王磊
- 作品数：16 被引量：34H指数：4
- 供职机构：河南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：河南省重大公益性科研项目国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 大鼠肝肿瘤成模过程中肝组织结构变化被引量：2
- 2009年
- 为了解大鼠肝肿瘤成模过程中肝组织结构变化,用二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DENA)灌胃法构建大鼠肝肿瘤模型,按常规方法制备肝组织石蜡切片和镜检.建模第1周大鼠肝脏的肝小叶结构完整,肝细胞排列整齐.从第5周起肝窦扩张,肝细胞变性肿胀并有不同程度的脂肪变性,同时出现炎症细胞浸润.第8周时肝窦充血,肝细胞脂肪变性严重,并出现纤维组织增生和明显的肝细胞增生.第10周时肝小叶结构受到破坏,出现肝细胞增生性结节.第12周时门管区内有不同程度的卵圆细胞增生及结缔组织增生,伴随胆管增生.第16周时肝小叶结构消失,可见典型的假小叶结构,结节内肝细胞异常增生明显,出现"结中结",病理性核分裂相亦较多.第17周时肝肿瘤形成,且主要是肝细胞癌,癌细胞排列为索状、腺状、实片状.根据上述结果得出如下结论:用二乙基亚硝胺灌胃法构建大鼠肝肿瘤模型方便有效,肝组织结构和病理变化有规律,易于观察分析,值得推广应用.
- 王磊李霄培徐军政高太新徐存拴
- 关键词：二乙基亚硝胺
- 大鼠肝再生中8种肝脏细胞的细胞免疫相关基因转录谱预示的生理活动被引量：4
- 2010年
- 目的了解大鼠肝再生中8种肝脏细胞的细胞免疫相关基因转录谱,及其预示的细胞免疫活动。方法用Percoll密度梯度离心结合免疫磁珠分选方法分离大鼠再生肝的肝细胞、胆管上皮细胞、卵圆细胞、星形细胞、窦内皮细胞、库普弗细胞、陷窝细胞和树突状细胞等8种细胞,用RatGenome2302.0芯片等检测细胞免疫相关基因在上述细胞中表达变化,用Cluster等软件及生物信息学和系统学生物等方法分析它们的表达模式及预示的生理活动。结果大鼠肝再生中40个细胞免疫相关基因发生了表达变化,相应细胞的基因数为19、19、9、19、19、21、22、21。肝再生启动阶段和进展阶段抗原肽-MHC复合物形成,NF-κB激酶活性和IL-2等细胞因子合成增加,终止阶段NF-κB促进细胞分化活动和caspase诱导T细胞凋亡活动增强。结论大鼠肝再生与细胞免疫相关。
- 王磊高静徐存拴
- 关键词：肝再生GENOME细胞免疫免疫磁珠分选
- 大鼠肝库普弗细胞的分离、鉴定及纯度、活性分析被引量：2
- 2009年
- 按Higgins等方法制作大鼠2/3肝切除(partial hepatectomy,PH)模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,用60%Percoll梯度离心结合免疫磁珠方法分离库普弗细胞(Kupffer cell,KC),用外胚层发育不良抗原2(ectodermal dysplasia antigen2,ED2)和溶菌酶(lysozyme,LYZ)的免疫组织化学方法定性、定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝脏细胞及分离的库普弗细胞,用RT-PCR定量库普弗细胞的ED2和LYZmRNA,用蛋白免疫印迹方法定量库普弗细胞的ED2和LYZ蛋白.初步证实,分离的肝库普弗细胞中ED2和LYZ阳性细胞占96%以上,从PH后各时间点分离的库普弗细胞ED2和LYZmRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定.表明改进的分离库普弗细胞方法具有收率和纯度高、活性好等优点,值得采用.
- 丁博王磊谢来峰樊晋宇徐存拴
- 关键词：库普弗细胞免疫磁珠标记蛋白
- 大鼠肝星形细胞的分离、鉴定及纯度、活性分析被引量：4
- 2009年
- 按Higgins等方法制作大鼠2/3肝切除(parital hepatectomy,PH)模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,用60%Percoll梯度离心和免疫磁珠相结合分离肝星形细胞,用结蛋白(desmin,DES)和波形蛋白(vimentin,VIM)的免疫组织化学定性、定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝脏细胞及分离的肝星形细胞,用RT-PCR定量肝星形细胞的DES和VIM mRNA,用蛋白免疫印迹定量肝星形细胞DES和VIM.初步证实,分离的肝星形细胞中DES和VIM阳性细胞占95%以上,从PH后各时间点分离的肝星形细胞的DES和VIM mRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定.表明改进的分离肝星形细胞方法具有收率和纯度高、活性好等特点,值得采用.
- 张永晶谢来峰王磊樊晋宇徐存拴
- 关键词：肝星形细胞免疫磁珠标记蛋白
- 液压转基因技术应用于大鼠肝脏转基因实验被引量：6
- 2009年
- 目的探讨液压转基因技术（HDT）应用于大鼠肝脏转基因的条件、方法。方法以不同速度从大鼠尾静脉注射不同体积、浓度的含绿色荧光蛋白基因质粒pEGFP—C1，于注射后不同时间取大鼠（各4只）各肝叶制备玲冻切片，在波长488nm的荧光显微镜下观察、计数各肝叶的绿色荧光蛋白表达情况。结果在一次性注射浓度为30mg／L质粒、注射速度为2ml／s、注射体积为大鼠体重9％的条件下，注射pEGFP-C1质粒后6h，绿色荧光蛋白阳性细胞比例最高，占肝脏总细胞的20％以上，从24h起绿色荧光蛋白的表达量逐渐减少，至72h时各肝叶均基本难以检出绿色荧光蛋白阳性细胞。在上述最佳条件下，绿色荧光蛋白在各肝叶的表达情况是：蒂状叶的绿色荧光蛋白阳性细胞约为30％，左叶、中叶、右叶约为20％，尾状叶约为10％。结论液压转基因技术可应用于大鼠肝脏转基因，其适宜条件是：质粒溶液的浓度为30mg／L，注射量为大鼠体重的9％，注射速度为2ml／s，观察转染率的适宜时间是转基因后6～24h。
- 徐存拴邢雪琨谢来峰张明方方崔胜男王磊张富春
- 关键词：肝脏绿色荧光蛋白
- 大鼠肝纤维化及肝硬化成模过程中肝组织结构变化被引量：1
- 2009年
- 为了解大鼠肝纤维化及肝硬化成模过程中肝组织结构变化,用四氯化碳-白酒联合诱导法构建大鼠肝纤维化及肝硬化模型,按常规方法制备肝组织石蜡切片和镜检.建模第1～3周,肝脏的汇管区扩大,出现纤维性增生,肝细胞发生脂肪变性.建模第4～6周,肝脏的汇管区周围形成纤维束.建模第7～9周,纤维束更明显,肝小叶结构紊乱.建模第10～12周,肝小叶结构更加紊乱,出现早期肝硬化迹象.建模第13～15周,肝小叶消失,假小叶出现,肝硬化形成.根据上述结果得出如下结论:皮下注射四氯化碳与口服白酒结合能有效诱导大鼠肝纤维化及肝硬化,肝脏组织结构与病理变化有规律,易于观察分析,值得推广应用.
- 张强伟邢纬王磊徐军政徐存拴
- 关键词：肝小叶
- 三肠目涡虫(Tricladida)中常用的分子标记及研究进展
- 2021年
- 介绍了三肠目涡虫研究中常用的分子标记,以及这些标记基因在DNA条形码、分子系统发育、遗传多样性、种群历史动态和系统地理学等方面的研究进展,并展望了这些分子标记在三肠目涡虫研究中的应用前景以及研究热点.目前,核糖体18S、28S、ITS-1与线粒体基因COI是三肠目涡虫研究中最常用的标记基因,18S,28S常与COI,ITS-1联合构建序列用于分析种间进化关系.COI,ITS-1作为DNA条形码常用于新物种分类学研究,此外还广泛用于遗传多样性、种群历史动态等相关研究.
- 王磊董自梅董自梅陈广文
- 关键词：分子标记DNA条形码分子系统发育
- 大鼠再生肝8种细胞的丝氨酸族氨基酸代谢相关基因的转录谱被引量：2
- 2010年
- 为了解大鼠肝再生中8种肝脏细胞的丝氨酸族氨基酸代谢相关基因转录谱,文章用Percoll密度梯度离心结合免疫磁珠分选分离大鼠的8种再生肝细胞,用Rat Genome 230 2.0芯片等检测它们中丝氨酸族氨基酸代谢相关基因的表达变化,用Cluster和Treeview等软件分析上述基因在肝再生中表达模式,用生物信息学和系统生物学等方法分析上述细胞中丝氨酸族氨基酸代谢活动。结果表明,在27个发生有意义表达变化的基因中,肝细胞、胆管上皮细胞、卵圆细胞、肝星形细胞、窦内皮细胞、库普弗细胞、陷窝细胞、树突状细胞的基因数分别为13、16、11、14、13、11、12、14,相应细胞的上调、下调和上/下调的基因数分别为7、6和0,2、10和4,2、8和1,8、3和3,6、5和2,4、6和1,2、10和0,6、6和2。总的来看,肝再生中各细胞的表达下调基因占优势,但在肝再生启动阶段,肝星形细胞和窦内皮细胞的表达上调基因占优势。上述丝氨酸族氨基酸代谢相关基因转录谱预示丝氨酸族氨基酸的合成主要在肝再生启动阶段的肝细胞、肝星形细胞、窦内皮细胞和库普弗细胞中增强,它们的降解主要在肝再生进展阶段的肝细胞、胆管上皮细胞、陷窝细胞和树突状细胞中进行。
- 常翠芳王改平朱秋实王磊张富春马纪徐存拴
- 关键词：肝再生丝氨酸半胱氨酸
- 大鼠肝窦内皮细胞的分离、鉴定及纯度、活性分析被引量：2
- 2009年
- 按Higgins等方法制作大鼠2/3肝切除(parital hepatectomy,PH)模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,用60% Percoll梯度离心和免疫磁珠分离肝窦内皮细胞(hepatic sinusoidal endothelial cell,SEC),用分化抗原簇14(cluster of differentiation 14,CD14)和内皮素-1(endothelin-1,ET-1)的免疫组织化学定性、定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝脏细胞及分离的窦内皮细胞,用RT-PCR定量窦内皮细胞的CD14和ET-1的mRNA,用蛋白免疫印迹方法定量窦内皮细胞的CD14和ET-1蛋白.初步证实,分离的窦内皮细胞中CD14和ET-1阳性细胞占95%以上,从PH后各时间点分离的窦内皮细胞的CD14和ET-1mRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定.表明改进的分离窦内皮细胞方法具有收率和纯度高、活性好等特点,值得采用.
- 王泽王磊谢来峰樊晋宇徐存拴
- 关键词：窦内皮细胞免疫磁珠标记蛋白
- 大鼠肝卵圆细胞的分离、鉴定及纯度、活性分析被引量：1
- 2009年
- 按Higgins等方法制作大鼠2/3肝切除(parital hepatectomy,PH)模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,用60%Percoll梯度离心给合免疫磁珠分离方法卵圆细胞(oval cell,OC).用卵圆细胞标志蛋白OC2和OV6的免疫组织化学方法定性、定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝脏细胞及分离的卵圆细胞,用RT-PCR定量卵圆细胞的OC2和OV6 mRNA,用蛋白免疫印迹方法定量卵圆细胞的OC2和OV6蛋白.初步证实分离的肝卵圆细胞中,OC2和OV6阳性细胞占96%以上,从PH后各时间点分离的肝卵圆细胞的OC2和OV6 mRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定.表明改进的分离肝卵圆细胞方法具有收率和纯度高、活性好等优点,值得采用.
- 陆琼谢来峰王磊樊晋宇徐存拴
- 关键词：肝卵圆细胞免疫磁珠标记蛋白
