樊晋宇
- 作品数：17 被引量：50H指数：4
- 供职机构：新乡医学院生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：河南省重大公益性科研项目国家重点基础研究发展计划河南省基础与前沿技术研究计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 大鼠肝库普弗细胞的分离、鉴定及纯度、活性分析被引量：2
- 2009年
- 按Higgins等方法制作大鼠2/3肝切除(partial hepatectomy,PH)模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,用60%Percoll梯度离心结合免疫磁珠方法分离库普弗细胞(Kupffer cell,KC),用外胚层发育不良抗原2(ectodermal dysplasia antigen2,ED2)和溶菌酶(lysozyme,LYZ)的免疫组织化学方法定性、定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝脏细胞及分离的库普弗细胞,用RT-PCR定量库普弗细胞的ED2和LYZmRNA,用蛋白免疫印迹方法定量库普弗细胞的ED2和LYZ蛋白.初步证实,分离的肝库普弗细胞中ED2和LYZ阳性细胞占96%以上,从PH后各时间点分离的库普弗细胞ED2和LYZmRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定.表明改进的分离库普弗细胞方法具有收率和纯度高、活性好等优点,值得采用.
- 丁博王磊谢来峰樊晋宇徐存拴
- 关键词：库普弗细胞免疫磁珠标记蛋白
- 大鼠肝星形细胞的分离、鉴定及纯度、活性分析被引量：4
- 2009年
- 按Higgins等方法制作大鼠2/3肝切除(parital hepatectomy,PH)模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,用60%Percoll梯度离心和免疫磁珠相结合分离肝星形细胞,用结蛋白(desmin,DES)和波形蛋白(vimentin,VIM)的免疫组织化学定性、定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝脏细胞及分离的肝星形细胞,用RT-PCR定量肝星形细胞的DES和VIM mRNA,用蛋白免疫印迹定量肝星形细胞DES和VIM.初步证实,分离的肝星形细胞中DES和VIM阳性细胞占95%以上,从PH后各时间点分离的肝星形细胞的DES和VIM mRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定.表明改进的分离肝星形细胞方法具有收率和纯度高、活性好等特点,值得采用.
- 张永晶谢来峰王磊樊晋宇徐存拴
- 关键词：肝星形细胞免疫磁珠标记蛋白
- 大鼠肝陷窝细胞分离、鉴定及纯度、活性分析被引量：1
- 2009年
- 按Higgins等方法制作大鼠2/3肝切除(parital hepatectomy,PH)模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,用60% Percoll梯度离心结合免疫磁珠方法分离陷窝细胞(pit cell),用分化抗原簇8(cluster of differentiation8,CD8)和分化抗原簇56(cluster of differentiation 56,CD56)的免疫组织化学方法定性、定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝脏细胞及分离的肝陷窝细胞,用RT-PCR定量肝陷窝细胞的CD8和CD56 mRNA,用蛋白免疫印迹定量肝陷窝细胞的CD8和CD56蛋白.初步证实,分离的肝陷窝细胞中,CD8和CD56阳性细胞占95%以上;PH后各时间点分离的陷窝细胞的CD8和CD56的mRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定.表明改进的分离陷窝细胞方法具有收率和纯度高、活性好等特点,值得采用.
- 和春肖谢来峰王磊樊晋宇徐存拴
- 关键词：免疫磁珠标记蛋白
- 体外诱导骨髓间充质干细胞成肝(样)细胞的研究进展被引量：1
- 2015年
- 肝病已成为世界上发病率和死亡率最高的疾病之一。目前有望治疗晚期重症肝病的方法有原位肝移植、肝细胞移植、生物人工肝等,但这些方法都面临着肝或肝细胞源紧缺的问题。如何能够获得体外增殖的、可用于移植疗法的肝细胞资源成为研究的要点。骨髓间充质干细胞(BMSCs)既具有自我更新的能力,也具有在合适的微环境里多系横向分化的潜能,在体外可以被诱导分化为肝(样)细胞,理论上可提供丰富的肝细胞,BMSCs成为了细胞治疗的研究热门。我们简要综述了体外诱导BMSCs向肝样细胞(HLCs)分化的研究成果和最新进展,总结了各种诱导方法的优势以及存在的问题,并对该研究领域进行了小结与展望。
- 代克强丁一樊晋宇徐存拴
- 关键词：骨髓间充质干细胞分化肝样细胞
- 细胞毒性T细胞抗原4胞外结构域的高效表达与纯化
- 2017年
- 目的:获得细胞毒性T淋巴细胞相关分子4胞外结构域(exCTLA4)在大肠杆菌中高效表达的条件,并纯化获得高纯度的重组蛋白.方法:构建原核表达质粒pET28a-exCTLA4并转入大肠杆菌Transetta(DE3)中,通过改变诱导物IPTG浓度、细菌培养温度和时间,获得了exCTLA4的最佳表达条件.收集最佳诱导条件下表达exCTLA4的菌体,将菌体超声破碎后,离心分离exCTLA4包涵体,用低浓度尿素(2mol·L^(-1))洗去大部分背景蛋白后,再用高浓度尿素(8mol·L^(-1))溶解包涵体,进一步用镍离子亲和层析方法得到高纯度exCTLA4.结果:构建了表达载体pET28a-exCTLA4,获得了exCTLA4在Transetta(DE3)中的最佳诱导条件,即在1mmol·L^(-1) IPTG、25℃下,诱导6h能得到最佳表达,但重组蛋白以包涵体形式存在.通过纯化exCTLA4包涵体及进一步的镍离子亲和层析获得了高纯度的目的蛋白,Western blot鉴定为CTLA4.结论:获得了exCTLA4重组蛋白在大肠杆菌中的最佳表达条件和纯化方法及步骤,为该蛋白的应用奠定了基础.
- 郭鑫鑫刘青丰慧根原志庆林俊堂樊晋宇
- 关键词：CTLA4原核表达蛋白纯化
- 不同途径与策略获取成熟肝(样)细胞的研究进展被引量：1
- 2013年
- 肝细胞是肝脏生理功能的主要执行者,在肝脏疾病的细胞治疗与药物研究和开发中具有重要的理论与应用价值。直接分离的原代肝细胞很难在体外增殖培养,因此从其他途径获取大量成熟的肝细胞一直是备受关注的研究热点。该文简要综述了采用不同策略从肝干细胞、胚胎干细胞、其他成体祖/干细胞以及其他成熟体细胞诱导为成熟肝细胞或肝样细胞的研究成果与最新研究进展,并对该研究领域进行了小结与展望。
- 樊晋宇王妍李丽丽徐存拴
- 关键词：肝干细胞胚胎干细胞诱导多能干细胞多能成体祖细胞诱导分化转分化
- 一种大鼠肝细胞分离方法
- 本发明提供一种大鼠肝细胞分离方法，包括步骤：（a）取出大鼠肝脏；（b）预热35~38℃的无钙灌流液灌流，直到肝脏胀大；（c）剪断肝下下腔静脉，使血液流出，直到肝脏成土黄色；（d）预热的35~38℃含钙灌流液灌流3~7mi...
- 邢雪琨陈红丽樊晋宇武红艳郏亚静
- 文献传递
- 用精神分裂症患者皮肤成纤维细胞构建诱导性多潜能干细胞模型被引量：1
- 2016年
- 目的将精神分裂症患者来源的人皮肤成纤维细胞(HDF)重编程为诱导性多潜能干细胞(i PSCs),为精神分裂症患者建立i PSCs模型。方法采用聚合酶链反应技术从p EP4EO2SEM2K质粒上扩增2条目的片段:OCT4-IRES2-SOX2和C-MYC-IRES2-KLF4,将其连接到慢病毒载体p LVX-IRES-m Cherry上。构建成功的质粒通过磷酸钙转染法转染293T细胞包装病毒,检测病毒活力后侵染患者皮肤成纤维细胞,将其去分化为诱导性多潜能干细胞,并检测其多能性。结果测序表明重组慢病毒载体构建成功,并制备了具有良好侵染活力的重组慢病毒。将含4种重编程因子的慢病毒颗粒侵染1例精神分裂症患者的HDF后,HDF的形态逐步发生变化,最终形成典型的i PSCs克隆。结论成功将1例精神分裂症患者成纤维细胞重编程为iPSCs,为以后建立更多精神分裂症疾病模型奠定基础。
- 任佩佩樊晋宇郭鑫鑫原志庆林俊堂丰慧根
- 关键词：诱导性多潜能干细胞精神分裂症人皮肤成纤维细胞细胞模型
- 大鼠肝窦内皮细胞的分离、鉴定及纯度、活性分析被引量：2
- 2009年
- 按Higgins等方法制作大鼠2/3肝切除(parital hepatectomy,PH)模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,用60% Percoll梯度离心和免疫磁珠分离肝窦内皮细胞(hepatic sinusoidal endothelial cell,SEC),用分化抗原簇14(cluster of differentiation 14,CD14)和内皮素-1(endothelin-1,ET-1)的免疫组织化学定性、定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝脏细胞及分离的窦内皮细胞,用RT-PCR定量窦内皮细胞的CD14和ET-1的mRNA,用蛋白免疫印迹方法定量窦内皮细胞的CD14和ET-1蛋白.初步证实,分离的窦内皮细胞中CD14和ET-1阳性细胞占95%以上,从PH后各时间点分离的窦内皮细胞的CD14和ET-1mRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定.表明改进的分离窦内皮细胞方法具有收率和纯度高、活性好等特点,值得采用.
- 王泽王磊谢来峰樊晋宇徐存拴
- 关键词：窦内皮细胞免疫磁珠标记蛋白
- 大鼠肝卵圆细胞的分离、鉴定及纯度、活性分析被引量：1
- 2009年
- 按Higgins等方法制作大鼠2/3肝切除(parital hepatectomy,PH)模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,用60%Percoll梯度离心给合免疫磁珠分离方法卵圆细胞(oval cell,OC).用卵圆细胞标志蛋白OC2和OV6的免疫组织化学方法定性、定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝脏细胞及分离的卵圆细胞,用RT-PCR定量卵圆细胞的OC2和OV6 mRNA,用蛋白免疫印迹方法定量卵圆细胞的OC2和OV6蛋白.初步证实分离的肝卵圆细胞中,OC2和OV6阳性细胞占96%以上,从PH后各时间点分离的肝卵圆细胞的OC2和OV6 mRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定.表明改进的分离肝卵圆细胞方法具有收率和纯度高、活性好等优点,值得采用.
- 陆琼谢来峰王磊樊晋宇徐存拴
- 关键词：肝卵圆细胞免疫磁珠标记蛋白
