组质粒pLenO-DCE-MCPH1,经酶切和测序鉴定后,与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,包装重组慢病毒,滴度测定后,感染HeLa细胞,用有限稀释法筛选稳定的细胞克隆,real-time PCR和Western blot分别检测细胞中MCPH1 mRNA和蛋白水平。结果:经酶切和测序鉴定,成功构建MCPH1重组慢病毒载体,并成功包装慢病毒,滴度为1.24×109 TU/ml;慢病毒感染HeLa细胞后经有限稀释法成功筛选到MCPH1稳定表达细胞株pLenO-DCEMCPH1-HeLa;real-time PCR证实pLenO-DCE-MCPH1-HeLa细胞株较正常组HeLa(P=0.000)和pLenO-DCE-HeLa组(P=0.000)的MCPH1 mRNA水平显著地增高;Western blot进一步证实pLenO-DCE-MCPH1-HeLa细胞株过表达MCPH1。结论:成功构建MCPH1重组慢病毒,并建立了稳定表达MCPH1基因的细胞株pLenO-DCE-MCPH1-HeLa,为进一步研究MCPH1在宫颈癌中的作用奠定了基础。
- 麦力张冀刘革力卜友泉李韵樊建军宋方洲
- 关键词：慢病毒宫颈肿瘤
- RNAI沉默Grp94基因对人食管癌ECA109细胞迁移及侵袭能力的影响被引量：6
- 2015年
- 目的探讨RNAI沉默Grp94基因表达对人食管癌ECA109细胞迁移及侵袭能力的影响和可能机制。方法设计、合成靶向Grp94基因的siRNA基因片段,应用脂质体包埋转染食管癌ECA109细胞,采用Real-time PCR和Western blot法分别检测转染后的细胞内Grp94、基质金属蛋白酶MMP2及MMP9的表达,采用Transwell实验检测沉默Grp94基因对细胞迁移及侵袭能力的影响。结果Si Grp94组中Grp94mRNA和蛋白水平显著下调(P<0.01),MMP2、MMP9表达明显下调(P<0.05);Si Grp94组细胞迁移及侵袭能力明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论沉默Grp94基因可明显抑制ECA109细胞的迁移及侵袭能力,Grp94可能通过影响MMP2、MMP9参与其中。
- 樊建军武家艳李海玉李韵高月曾帆刘革力宋方洲
- 关键词：GRP94ECA109MMPS
- siRNA介导的Bmi-1基因沉默对乳腺癌细胞株MDA-MB-231侵袭迁移的影响被引量：4
- 2014年
- 目的:利用小干扰RNA技术沉默Bmi-1基因的表达,探讨其对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231侵袭转移能力的影响。方法:设计并化学合成了针对Bmi-1的小干扰RNA,转染具有高转移性的MDA-MB-231细胞,利用qRT-PCR和Western blot分别检测Bmi-1基因mRNA和蛋白的表达水平。体外通过Transwell小室、Matrigel胶模型﹑流式细胞术,观察Bmi-1被沉默后对乳腺癌细胞株MDA-MB-231生物学行为的影响。结果:qRT-PCR和Western结果显示,Bmi-1-siRNA转染组Bmi-1基因表达水平被有效抑制。与对照组相比,Bmi-1-siRNA转染组的细胞侵袭转移能力明显下降,细胞周期发生明显变化,细胞的增殖受到明显抑制。结论:抑制Bmi-1基因的表达可明显抑制MDA-MB-231细胞的侵袭迁移能力。
- 李海玉武向梅陈兴凤李韵樊建军刘革力宋方洲
- 关键词：BMI-1RNA干扰迁移
- 沉默GRP94基因对乳腺癌MCF7细胞增殖和凋亡的影响被引量：3
- 2016年
- 目的:研究沉默葡萄糖调节蛋白GRP94(Glucose regulated protein,GRP94)对乳腺癌MCF7细胞增殖、凋亡的影响及潜在机制。方法:设计并化学合成靶向沉默GRP94基因的小干扰RNA,通过脂质体转染入MCF7细胞中,采用qRTPCR和Western blot分别检测GRP94、cyclin D1、Bax和Bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平;通过流式细胞术检测细胞凋亡比例变化,Hoechst 33258染色检测凋亡细胞核变化、CCK8实验检测细胞增殖能力的变化。结果:GRP94 siRNA组GRP94基因的表达水平被有效抑制;与对照组相比,GRP94-siRNA转染组的细胞凋亡比例明显增加;凋亡细胞核形态发生变化;增殖能力明显下降;mRNA及蛋白水平cyclin D1、Bcl-2表达明显下调,Bax表达增加。结论:沉默GRP94基因可明显抑制乳腺癌MCF7细胞增殖能力,促进细胞凋亡的发生,且其可能通过下调cyclin D1、Bcl-2和上调Bax表达参与其中。
- 樊建军武家燕李韵曾帆宋方洲
- 关键词：增殖凋亡
- 过表达ALEX1对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响被引量：7
- 2015年
- 目的:研究过表达ALEX1对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。方法:将重组慢病毒LV5-ALEX1及阴性对照LV5-NC分别感染乳腺癌MCF-7细胞。感染72 h后,采用实时定量PCR和Western blot分别检测感染后ALEX1的表达情况;感染24、48、72、96 h,CCK8法检测细胞增殖情况;感染72 h后,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:感染72 h后细胞ALEX1 mRNA表达水平明显上升(165.81±12.14 vs 52.29±2.32,P<0.01),实验组与对照组相比,细胞增殖受到明显抑制,细胞凋亡率明显增加(20.55%±2.50%vs 3.60%±1.614%,P<0.05)。结论:过表达ALEX1能明显抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖并诱导细胞发生凋亡。
- 曾帆高月伍家燕李海玉樊建军李韵张寒韬刘革力宋方洲
- 关键词：乳腺癌MCF-7细胞细胞增殖凋亡
- miR-335对MDA-MB-231乳腺癌细胞生物学特性的影响被引量：4
- 2015年
- 目的检测microRNA-335(miR-335)在乳腺癌细胞系BT474、T47D、MCF-7、SK-BR-3、MDA-MB-231和正常乳腺细胞系MCF-10A中的表达以及在原发性乳腺癌和淋巴结转移性乳腺癌中的表达,进一步研究miR-335对MDA-MB-231细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响。方法采用荧光实时定量PCR检测miR-335在乳腺癌细胞系BT474、T47D、MCF-7、SK-BR-3、MDA-MB-231和正常乳腺细胞系MCF-10A中的表达,以及在原发性乳腺癌和淋巴结转移性乳腺癌中的表达。体外培养MDA-MB-231细胞并将其分3组,分别为miR-335组、阴性对照组和空白对照组。miR-335组转染miR-335模拟物(has-miR-335 mimics),阴性对照组转染阴性对照序列(negative control,NC),空白对照组细胞不行任何转染。通过MTT实验检测过表达miR-335对细胞增殖能力的影响;流式细胞仪检测过表达miR-335对细胞凋亡的影响;Transwell实验检测对细胞迁移能力的影响。Western blot检测MMP-2和MMP-9蛋白的表达。结果各乳腺癌细胞系中miR-335表达水平均低于乳腺正常上皮细胞系MCF-10A,MDA-MB-231细胞中最低(P<0.01)。在随机配对的10例原发性乳腺癌和10例淋巴结转移性乳腺癌标本中,有7例淋巴结转移性乳腺癌中MiR-335的表达低于对应的原发性乳腺癌(P<0.05)。过表达miR-335对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、凋亡无明显影响(P>0.05),但能显著抑制细胞的迁移能力(P<0.05)。Western blot结果显示:miR-335组MMP-2和MMP-9蛋白的表达量均低于阴性对照组和空白对照组。结论 miR-335在高转移性乳腺癌细胞系和淋巴结转移性乳腺癌组织中明显低表达,过表达miR-335对MDA-MB-231细胞的增殖、凋亡无明显影响,但抑制MDA-MB-231细胞的迁移能力。miR-335可能通过下调MMP2和MMP9的表达从而抑制MDA-MB-231细胞迁移。
- 伍家燕高月曾帆李海玉樊建军李韵张寒韬刘革力宋方洲
- 关键词：乳腺肿瘤细胞增殖细胞迁移
