曾帆
- 作品数:7 被引量:27H指数:4
- 供职机构:重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 沉默GRP94基因对乳腺癌MCF7细胞增殖和凋亡的影响被引量:3
- 2016年
- 目的:研究沉默葡萄糖调节蛋白GRP94(Glucose regulated protein,GRP94)对乳腺癌MCF7细胞增殖、凋亡的影响及潜在机制。方法:设计并化学合成靶向沉默GRP94基因的小干扰RNA,通过脂质体转染入MCF7细胞中,采用qRTPCR和Western blot分别检测GRP94、cyclin D1、Bax和Bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平;通过流式细胞术检测细胞凋亡比例变化,Hoechst 33258染色检测凋亡细胞核变化、CCK8实验检测细胞增殖能力的变化。结果:GRP94 siRNA组GRP94基因的表达水平被有效抑制;与对照组相比,GRP94-siRNA转染组的细胞凋亡比例明显增加;凋亡细胞核形态发生变化;增殖能力明显下降;mRNA及蛋白水平cyclin D1、Bcl-2表达明显下调,Bax表达增加。结论:沉默GRP94基因可明显抑制乳腺癌MCF7细胞增殖能力,促进细胞凋亡的发生,且其可能通过下调cyclin D1、Bcl-2和上调Bax表达参与其中。
- 樊建军武家燕李韵曾帆宋方洲
- 关键词:增殖凋亡
- 过表达ALEX1对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响被引量:7
- 2015年
- 目的:研究过表达ALEX1对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。方法:将重组慢病毒LV5-ALEX1及阴性对照LV5-NC分别感染乳腺癌MCF-7细胞。感染72 h后,采用实时定量PCR和Western blot分别检测感染后ALEX1的表达情况;感染24、48、72、96 h,CCK8法检测细胞增殖情况;感染72 h后,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:感染72 h后细胞ALEX1 mRNA表达水平明显上升(165.81±12.14 vs 52.29±2.32,P<0.01),实验组与对照组相比,细胞增殖受到明显抑制,细胞凋亡率明显增加(20.55%±2.50%vs 3.60%±1.614%,P<0.05)。结论:过表达ALEX1能明显抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖并诱导细胞发生凋亡。
- 曾帆高月伍家燕李海玉樊建军李韵张寒韬刘革力宋方洲
- 关键词:乳腺癌MCF-7细胞细胞增殖凋亡
- 沉默GRP78/BIP表达对人膀胱癌T24细胞侵袭及迁移的影响及机制被引量:3
- 2015年
- 目的:探讨体外沉默葡萄糖调节蛋白GRP78/BIP表达对膀胱癌T24细胞侵袭及迁移的影响及可能机制。方法:设计、合成靶向GRP78基因的小干扰RNA,利用脂质体Liopfecta mineRNAIMAX转染入膀胱癌T24细胞,分别采用Realtime PCR、Western blot在mRNA和蛋白水平检测细胞内GRP78、MMP2、MMP9、Timp-2表达,采用Transwell实验及细胞划痕实验检测沉默GRP78表达对膀胱癌T24细胞侵袭及迁移的影响。结果:实验(siRNA-GRP78)T24细胞中GRP78表达显著降低,细胞侵袭迁移能力明显受到抑制,MMP2、MMP9表达降低,而Timp-2表达增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:沉默GRP78能明显抑制人膀胱癌细胞的侵袭、迁移能力,其机制可能与影响MMP2、MMP9、Timp-2表达相关。
- 伍家燕樊建军曾帆李海玉李韵张寒韬白鑫刘革力宋方洲
- 关键词:GRP78膀胱癌
- ALEX1在宫颈癌中的表达及对宫颈癌细胞生物学行为的影响被引量:6
- 2015年
- 目的研究ALEX1基因在宫颈癌组织与癌旁组织中的表达情况,探讨ALEX1基因对宫颈癌细胞生物学行为的影响。方法应用免疫组化检测临床宫颈癌组织与癌旁组织中ALEX1的表达情况,通过小干扰RNA技术沉默ALEX1,并通过流式细胞仪检测沉默ALEX1后He La细胞的周期、凋亡变化情况,利用CCK-8检测其增殖情况及对抗癌药物白藜芦醇敏感性的影响。结果免疫组化结果显示,临床宫颈癌组织中ALEX1高表达。与对照组He La细胞相比,沉默ALEX1实验组细胞生长受到明显抑制,并且增强白藜芦醇对其的抑制作用,细胞周期阻滞在S期。结论沉默ALEX1能有效阻滞He La细胞的生长能力及增强白藜芦醇对He La细胞的抑制作用。
- 曾帆伍家燕高月张涵韬白鑫刘革力宋方洲
- 关键词:宫颈癌白藜芦醇RNA干扰细胞周期
- BCL11A在宫颈癌中的表达及其临床意义被引量:2
- 2017年
- 目的:深入研究BCL11A在宫颈癌组织及癌旁正常组织中的表达情况及其与临床病理因素的相关性。方法:收集62例宫颈癌组织及相对应的癌旁正常组织,制作成石蜡切片,并通过免疫组织化学法检测BCL11A蛋白在宫颈癌组织和癌旁正常组织中的表达,并结合患者资料,采用卡方检验分析BCL11A的表达与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结受累等临床病理因素之间的关系。结果:(1)免疫组化结果显示,相比癌旁宫颈正常组织,BCL11A在癌组织中表达显著升高,并且具有统计学意义(P<0.01)。(2)BCL11A在宫颈癌组织中的表达定位也具有差异性,BCL11A在宫颈癌组织中的表达主要定位于细胞核,而在癌旁正常组织中BCL11A的表达主要定位于细胞质。(3)BCL11A的表达与患者的年龄(P=0.436)、临床分级(P=0.683)、肿瘤大小(P=0.734)以及淋巴结转移数目(P=0.439)无关,但与淋巴结受累情况有关,出现淋巴结转移(N1-3)的患者中BCL11A蛋白的表达水平高于未出现淋巴结转移(N0)的患者(P=0.043)。结论:BCL11A在宫颈癌组织中高表达,在癌旁正常组织中表达较低;BCL11A的表达与宫颈癌患者的淋巴结转移情况相关,即出现淋巴结转移的患者BCL11A的表达较高;在宫颈癌组织中BCL11A的表达主要定位于在细胞核中,而在癌旁正常组织中,BCL11A的表达主要定位于细胞质中。BCL11A可能在宫颈癌的发生发展中起着重要作用。
- 白鑫张寒韬李海玉曾帆伍家燕刘革力宋方洲
- 关键词:宫颈癌免疫组化淋巴结转移
- RNAI沉默Grp94基因对人食管癌ECA109细胞迁移及侵袭能力的影响被引量:6
- 2015年
- 目的探讨RNAI沉默Grp94基因表达对人食管癌ECA109细胞迁移及侵袭能力的影响和可能机制。方法设计、合成靶向Grp94基因的siRNA基因片段,应用脂质体包埋转染食管癌ECA109细胞,采用Real-time PCR和Western blot法分别检测转染后的细胞内Grp94、基质金属蛋白酶MMP2及MMP9的表达,采用Transwell实验检测沉默Grp94基因对细胞迁移及侵袭能力的影响。结果Si Grp94组中Grp94mRNA和蛋白水平显著下调(P<0.01),MMP2、MMP9表达明显下调(P<0.05);Si Grp94组细胞迁移及侵袭能力明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论沉默Grp94基因可明显抑制ECA109细胞的迁移及侵袭能力,Grp94可能通过影响MMP2、MMP9参与其中。
- 樊建军武家艳李海玉李韵高月曾帆刘革力宋方洲
- 关键词:GRP94ECA109MMPS
- miR-335对MDA-MB-231乳腺癌细胞生物学特性的影响被引量:4
- 2015年
- 目的检测microRNA-335(miR-335)在乳腺癌细胞系BT474、T47D、MCF-7、SK-BR-3、MDA-MB-231和正常乳腺细胞系MCF-10A中的表达以及在原发性乳腺癌和淋巴结转移性乳腺癌中的表达,进一步研究miR-335对MDA-MB-231细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响。方法采用荧光实时定量PCR检测miR-335在乳腺癌细胞系BT474、T47D、MCF-7、SK-BR-3、MDA-MB-231和正常乳腺细胞系MCF-10A中的表达,以及在原发性乳腺癌和淋巴结转移性乳腺癌中的表达。体外培养MDA-MB-231细胞并将其分3组,分别为miR-335组、阴性对照组和空白对照组。miR-335组转染miR-335模拟物(has-miR-335 mimics),阴性对照组转染阴性对照序列(negative control,NC),空白对照组细胞不行任何转染。通过MTT实验检测过表达miR-335对细胞增殖能力的影响;流式细胞仪检测过表达miR-335对细胞凋亡的影响;Transwell实验检测对细胞迁移能力的影响。Western blot检测MMP-2和MMP-9蛋白的表达。结果各乳腺癌细胞系中miR-335表达水平均低于乳腺正常上皮细胞系MCF-10A,MDA-MB-231细胞中最低(P<0.01)。在随机配对的10例原发性乳腺癌和10例淋巴结转移性乳腺癌标本中,有7例淋巴结转移性乳腺癌中MiR-335的表达低于对应的原发性乳腺癌(P<0.05)。过表达miR-335对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、凋亡无明显影响(P>0.05),但能显著抑制细胞的迁移能力(P<0.05)。Western blot结果显示:miR-335组MMP-2和MMP-9蛋白的表达量均低于阴性对照组和空白对照组。结论 miR-335在高转移性乳腺癌细胞系和淋巴结转移性乳腺癌组织中明显低表达,过表达miR-335对MDA-MB-231细胞的增殖、凋亡无明显影响,但抑制MDA-MB-231细胞的迁移能力。miR-335可能通过下调MMP2和MMP9的表达从而抑制MDA-MB-231细胞迁移。
- 伍家燕高月曾帆李海玉樊建军李韵张寒韬刘革力宋方洲
- 关键词:乳腺肿瘤细胞增殖细胞迁移